3.3. Excretion of 1-octanolWe noted

3.3. Excretion of 1-octanol
We noted that during the early to late stationary phases of cell cultivation with TPC3-Ahr, a strong perfume-like fragrance emanated from the cell cultures which suggested the extracellular presence of product(s). After separation of the cells from the media, GC–MS analysis confirmed that 73±3% of the total 1-octanol in the culture was present in the media while the remainder was found to be localised within the cellular fraction (Fig. 1c). E. coli harbours a large range of efflux pumps ( Segura et al., 2012). Among them, the AcrAB–TolC complex is the most well-studied and has been implicated in tolerance to exogenously added solvents (Tsukagoshi and Aono, 2000 and White et al., 1997). We constructed an ΔacrA deletion strain of E. coliBL21(DE3) in order to test whether AcrAB–TolC was responsible for the efflux of internally produced 1-octanol. The mutant strain displayed a ~3-fold decrease in excreted 1-octanol along with a similar drop in total 1-octanol production levels ( Fig. 1c). The ratio of external to internal 1-octanol, however, was slightly lower for the ΔacrA deletion strain (2.0) compared to the wild-type strain (2.8). The marked reduction in both excretion and production suggested that the AcrAB–TolC complex is most likely responsible for the majority of 1-octanol efflux.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.3. การขับถ่ายของ 1-octanolเราตั้งข้อสังเกตว่า ในระหว่างช่วงการระยะปลายเครื่องเขียนของการเพาะปลูกเซลล์กับ TPC3 Ahr กลิ่นหอมเหมือนน้ำหอมที่แข็งแกร่ง emanated จากวัฒนธรรมเซลล์ซึ่งแนะนำผลิตภัณฑ์ก็ extracellular หลังจากการแยกเซลล์จากสื่อ GC – MS วิเคราะห์ยืนยันว่า 73±3% ของ 1-octanol รวมในอยู่ในสื่อขณะที่ส่วนเหลือพบอยู่ไหนภายในเศษเซลกิน 1c) E. coli harbours หลากหลาย efflux ปั๊ม (Segura et al., 2012) ในหมู่พวกเขา เชิง AcrAB – TolC เป็นที่สุดแห่ง studied และได้เกี่ยวข้องในการยอมรับหรือสารทำละลายเพิ่ม exogenously (Tsukagoshi และ Aono, 2000 และขาวและ al., 1997) เราสร้างต้องใช้การลบ ΔacrA ของ E. coliBL21(DE3) เพื่อทดสอบว่า AcrAB – TolC ชอบ efflux ของผลิตภายใน 1-octanol แสดงสายพันธุ์กลายพันธุ์เป็น ~ ลดลง 3-fold 1-octanol excreted พร้อมวางเหมือนในระดับการผลิตรวม 1-octanol กิน 1 c) อัตราส่วนของภายนอกภายใน 1-octanol อย่างไรก็ตาม ได้ต่ำกว่าเล็กน้อยสำหรับ ΔacrA การลบพันธุ์ (2.0) เปรียบเทียบกับป่าชนิดพันธุ์ (2.8) ลดเครื่องในการขับถ่ายและผลิตแนะนำว่า ซับซ้อน AcrAB – TolC จะรับผิดชอบส่วนใหญ่ 1-octanol efflux

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.3 การขับถ่ายของ 1-octanol
เราตั้งข้อสังเกตว่าในช่วงต้นถึงขั้นตอนนิ่งช่วงปลายของการเพาะปลูกเซลล์ที่มี TPC3-Ahr, น้ำหอมกลิ่นหอมเหมือนที่แข็งแกร่งเล็ดลอดออกมาจากเซลล์เพาะเลี้ยงซึ่งชี้ให้เห็นการปรากฏตัวนอกของผลิตภัณฑ์ (s) หลังจากการแยกเซลล์จากสื่อการวิเคราะห์ GC-MS ยืนยันว่า 73 ± 3% ของทั้งหมด 1 ทานอลในวัฒนธรรมถูกนำเสนอในสื่อในขณะที่ส่วนที่เหลือก็จะพบว่าได้รับการแปลเป็นภาษาท้องถิ่นในส่วนของเซลล์ (รูป. 1c) . เชื้อ E. coli สถิตอยู่ช่วงใหญ่ของเครื่องสูบน้ำไหล (Segura การ et al., 2012) ในหมู่พวกเขาซับซ้อน AcrAB-TolC เป็นดีที่สุดการศึกษาและได้รับการที่เกี่ยวข้องในการทนทานต่อตัวทำละลายเพิ่มลิ้นจี่ (Tsukagoshi และ Aono, 2000 และสีขาว et al., 1997) เราสร้างสายพันธุ์ลบΔacrAของอี coliBL21 (DE3) เพื่อทดสอบว่า AcrAB-TolC เป็นผู้รับผิดชอบการไหลของการผลิตภายใน 1-octanol สายพันธุ์ที่ปรากฏ ~ ลดลง 3 เท่าในขับออกมา 1 อลพร้อมกับการลดลงที่คล้ายกันในระดับการผลิต 1-octanol ทั้งหมด (รูป. 1c) อัตราส่วนของภายนอกภายใน 1-octanol แต่ลดลงเล็กน้อยสำหรับการลบความเครียดΔacrA (2.0) เมื่อเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ชนิดป่า (2.8) ลดการทำเครื่องหมายทั้งในการขับถ่ายและชี้ให้เห็นว่าการผลิตที่ซับซ้อน AcrAB-TolC น่าจะรับผิดชอบในส่วนใหญ่ของ 1-octanol ไหล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.3 . การขับถ่ายของเส้น
เราสังเกตว่าในช่วงต้นถึงปลายเครื่องเขียน ขั้นตอนของการเพาะเลี้ยงเซลล์กับ tpc3 ยา , น้ำหอมกลิ่นแรง เช่น ต่องจากเซลล์วัฒนธรรมซึ่งชี้ให้เห็นการแสดงภายนอกของผลิตภัณฑ์ ( s ) หลังจากการแยกเซลล์จากสื่อGC - นางสาวการวิเคราะห์ยืนยันว่า 73 ± 3% ของเส้นทั้งหมดในวัฒนธรรมที่ถูกนำเสนอในสื่อในขณะที่ส่วนที่เหลือถูกพบเป็นภาษาท้องถิ่นในส่วนของเซลล์ ( รูปที่ 1C ) E . coli ท่าเรือช่วงขนาดใหญ่ของการปั๊ม ( Segura et al . , 2012 ) ในหมู่พวกเขาการ acrab – tolc ที่ซับซ้อนมากที่สุดคือการศึกษาและได้รับเกี่ยวข้องในการท exogenously ตัวทำละลายเพิ่ม ( tsukagoshi และ โอโนะ , 2000 และสีขาว et al . , 1997 ) เราสร้างการลบ ACRA Δสายพันธุ์ E colibl21 ( DE3 ) เพื่อทดสอบว่า acrab – tolc รับผิดชอบการผลักดันภายในผลิตเส้น .สายพันธุ์ที่กลายพันธุ์แสดง ~ 3-fold ลดขับเส้นพร้อมกับหยดที่คล้ายกันในระดับการผลิตเส้นทั้งหมด ( ภาพที่ 1c ) อัตราส่วนของภายนอกเส้นภายใน แต่ยังลดลงเล็กน้อย สำหรับΔ ACRA การลบความเครียด ( 2.0 ) เมื่อเทียบกับยาความเครียด ( 2.8 )เครื่องหมายการลดลงทั้งปัสสาวะและการผลิตพบว่า acrab – tolc ซับซ้อนส่วนใหญ่รับผิดชอบส่วนใหญ่
เส้นการไหลออก