2.3. HPLC analysesSeparation of xan

2.3. HPLC analyses
Separation of xanthones was performed using an Agilent HPLC
series 1200 system (Agilent, Waldbronn, Germany) with ChemStation
software, a model G1379 degasser, a model G1312B binary
gradient pump, a model G1367D thermoautosampler, a model
G1316B column oven and a model G1315C diode array detector.
The column used was a 50  4,6 Zorbax Eclipse XDB from Agilent
(Waldbronn, Germany) operated at a temperature of 25 C.
The mobile phase consisted of 2% acetic acid in water (eluent A)
and 0.5% acetic acid in acetonitrile (eluent B) using a gradient program
as follows: 50–60% B (20 min), 60–70% B (35 min), 70–
100% B (5 min), 100% B isocratic (3 min), 100–0% B (2 min) at a
flow rate of 0.6 mL/min. Total run time was 65 min. The injection
volume was 8 lL for all samples. Xanthones were monitored at254 nm and UV/vis spectra were recorded in the range of 200–
600 nm.
Xanthones were identified by UV/vis and mass spectra and
quantified using a calibration curve of the a-mangostin standard.
The quantification of further, structurally related xanthones was
performed applying a molecular weight correction factor (Chandra,
Rana, & Li, 2001). All determinations were carried out in triplicate.
2.4. LC–MS analyses
LC–MS analyses were performed with an Agilent HPLC series
1100 system equipped with ChemStation software, a model
G1322A degasser, a model G1312A binary gradient pump, a model
G1329/G1330A thermoautosampler, a model G1316A column oven
and a model G1315A diode array detector. The column, eluents and
HPLC parameters were the same as described above. The HPLC-system
was coupled on-line with a Bruker (Bremen, Germany) model
esquire 3000 + ion trap mass spectrometer fitted with an ESI
source. Data acquisition and processing were performed using Esquire
Control Software. Negative ion mass spectra of the column
eluate were recorded in the range of m/z 50–1000. Nitrogen was
used both as drying gas at a flow rate of 10 L/min and as nebulising
gas at a pressure of 60 psi. The nebuliser temperature was set at
365 C. Collision-induced dissociation spectra were obtained with
a fragmentation amplitude of 1.2 V. Helium was used as the collision
gas.
3. Results and discussion
As prenylated xanthones are the major secondary plant metabolites
in mangosteens, they are supposed to be responsible for the
positive health effects of the fruits, thus being the basis for the
claimed effectiveness of functional products from mangosteens.
For most commercial mangosteen products including the analysed
functional beverage, processing of mangosteens is already realised
in their cultivation areas, commonly using the entire fully ripened
fruits including the edible aril segments and the pericarp (Bin Osman
& Milan, 2006; Kanchanapoom & Kanchanapoom, 1998; Morton,
1987). Since mangosteen pericarp has only been consumed in
its country of origin so far and has not been used for human consumption
to a significant extent within the European Community
before May 1997, it is still considered a novel food despite its
long-lasting utilisation as a food and in traditional medicine. This
implies that products containing mangosteen pericarp need to be
authorised according to the Novel Food Directive No. 258/97.
Due to its strict interpretation, thus creating economic trade barriers,
revision of the legislation is currently under discussion (European
Commission, 2011). According to an updated draft version,
exotic fruits with a significant history of use outside the EU will
be permitted to undergo a simplified application procedure based
on a safety assessment considering their history of safe use.
Therefore, one objective of the present study was to provide evidence
of essential equivalence of mangosteen pericarp composition
with particular emphasis on its xanthone profile as
compared to the edible aril segments. Besides the characterisation
and quantification of these constituents in both plant parts, a functional
beverage, produced from purees made from the whole mangosteen
fruits, was also included in the xanthone profiling.
For this purpose, extracts of the mangosteen pericarp, the edible
aril segments and the functional beverage were analysed with
HPLC–DAD and LC–MS. Due to the limited availability of xanthone
references and because UV/vis spectral data do not allow unambiguous
identification of individual components, HPLC coupled to
mass spectrometry proved to be an indispensable tool for peak
assignment. Since limited fragmentation facilitated the tentative
identification of the separated xanthones (Zarena & Sankar,
2009), ESI techniques have been confirmed to be perfectly suitable
for xanthone characterisation due to their soft ionisation yielding
mainly integral molecular ions. The LC–MS data of all identified
xanthones are summarised in Table 1.
3.1. Identification of xanthones from pericarp, aril segments and the
functional beverage with LC–MSn
Fig. 1 shows the HPLC profiles of xanthones extracted from
mangosteen pericarp, aril segments and the functional beverage.
Polarity and hence, the retention time of the compounds was affected
by the position of hydroxyl and prenyl groups varying the
xanthen-9-one core. Similar findings have already been reported
in a previous study by Chaivisuthangkura et al. (2009) evaluating
a method for the determination of xanthones in mangosteen fruits
with HPLC–DAD. In agreement with our study, 254 nm was chosen
as detection wavelength for the fingerprint chromatogram and
quantification of the xanthones.
For ESI-MS analysis, xanthones were recorded in the negative
ion mode. Contrary to the positive mode, negative ionisation resulted
in increased fragmentation of the xanthones in the MS/MS
spectra, thus facilitating their identification and structure elucidation.
In agreement with Zhou, Han, Song, Qiao, and Xu (2008) as
well as Da Costa et al. (2000) fragmentation pathways of the
polyprenylated xanthones were found to follow general trends.
All compounds showed abundant [MH] ions and yielded successive
loss of prenyl residues C4H8 (56 Da) in the MS/MS spectra.
3.1.1. Identification of xanthones from pericarp and aril segments
Astonishingly, the pericarp and aril segments of mangosteens
exhibited similar fingerprints each consisting of two major and five
minor components. Based on molecular weights, order of elution,
comparison with a-mangostin standard, and fragmentation, all 7
compounds belonging to the xanthones were tentatively identified.
Concordant with literature data, the predominant peak could be
assigned to a-mangostin (compound 6) (Chaivisuthangkura et al.,
2009; Jung et al., 2006; Walker, 2007). Fig. 2 shows the mass spectrum
and the suggested fragmentation pathway for a-mangostin.
Fragmentation of m/z 409 for a-mangostin yielded a de-methylated
product ion at m/z 394. In contrast to most other detected
fragments, the product ion at m/z 394 exhibited an even mass.
Since xanthones do not contain three bonding atoms such as nitrogen
or phosphorus, the even mass leads to the assumption, that the
dissociation of the C–O-bond followed a homolytic mechanism.
The resulting radical ion showed a relatively high intensity that
may be due to resonance stabilisation. Similar fragmentation patterns
with a homolytic cleavage and radical fragments of even
masses were also observed for the other xanthones. The predominant
peak in the MS spectrum of a-mangostin is at m/z 351, resulting
from a following ring closure under loss of a C3H7 radical
(43 Da). As a competing reaction, the de-methylated radical ion
reacted under loss of a C4H7 radical (55 Da) from a prenyl group,
yielding a product ion at m/z 339. Under the applied mass spectrometric
conditions, the formation of a de-methoxylated product ion
(32 Da) at m/z 377 was also observed. In addition, the loss of the
second prenyl group in allylic position (56 Da) could be observed
in the MS3-experiments. The fragmentation reactions of a-mangostin
are comparable to those reported by Zhou et al. (2008), who
analysed polyprenylated xanthones from Garcinia xipshuanbannaensis
Y.H. Li. extracts by HPLC–ESI-QTOF-MSn. The second major
peak of mangosteen pericarp (compound 2) was assigned to cmangostin.
Compared to a-mangostin, the c-form is characterised
by the presence of a hydroxyl group at position 7 instead of a
methyl group. Therefore, the elimination of prenyl moieties in
allylic position may be the preferred reaction. Mass spectrometric
J. Wittenauer et al. / Food Chemistry 134 (2012) 445–452 447

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 วิเคราะห์ HPLCใช้ HPLC Agilent การแยกของสารแซนโธนส์ถูกกระทำระบบชุด 1200 (Agilent, Waldbronn เยอรมนี) กับ ChemStationซอฟต์แวร์ การจำลอง G1379 degasser, G1312B รูปแบบไบนารีปั๊มไล่โทนสี การจำลอง G1367D thermoautosampler แบบเตาคอลัมน์ G1316B และเป็นรุ่น G1315C ไดโอดอาร์เรย์จับคอลัมน์ที่ใช้ถูก XDB คราส Zorbax 50 4,6 จาก Agilentดำเนินการ (Waldbronn เยอรมนี) ที่อุณหภูมิ 25 เซลเซียสเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยกรดอะซิติก 2% ในน้ำ (eluent A)และ 0.5% กรดอะซิติกใน acetonitrile (eluent B) โดยใช้โปรแกรมไล่ระดับดังนี้: 50 – 60% B (20 นาที) B 60 – 70% (35 นาที), 70 –100% B (5 นาที), isocratic คิด 100% B (3 นาที), 0-100% B (2 นาที) ในการอัตราการไหลของเวลารวม 0.6 mL/นาที 65 นาที การฉีดเล่ม 8 ตัวอย่างทั้งหมดจะ สารแซนโธนส์ nm at254 ตรวจสอบได้ และบันทึกในช่วง 200 – UV/vis แรมสเป็คตรา600 nmระบุสารแซนโธนส์ UV/vis และแรมสเป็คตรามวล และquantified โดยใช้เส้นโค้งเทียบมาตรฐานได้ mangostinนับของเพิ่มเติม structurally ที่เกี่ยวข้องกับสารแซนโธนส์ถูกดำเนินการใช้ปัจจัยการแก้ไขน้ำหนักโมเลกุล (จันทราอยู่ และ Li, 2001) Determinations ทั้งหมดถูกดำเนินใน triplicate2.4 การ LC – MS วิเคราะห์LC – MS วิเคราะห์ ด้วย Agilent HPLC ชุดการดำเนินพร้อมกับซอฟต์แวร์ ChemStation แบบจำลองระบบ 1100G1322A degasser รุ่น G1312A ไบนารีไล่ระดับเครื่องสูบน้ำ แบบG1329/G1330A thermoautosampler เตาอบรุ่น G1316A คอลัมน์และเป็นรุ่น G1315A ไดโอดอาร์เรย์จับ คอลัมน์ eluents และHPLC พารามิเตอร์เหมือนกับที่อธิบายไว้ข้างต้น ระบบ HPLCมีควบคู่กับแบบ Bruker (เบรเมน เยอรมนี) ออนไลน์โฮ 3000 + กับไอออนมวลมี ESI เป็นสเปกโตรมิเตอร์แหล่งที่มา ซื้อข้อมูลและประมวลผลได้ดำเนินการโดยใช้โฮซอฟต์แวร์ควบคุม แรมสเป็คตรามวลไอออนลบคอลัมน์eluate ได้รับการบันทึกในช่วง 50 – 1000 m/z ไนโตรเจนได้ใช้ เป็นก๊าซแห้งที่อัตราการไหลของ 10 L/min และ เป็น nebulisingแก๊สที่ความดัน 60 psi ตั้งค่าที่อุณหภูมิ nebuliserแรมสเป็คตราเกิดชน C. dissociation 365 ได้รับด้วยมีใช้การกระจายตัวของความกว้างของ 1.2 V. ฮีเลียมเป็นชนก๊าซ3. ผลลัพธ์ และสนทนาเป็นสารแซนโธนส์ prenylated metabolites พืชสำคัญรองในมังคุดเพื่อ พวกเขาควรจะรับผิดชอบการผลบวกสุขภาพผลไม้ จึง เป็นข้อมูลพื้นฐานสำหรับการทำผลิตภัณฑ์จากมังคุดเพื่ออ้างว่าประสิทธิภาพผลิตภัณฑ์มังคุดส่วนใหญ่รวมถึงการ analysedทำเครื่องดื่ม ประมวลผลมังคุดเพื่ออยู่เองก็ยังคิดอยู่แล้วในพื้นที่เพาะปลูกของพวกเขา โดยทั่วไปใช้ทั้งหมดทั้งหมดสุกผลไม้รวมเซกเมนต์ aril กินและ pericarp (Osman ช่องและมิลาน 2006 Kanchanapoom & Kanchanapoom, 1998 มอร์ตัน1987) เนื่องจากใช้มังคุด pericarp ในเท่านั้นของประเทศผู้ผลิตเพื่อให้ห่างไกล และไม่ได้ถูกใช้สำหรับมนุษย์บริโภคขอบเขตที่สำคัญภายในสหภาพยุโรปก่อน 1997 พฤษภาคม ยังคงถือว่าอาหารแม้มีนวนิยายของจัดสรรนาน เป็นอาหาร และยา นี้หมายความว่า ผลิตภัณฑ์ประกอบด้วย pericarp มังคุดต้องมีมาตรฐานตามนวนิยายอาหารคำสั่งหมายเลข 258/97เนื่องจากความเข้มงวดของ จึงสร้างอุปสรรคทางการค้าเศรษฐกิจปรับปรุงกฎหมายที่อยู่ภายใต้การสนทนา (ยุโรปค่าคอมมิชชัน 2011) ตามการปรับปรุงร่างรุ่นน้ำประวัติสำคัญของใช้นอก EU จะได้รับอนุญาตให้รับสมัครง่ายขั้นตอนตามในการประเมินความปลอดภัยพิจารณาประวัติความปลอดภัยใช้ดังนั้น วัตถุประสงค์หนึ่งของการศึกษาปัจจุบันได้ให้หลักฐานของเทียบเท่าที่จำเป็นขององค์ประกอบของ pericarp มังคุดโดยเน้นเฉพาะในโพรไฟล์ของ xanthoneเมื่อเทียบกับเซ็กเมนต์ aril กิน นอกจากการตรวจลักษณะเฉพาะของและนับของ constituents เหล่านี้ในทั้งสองชิ้นส่วนของพืช การทำงานเครื่องดื่ม ผลิตจากผลิตจากมังคุดทั้งหมดผลไม้ ถูกรวมไว้ในการสร้างโพรไฟล์ xanthoneสำหรับวัตถุประสงค์นี้ สารสกัดของ pericarp มังคุด กินเซกเมนต์ aril และเครื่องดื่มหน้าที่ได้ analysed ด้วยHPLC – พ่อและ LC – คุณครบพร้อมใช้งานที่จำกัดของ xanthoneอ้างอิง และข้อมูลสเปกตรัม UV/vis ไม่อนุญาตให้ชัดเจนรหัสของแต่ละส่วนประกอบ HPLC ควบคู่ไปรเมทพิสูจน์ให้ เป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับคกำหนด เนื่องจากการกระจายตัวของจำกัดอำนวยความสะดวกไม่แน่นอนรหัสของสารแซนโธนส์แยก (Zarena & Sankar2009), ได้รับการยืนยันเทคนิค ESI เป็นอย่างเหมาะสมการตรวจลักษณะเฉพาะของ xanthone จาก ionisation อ่อนของผลผลิตส่วนใหญ่เป็นโมเลกุลประจุ ข้อมูลทั้งหมดระบุ LC – MSสารแซนโธนส์จะ summarised ในตารางที่ 13.1. รหัสของสารแซนโธนส์จาก pericarp, aril เซ็กเมนต์และเครื่องดื่มทำงาน ด้วย LC-MSnโพรไฟล์การ HPLC สกัดจากสารแซนโธนส์แสดง fig. 1มังคุด pericarp, aril เซ็กเมนต์ และเครื่องดื่มทำงานขั้ว และ ดังนั้น เวลาเก็บรักษาของสารได้รับผลโดยตำแหน่งของกลุ่มไฮดรอกซิลและ prenyl ที่แตกต่างกันxanthen-9-1 หลักการ รายงานผลการวิจัยที่คล้ายกันแล้วในการก่อนหน้านี้โดย Chaivisuthangkura et al. (2009) ประเมินศึกษาวิธีการกำหนดของสารแซนโธนส์ในผลไม้มังคุดด้วย HPLC-พ่อ ข้อตกลงกับเราศึกษา 254 nm ถูกเลือกเป็นการตรวจหาความยาวคลื่นสำหรับ chromatogram ลายนิ้วมือ และนับของสารแซนโธนส์สำหรับ ESI MS วิเคราะห์ บันทึกสารแซนโธนส์ในการลบโหมดไอออน ขัดกับโหมดบวก ลบ ionisation ผลในการเพิ่มการกระจายตัวของสารแซนโธนส์ใน MS/MSแรมสเป็คตรา elucidation ของรหัสและโครงสร้างที่อำนวยความสะดวกดัง นั้นยังคงโจว ฮา เพลง เคียว และเขา (2008) เป็นรวมทั้งหลักการกระจายตัวของดาคอสตาและ al. (2000) ของการพบสารแซนโธนส์ polyprenylated ไปตามแนวโน้มทั่วไปสารทั้งหมดแสดงให้เห็นว่าประจุ [M H] อุดมสมบูรณ์ และผลต่อเนื่องสูญเสีย prenyl ตก C4H8 (ดา 56) ในแรมสเป็คตรา MS/MS3.1.1. รหัสของสารแซนโธนส์จาก pericarp และ aril เซ็กเมนต์เปลี่ยนแปลง pericarp และ aril เซ็กเมนต์ของมังคุดเพื่อจัดแสดงคล้าย fingerprints ซึ่งหลักสองและห้าส่วนประกอบย่อย ตามน้ำหนักโมเลกุล ลำดับของ elutionเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่ mangostin และการกระจายตัวของ 7 ทั้งหมดสารประกอบของสารแซนโธนส์ที่ระบุอย่างไม่แน่นอนConcordant ข้อมูลวรรณกรรม พีคกันอาจกำหนด (ผสม 6) เป็น mangostin (Chaivisuthangkura et al.,2009 จุงและ al., 2006 วอล์คเกอร์ 2007) Fig. 2 แสดงสเปกตรัมโดยรวมและทางเดินการกระจายตัวของแนะนำสำหรับการ mangostinการกระจายตัวของ m/z 409 สำหรับเป็น mangostin ผล methylated de-ไอออนผลิตภัณฑ์ที่ m/z 394 ตรงข้ามกันส่วนใหญ่ตรวจพบชิ้นส่วน ไอออนผลิตภัณฑ์ที่ m/z 394 จัดแสดงเป็นจำนวนมากแม้แต่เนื่องจากสารแซนโธนส์ประกอบด้วยสามยึดอะตอมเช่นไนโตรเจนหรือฟอสฟอรัส มวลชนแม้กระทั่งนำไปสู่อัสสัมชัญ ที่dissociation C – O-พันธบัตรตามกลไก homolyticไอออนรุนแรงได้ชี้ให้เห็นความเข้มค่อนข้างสูงว่าอาจเกิดจากการสั่นพ้อง stabilisation การกระจายตัวของรูปแบบที่คล้ายกันปริ homolytic และรัศมีการกระจายตัวของแม้ยังสุภัคฝูงสำหรับสารแซนโธนส์อื่น ๆ ที่กันสูงสุดใน MS จำนวนมากการ mangostin เป็นที่ m/z 351 เกิดจากการปิดวงแหวนต่อไปนี้ภายใต้รัศมี C3H7 สูญเสีย(43 ดา) เป็นปฏิกิริยาแข่งขัน ไอออนรุนแรง methylated de-ปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นภายใต้สูญเสีย C4H7 ที่รุนแรง (ดา 55) จากกลุ่ม prenylผลผลิตไอออนผลิตภัณฑ์ที่ m/z 339 ภายใต้ใช้มวล spectrometricเงื่อนไข การก่อตัวของไอออนเป็นผลิตภัณฑ์เดอ methoxylated(32 ดา) ที่ m/z 377 ถูกยังตรวจสอบ นอกจากนี้ สูญเสียการสามารถสังเกตกลุ่ม prenyl ที่สองในตำแหน่ง allylic (ดา 56)ใน MS3-ทดลอง ปฏิกิริยาการกระจายตัวของของการ mangostinเปรียบเทียบได้กับรายงานโดยโจว et al. (2008), ที่analysed polyprenylated สารแซนโธนส์จาก xipshuanbannaensis เนียY.H. Li. สารสกัด โดย HPLC – ESI-QTOF-MSn หลักสองสูงสุดของ pericarp มังคุด (ผสม 2) ถูกกำหนดให้กับ cmangostinเมื่อเทียบกับ a mangostin แบบ c มีประสบการ์โดยสถานะของกลุ่มไฮดรอกซิลที่ตำแหน่ง 7 แทนการกลุ่ม methyl ดังนั้น การกำจัดของ moieties prenyl ในตำแหน่ง allylic อาจเป็นปฏิกิริยาที่ต้องการ โดยรวม spectrometricJ. Wittenauer et al. / เคมีอาหาร 134 (2012) 445-452 447

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 HPLC วิเคราะห์
แยกแซนโทนได้รับการดำเนินการโดยใช้ Agilent HPLC
ชุด 1200 ระบบ (Agilent, Waldbronn, เยอรมนี) กับ ChemStation
ซอฟต์แวร์รุ่น G1379 degasser รุ่น G1312B ไบนารี
ปั๊มไล่ระดับแบบ G1367D thermoautosampler รูปแบบ
เตาอบคอลัมน์ G1316B และรูปแบบ G1315C เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด.
คอลัมน์ที่ใช้เป็น 50? 4,6 Zorbax คราส XDB จาก Agilent
(Waldbronn, เยอรมนี) ดำเนินการที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส.
เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 2% กรดอะซิติกในน้ำ (ชะ)
และ 0.5% กรดอะซิติกใน acetonitrile (ชะ B) โดยใช้ โปรแกรมการไล่ระดับสี
ดังนี้ 50-60% B (20 นาที) 60-70% B (35 นาที), 70-
100% B (5 นาที) 100% B Isocratic (3 นาที), 100-0% B ( 2 นาที) ที่
อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร / นาที เวลาทำงานรวมเป็น 65 นาที ฉีด
ปริมาณ 8 lL สำหรับกลุ่มตัวอย่างทั้งหมด แซนโทนได้รับการตรวจสอบนาโนเมตร at254 และ UV / Vis สเปกตรัมถูกบันทึกไว้ในช่วงของ 200-
600 นาโนเมตร.
แซนโทนที่ถูกระบุโดย UV / สเปกตรัม VIS และมวลและ
ปริมาณการใช้เส้นโค้งการสอบเทียบมาตรฐาน-เปลือกมังคุด.
ปริมาณต่อโครงสร้าง แซนโทนที่เกี่ยวข้องได้รับการ
ดำเนินการใช้ปัจจัยการแก้ไขน้ำหนักโมเลกุล (จันทรา
รานาและหลี่, 2001) การตรวจวัดทั้งหมดถูกดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า.
2.4 LC-MS วิเคราะห์
LC-MS วิเคราะห์ได้ดำเนินการกับชุด Agilent HPLC
1100 ระบบการติดตั้งซอฟแวร์ ChemStation, รุ่น
G1322A degasser รุ่น G1312A ปั๊มลาดไบนารี, รุ่น
G1329 / G1330A thermoautosampler คอลัมน์รุ่น G1316A เตาอบ
และ G1315A รูปแบบ เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด คอลัมน์ตัวชะและ
พารามิเตอร์ HPLC ได้เหมือนกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้น HPLC ระบบ
เป็นคู่ในสายพร้อม Bruker (เบรเมน, เยอรมนี) รูปแบบ
อัศวิน 3000 + ไอออนกับดักสเปกโตรมิเตอร์มวลพอดีกับ ESI
แหล่งที่มา เก็บข้อมูลและการประมวลผลได้รับการดำเนินการโดยใช้อัศวิน
ซอฟแวร์ควบคุม สเปกตรัมมวลไอออนลบของคอลัมน์
eluate ถูกบันทึกไว้ในช่วงของเมตร / Z 50-1000 ไนโตรเจนถูก
ใช้เป็นทั้งการอบแห้งก๊าซที่อัตราการไหล 10 ลิตร / นาทีและเป็น nebulising
ก๊าซที่ความดัน 60 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว อุณหภูมิ Nebuliser ตั้งอยู่ที่
365 องศาเซลเซียส สเปกตรัมแยกออกจากการปะทะกันที่เกิดขึ้นได้รับกับ
การกระจายตัวของความกว้าง 1.2 V. ฮีเลียมถูกใช้เป็นชน
ก๊าซ.
3 ผลและการอภิปราย
ในฐานะที่เป็นแซนโทน prenylated เป็นสารจากพืชที่สำคัญรอง
ในมังคุดที่พวกเขาควรจะต้องรับผิดชอบใน
ผลกระทบต่อสุขภาพที่ดีของผลไม้จึงเป็นพื้นฐานสำหรับการ
อ้างว่าประสิทธิภาพการทำงานของผลิตภัณฑ์จากมังคุด.
สำหรับผลิตภัณฑ์มังคุดเชิงพาณิชย์มากที่สุดรวมทั้ง วิเคราะห์
เครื่องดื่มฟังก์ชั่นการประมวลผลของมังคุดจะรู้อยู่แล้ว
ในพื้นที่เพาะปลูกของพวกเขาใช้กันทั่วไปทั้งสุกอย่างเต็มที่
รวมทั้งผลไม้ส่วนยวงและกินเปลือก (บินออส
และเอซีมิลาน, 2006; Kanchanapoom & Kanchanapoom 1998; มอร์ตัน
1987) ตั้งแต่เปลือกมังคุดมีเพียงการบริโภคใน
ประเทศต้นกำเนิดเพื่อให้ห่างไกลและยังไม่ได้ถูกนำมาใช้สำหรับการบริโภคของมนุษย์
ในระดับที่มีนัยสำคัญในประชาคมยุโรป
ก่อนเดือนพฤษภาคมปี 1997 ก็ถือว่ายังคงเป็นอาหารของนวนิยายแม้จะมี
การใช้ที่ยาวนานเป็นอาหาร และในยาแผนโบราณ นี้
แสดงให้เห็นว่าผลิตภัณฑ์ที่มีเปลือกมังคุดจะต้องมีการ
อนุญาตให้เป็นไปตามคำสั่งอาหารนวนิยายที่ 258/97.
เนื่องจากการตีความเข้มงวดดังนั้นการสร้างอุปสรรคทางการค้าเศรษฐกิจ
การแก้ไขของกฎหมายปัจจุบันภายใต้การสนทนา (ยุโรป
คณะกรรมาธิการ 2011) ตามที่ฉบับร่างปรับปรุง
ผลไม้ที่มีประวัติศาสตร์ที่สำคัญของการใช้งานนอกสหภาพยุโรปจะ
ได้รับอนุญาตให้ผ่านขั้นตอนการสมัครง่ายขึ้นอยู่
กับการประเมินความปลอดภัยพิจารณาประวัติศาสตร์ของพวกเขาในการใช้ที่ปลอดภัย.
ดังนั้นหนึ่งวัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้คือการให้ หลักฐาน
ของความเท่าเทียมกันที่สำคัญขององค์ประกอบของเปลือกมังคุด
โดยเน้นเฉพาะในรายละเอียดของแซนโทนเป็น
เมื่อเทียบกับกลุ่มที่กินยวง นอกจากนี้ลักษณะ
และปริมาณขององค์ประกอบเหล่านี้ทั้งในส่วนต่างๆของพืช, การทำงาน
เครื่องดื่มที่ผลิตจาก purees ทำจากมังคุดทั้ง
ผลไม้ก็รวมอยู่ในโปรไฟล์แซนโทน.
เพื่อจุดประสงค์นี้สารสกัดจากเปลือกมังคุด, กิน
ส่วนยวงและ เครื่องดื่มฟังก์ชั่นได้รับการวิเคราะห์ด้วย
HPLC-DAD และ LC-MS เนื่องจากมีข้อ จำกัด ของแซนโทน
อ้างอิงและเนื่องจากรังสียูวี / พิพาทข้อมูลสเปกตรัมไม่อนุญาตให้โปร่งใส
บัตรประจำตัวของแต่ละองค์ประกอบ, HPLC คู่กับ
มวลสารพิสูจน์แล้วว่าเป็นเครื่องมือที่จำเป็นสำหรับจุดสูงสุด
ที่ได้รับมอบหมาย ตั้งแต่การกระจายตัว จำกัด การอำนวยความสะดวกในเบื้องต้น
บัตรประจำตัวของแซนโทนแยก (Zarena & Sankar,
2009) เทคนิค ESI ได้รับการยืนยันที่จะเป็นอย่างดีเหมาะ
สำหรับลักษณะแซนโทนเนื่องจาก Ionisation อ่อนของพวกเขาที่ให้ผลผลิต
ส่วนใหญ่ไอออนโมเลกุลหนึ่ง ข้อมูล LC-MS ของระบุทั้งหมด
แซนโทนมีรายละเอียดในตารางที่ 1.
3.1 บัตรประจำตัวของแซนโทนจากเปลือกส่วนยวงและ
เครื่องดื่มการทำงานที่มี LC-MSN
รูป 1 แสดงโปรไฟล์ HPLC ของแซนโทนสกัดจาก
เปลือกมังคุดส่วนยวงและเครื่องดื่มการทำงาน.
ขั้วและด้วยเหตุนี้เวลาเก็บกักของสารได้รับผลกระทบ
โดยตำแหน่งของกลุ่มไฮดรอกและ prenyl แตกต่างกัน
xanthen-9-หนึ่งหลัก การค้นพบที่คล้ายกันได้รับการรายงาน
ในการศึกษาก่อนหน้าโดย Chaivisuthangkura และคณะ (2009) การประเมิน
วิธีวิเคราะห์ของแซนโทนในมังคุดผลไม้
ด้วยวิธี HPLC-DAD ในข้อตกลงกับการศึกษาของเรา, 254 นาโนเมตรได้รับเลือกให้
เป็นความยาวคลื่นการตรวจสอบสำหรับ chromatogram ลายนิ้วมือและ
ปริมาณของสารแซนโธ.
สำหรับการวิเคราะห์ ESI-MS, แซนโทนถูกบันทึกไว้ในเชิงลบ
โหมดไอออน ตรงกันข้ามกับโหมดบวก Ionisation เชิงลบส่งผล
ในการกระจายตัวที่เพิ่มขึ้นของแซนโทนใน MS / MS
สเปกตรัมจึงอำนวยความสะดวกประชาชนและชี้แจงโครงสร้างของพวกเขา.
ในข้อตกลงกับโจฮัน, เพลง, Qiao และ Xu (2008) ในฐานะ
เดียวกับดา คอสตาและคณะ (2000) ทางเดินการกระจายตัวของ
สารแซนโธ polyprenylated พบว่าปฏิบัติตามแนวโน้มทั่วไป.
สารประกอบทั้งหมดแสดงให้เห็นความอุดมสมบูรณ์ [M? H]? ไอออนและให้ผลต่อเนื่อง
การสูญเสียของสารตกค้าง prenyl C4H8 (56 ดา) ใน MS / MS สเปกตรัม.
3.1.1 บัตรประจำตัวของแซนโทนจากเปลือกและกลุ่มยวง
อย่างน่าอัศจรรย์, เปลือกและกลุ่มยวงของมังคุด
แสดงลายนิ้วมือที่คล้ายกันแต่ละประกอบด้วยสองรายใหญ่และห้า
ส่วนประกอบเล็กน้อย ขึ้นอยู่กับน้ำหนักโมเลกุลคำสั่งของชะ,
การเปรียบเทียบกับมาตรฐาน-เปลือกมังคุดและการกระจายตัวทั้งหมด 7
สารประกอบที่อยู่ในประเภทสารแซนโธถูกระบุแน่นอน.
พ้องกับข้อมูลวรรณกรรมสูงสุดเด่นจะได้รับการ
มอบหมายให้-เปลือกมังคุด (สารประกอบ 6) ( Chaivisuthangkura, et al.
2009; Jung, et al, 2006;. วอล์คเกอร์, 2007) มะเดื่อ 2 แสดงสเปกตรัมมวล
และการกระจายตัวทางเดินแนะนำสำหรับการ-เปลือกมังคุด.
การกระจายตัวของม. / Z 409 สำหรับ-เปลือกมังคุด yielded de-methylated
ไอออนผลิตภัณฑ์ที่ม. / Z 394. ในทางตรงกันข้ามกับอื่น ๆ ส่วนใหญ่ตรวจพบ
เศษ, ไอออนผลิตภัณฑ์ที่ เมตร / Z 394 แสดงมวลแม้.
ตั้งแต่แซนโทนไม่ประกอบด้วยสามอะตอมพันธะเช่นไนโตรเจน
หรือฟอสฟอรัสนำไปสู่มวลแม้สมมติฐานที่
แยกออกจากกันของ C-O-พันธบัตรตามกลไก homolytic.
ไอออนรุนแรงที่เกิดขึ้น แสดงให้เห็นว่ามีความรุนแรงค่อนข้างสูงว่า
อาจจะเป็นเพราะเสียงสะท้อนเสถียรภาพ รูปแบบการกระจายตัวที่คล้ายกัน
ด้วยความแตกแยก homolytic และเศษรุนแรงแม้แต่
ฝูงยังถูกตั้งข้อสังเกตสำหรับแซนโทนอื่น ๆ เด่น
สูงสุดในสเปกตรัมของ MS-เปลือกมังคุดที่ม. / Z 351, ผล
จากการปิดแหวนต่อไปภายใต้การสูญเสียของ C3H7 รุนแรง
(43 ดา) ในฐานะที่เป็นปฏิกิริยาการแข่งขัน de-methylated ไอออนรุนแรง
ปฏิกิริยาภายใต้การสูญเสียของ C4H7 รุนแรง (? 55 ดา) จากกลุ่ม prenyl,
ยอมไอออนผลิตภัณฑ์ที่ม. / Z 339 ภายใต้มวล spectrometric ใช้
เงื่อนไขการก่อตัวของเดอ -methoxylated ไอออนผลิตภัณฑ์
(32 ดา) ที่ม. / Z 377 ยังเป็นที่สังเกต นอกจากนี้การสูญเสียของ
กลุ่ม prenyl ที่สองในตำแหน่ง allylic (56 ดา) อาจจะมีการตั้งข้อสังเกต
ในการทดลอง MS3- ปฏิกิริยาการกระจายตัวของ-เปลือกมังคุด
จะเปรียบกับผู้ที่รายงานโดยโจวและคณะ (2008) ที่
วิเคราะห์ polyprenylated แซนโทนจากผลส้มแขก xipshuanbannaensis
YH หลี่ สารสกัดโดยวิธี HPLC-ESI-QTOF-MSN ที่สำคัญที่สอง
จุดสูงสุดของเปลือกมังคุด (สารประกอบ 2) ได้รับมอบหมายให้ cmangostin.
เมื่อเทียบกับ-เปลือกมังคุด, C-รูปแบบเป็นลักษณะ
การปรากฏตัวของกลุ่มไฮดรอกที่ตำแหน่ง 7 แทน
กลุ่มเมธิล ดังนั้นการกำจัดของ moieties prenyl ใน
ตำแหน่ง allylic อาจจะเป็นปฏิกิริยาที่ต้องการ มวล spectrometric
เจ Wittenauer และคณะ / เคมีอาหาร 134 (2012) 445-452 447

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 เทคนิคการวิเคราะห์คุณค่า
แยกการใช้ด้าน HPLC
ชุด 1200 ระบบ ( Agilent , waldbronn , เยอรมนี ) กับซอฟต์แวร์ chemstation
, รูปแบบ g1379 degasser , รูปแบบ g1312b ไบนารี
ลาดปั๊ม แบบ g1367d thermoautosampler , เตาอบคอลัมน์รูปแบบ
g1316b และรูปแบบ g1315c ไดโอดเรย์
คอลัมน์ที่ใช้ตรวจจับ เป็น 50  6 zorbax คราส xdb
( waldbronn จาก Agilent ,เยอรมนี ) ทำงานที่อุณหภูมิ 25 C .
 เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 2% กรดในน้ำ ( ตัว )
0.5% และกรดใน Acetonitrile ( ตัว B ) ใช้โปรแกรมลาด
ดังนี้ 50 – 60 % B ( 20 นาที ) , 60 – 70 % B ( 35 นาที ) , 70 (
100 % B ( 5 นาที ) , Isocratic 100 % B ( 3 นาที ) , 100 – 0 % B ( 2 นาที ) ที่
อัตรา 0.6 มิลลิลิตร / นาที รวมเวลา 65 นาทีวิ่งฉีด
เล่ม 8 จะมาทุกตัวอย่าง แซนโธน ถูก at254 nm และ UV / Vis สเปกตรัมที่ได้ถูกบันทึกไว้ในช่วง 200 – 600 nm
.
แซนโทนที่ถูกระบุโดย UV / VIS และมวลสเปกตรัมและ
quantified ใช้เส้นปรับเทียบมาตรฐานของ a-mangostin .
ปริมาณของโครงสร้างที่เกี่ยวข้องเพิ่มเติม แซนโทนเป็น
ดำเนินการใช้ปัจจัยการแก้ไข ( โมเลกุล จันทรา ,
รานา&ลี่2001 ) ทั้งหมดข้างต้น พบว่าทั้งสามใบ
2.4 . แอล–วิเคราะห์
LC MS / MS และมีการปฏิบัติกับเลนต์ HPLC 1100 ระบบติดตั้งซอฟต์แวร์ชุด

g1322a degasser chemstation , รูปแบบ , รูปแบบ g1312a ไบนารีการปั๊มแบบ
g1329 / g1330a thermoautosampler , รูปแบบ g1316a คอลัมน์เตาอบ
และรูปแบบ g1315a ไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับ ตัวชะและ
คอลัมน์โดยมีพารามิเตอร์เดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ระบบ HPLC
เป็นคู่ออนไลน์กับบรุคเกอร์ ( เบรเมน , เยอรมัน ) รุ่น
ขาย 3000 ไอออนกับดักแมสสเปกโทรมิเตอร์ติดตั้งกับ ESI
แหล่ง การเก็บข้อมูลและการประมวลผลการใช้ซอฟต์แวร์ควบคุมขาย

สเปกตรัมมวลไอออนลบของคอลัมน์
สารละลาย ( eluate ) ถูกบันทึกไว้ในช่วงของ M / Z 50 – 1000
ไนโตรเจนคือใช้เป็นทั้งอบแห้ง อัตราการไหลของแก๊สที่ลิตร / นาที ที่ 10 และเป็น nebulising
ก๊าซที่ความดัน 60 psi . โดย Nebuliser อุณหภูมิไว้ที่ 365  C จากการการปะทะกัน

เป็นสเปกตรัมได้ศึกษาขนาด 1.2 V . ฮีเลียมถูกใช้เป็นแก๊สชน
.
3 ผลและการอภิปราย
เป็นสารประกอบฟลาโวนซึ่งมีหมู่พรีแซนโทนเป็นหลักรองพืชหลายชนิด
ในมังคุดพวกเขาควรจะรับผิดชอบ
บวกผลกระทบต่อสุขภาพของผลไม้จึงเป็นพื้นฐานสำหรับ
อ้างว่าประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์การทำงานจากมังคุด .
สำหรับผลิตภัณฑ์เชิงพาณิชย์มากที่สุดรวมทั้งวิเคราะห์
หน้าที่เครื่องดื่มมังคุดแปรรูปมังคุดก็ตระหนัก
ในพื้นที่การเพาะปลูกของพวกเขา โดยทั่วไปใช้ทั้งสุก
อย่างเต็มที่ผลไม้รวมกินเนื้อกลุ่มและเปลือก ( บินอุสมาน
&มิลาน , 2006 ; เจริญ&เจริญ , 2541 , มอร์ตัน ,
, 1987 ) เพราะเปลือกมังคุดได้รับการบริโภคในประเทศ
ของมันเพื่อให้ห่างไกลและไม่ได้ถูกใช้สำหรับมนุษย์บริโภค
ในขอบเขตที่สำคัญภายในประชาคมยุโรป
ก่อนพฤษภาคม 1997 ก็ยังถือว่าเป็นอาหารใหม่แม้จะมี
ยาวนานต่อเนื่อง เป็นอาหาร และการแพทย์แบบดั้งเดิม นี้
หมายความว่าผลิตภัณฑ์ที่มีเปลือกมังคุดต้อง
อนุญาตตามนวนิยายคำสั่งอาหารเลขที่ 258 / 97 .
เนื่องจากการตีความอย่างเข้มงวด ดังนั้น การสร้างอุปสรรคทางการค้าทางเศรษฐกิจ
แก้ไขกฎหมายอยู่ภายใต้การอภิปราย ( คณะกรรมาธิการยุโรป
, 2011 ) ตามที่ได้มีการปรับปรุงร่าง
รุ่นผลไม้ที่มีประวัติสำคัญของใช้นอกสหภาพยุโรปจะได้รับอนุญาตให้ผ่าน

ใช้ง่ายโปรแกรมขั้นตอนในการประเมินความปลอดภัยของการใช้พิจารณาประวัติของพวกเขาปลอดภัย .
ดังนั้นหนึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อให้หลักฐานของความสมดุลที่จำเป็นของเปลือกผลมังคุด

โดยเฉพาะองค์ประกอบในโปรไฟล์ของแซนโทน
เทียบกับกินเนื้อกลุ่ม นอกจากนี้ปริมาณขององค์ประกอบเหล่านี้และหลัก
ทั้งในส่วนของพืช , การทำงาน
เครื่องดื่มผลิตจาก purees ที่ทำจากผลไม้มังคุด
ทั้งหมดก็รวมอยู่ในแซนโทนโปรไฟล์ .
สำหรับวัตถุประสงค์นี้ สารสกัดจากมังคุดเปลือก , กลุ่มพืช
ยวงเครื่องดื่มที่ทํางานและวิเคราะห์กับ
พ่อ– HPLC และ LC –คุณเนื่องจากความพร้อมจำกัดของ xanthone
อ้างอิงเพราะ UV / VIS ข้อมูลสเปกตรัมไม่อนุญาตให้ระบุชัดเจน
ของแต่ละองค์ประกอบ 2 คู่

มวลสารพิสูจน์แล้วว่าเป็นเครื่องมือที่จำเป็นสำหรับงานยอด

ตั้งแต่การติดตั้งการกัดแน่นอน
ของแยกแซนโทน ( zarena ซังก้า
& , 2009 )เทคนิค ESI ได้รับการยืนยันเป็นอย่างดีเหมาะสำหรับลักษณะของ xanthone
เนื่องจากนุ่ม ionisation ไอออนโมเลกุลหนึ่งส่วนใหญ่ยอม

LC – MS ข้อมูลทั้งหมดระบุ
แซนโทนเป็นสรุปในตารางที่ 1 .
1 . รหัสของแซนโทนจากเปลือกและส่วนเนื้อ
เครื่องดื่มที่ทํางานกับ LC – MSN
รูปที่ 1 แสดงโดยคุณค่าสกัดจาก
โปรไฟล์เปลือกมังคุด , ส่วนเนื้อเครื่องดื่มที่ทํางานและ .
ขั้วและดังนั้นในเวลาของสารประกอบที่ได้รับผลกระทบ
โดยตำแหน่งของหมู่ไฮดรอกซิลและกลุ่ม prenyl ค่า
xanthen-9-one หลัก ผลที่คล้ายกันได้รับการรายงานในการศึกษาก่อนหน้านี้โดย
chaivisuthangkura et al . ( 2009 ) การประเมิน
เป็นวิธีการหาปริมาณแซนโทนในมังคุดผลไม้
ด้วย HPLC และพ่อ ในข้อตกลงกับการศึกษาของเรา , 254 nm ได้รับเลือกเป็นความยาวคลื่นสำหรับการตรวจจับ
ลายนิ้วมือและปริมาณของแซนโทนโครมา
.
สำหรับการวิเคราะห์ esi-ms แซนโทน , ถูกบันทึกไว้ในโหมดไอออนลบ

ตรงข้ามกับโหมดบวก ลบ โดย ionisation
เพิ่มขึ้น fragmentation ของแซนโทนใน MS / MS
สเปกตรัมดังนั้นการระบุและหาสูตรโครงสร้างของพวกเขา .
ในข้อตกลงกับโจว , ฮัน , เพลง , เชา และ ซู ( 2008 )
รวมทั้งดาคอสตา et al . ( 2000 ) การรับของ
polyprenylated แซนโทน พบตามแนวโน้มทั่วไป .
สารประกอบทั้งหมดพบมากมาย [ M  H ]  ไอออน และให้ผลขาดทุนต่อเนื่อง
ของ prenyl ตกค้าง c4h8 (  56 ดา ) ใน MS / MS spectra .
3.1.1 .รหัสของแซนโทนจากเปลือกและส่วนเนื้อ
อย่างน่าอัศจรรย์ , เปลือกและเนื้อส่วนของมังคุด
มีลายนิ้วมือที่คล้ายกันแต่ละประกอบด้วยหลักสองและห้า
ส่วนประกอบรอง ขึ้นอยู่กับน้ำหนักโมเลกุล เพื่อใช้เปรียบเทียบกับมาตรฐาน a-mangostin
, และ , การ ,
7 สารประกอบแซนโทนที่ถูกระบุว่าเป็นของไม่แน่นอน
สอดคล้องกันกับข้อมูลวรรณกรรม , สูงสุด ) ได้มอบหมายให้ a-mangostin
( สารประกอบ 6 ) ( chaivisuthangkura et al . ,
2009 ; จอง et al . , 2006 ; วอล์คเกอร์ , 2007 ) รูปที่ 2 แสดงสเปกตรัมมวล
และแนะนำเส้นทางสำหรับการ a-mangostin .
การแตกแยกของ M / Z 409 สำหรับ a-mangostin จาก เดอ methylated
ผลิตภัณฑ์ไอออนที่ m / z 394 คน ในทางตรงกันข้ามกับอื่นส่วนใหญ่ตรวจพบ
การกระจายตัวผลิตภัณฑ์ไอออนที่ให้มีมวล m / z .
ตั้งแต่แซนโทนไม่ประกอบด้วยสามพันธะอะตอม เช่น ไนโตรเจน หรือ ฟอสฟอรัส
, มวลชนจะนำไปสู่สมมติฐานที่ว่า
หวิวของ C - o-bond ตามกลไกฮอมอลิติก .
ส่งผลรุนแรงไอออนมีความรุนแรงค่อนข้างสูงที่
อาจ จะเนื่องจากเพื่อรักษาเสถียรภาพ . รูปแบบการกระจายตัวที่คล้ายกัน
กับการฮอมอลิติกและอนุมูลอิสระเศษแม้
ฝูงพบสำหรับคุณค่าอื่น ๆ ยอดเขาโดด
ใน MS สเปกตรัมของ a-mangostin เป็นที่ M / Z 351 , ที่เกิดจากการปิดภายใต้แหวน
ต่อไปนี้การสูญเสียของ c3h7 หัวรุนแรง
(  43 ดา ) เป็นการแข่งขันปฏิกิริยา เดอ methylated หัวรุนแรงไอออน
ทำปฏิกิริยาภายใต้การสูญเสียของ c4h7 หัวรุนแรง (  55 ดา ) จากกลุ่ม prenyl
,ผลผลิตผลิตภัณฑ์ไอออนที่ m / z 339 . ภายใต้การใช้มวลความ
เงื่อนไข , การก่อตัวของ เดอ methoxylated
ไอออนผลิตภัณฑ์ (  32 ดา ) M / Z แต่ก็สังเกตได้ นอกจากนี้การสูญเสีย
กลุ่ม prenyl ที่สองในตำแหน่ง allylic (  56 ดา ) สามารถสังเกต
ใน ms3 การทดลอง ของปฏิกิริยาของ a-mangostin
เปรียบเทียบได้กับรายงานโดยโจว et al . ( 2008 ) ,
วิเคราะห์ polyprenylated แซนโทนจากการ์ซีเนีย xipshuanbannaensis
y.h. ลี้ สารสกัดด้วย HPLC ( ESI qtof MSN ยอดเขาหลัก
ที่สองของเปลือกมังคุด ( สาร 2 ) ได้รับมอบหมายให้ cmangostin .
เมื่อเทียบกับ a-mangostin , c-form มีเอกลักษณ์
โดยการแสดงของหมู่ไฮดรอกซิลที่ 7 ตำแหน่ง แทนที่จะเป็น
กลุ่มเมทิล . ดังนั้น การ prenyl
ดังกล่าวในตำแหน่ง allylic อาจมีปฏิกิริยาที่ต้องการ มวลความ
J wittenauer et al . เคมีอาหาร / 134 ( 2012 ) ( 452 447 455