2.3. Scanning electron microscopy
Three-millimeter segments of radicle tip, cell elongation zone
and root hair zone of each treatment sample as well as complete
roots were fixed for 24 h in 2.5% glutaraldehyde in a sodium phosphate
buffer pH 7.2 at 4 ◦C. They were then washed with a sodium
phosphate buffer (0.1M) two times for 10 min and were fixed in
osmium tetroxide 1% in a 0.1M sodium phosphate buffer for 2 h
at 4 ◦C, after they were washed with the same buffer twice during
10 min each time. The cross-sections cuts consisted of thin
sections (about 200m) and were cut with a rotation microtome
HM 550 (MICROM International GmbH, Walldorf). Then, the
samples were dehydrated in a 30–100% ethanol series and were
dehydrated a second time in liquid CO2 by a critical point dryer
(Balzers Union FL-9496, Holland) (Anderson, 1951). Immediately,
cuts and complete roots were mounted on a aluminum sample
holder with a carbon film and were then gold plated by a metallizer
(Edwards S 150 Sputter Coater, USA) for 3min at 30 mA, leaving a
thickness of approximately 400 Å. Specimens were viewed under
scanning electron microscopy (JEOL JSM- 6380 LV, Japan) and a
morphological changes comparison in root hairs and tissues (rhizodermis,
parenchyma cortex, endoderm and vascular tissue) was
done between control and treatments. Widths of five to seven samples
were measured from micrographs using the cell elongation
zone and measurements were made at 467mfrom the lower end
of the radicle tip.
2.3. Scanning electron microscopyThree-millimeter segments of radicle tip, cell elongation zoneand root hair zone of each treatment sample as well as completeroots were fixed for 24 h in 2.5% glutaraldehyde in a sodium phosphatebuffer pH 7.2 at 4 ◦C. They were then washed with a sodiumphosphate buffer (0.1M) two times for 10 min and were fixed inosmium tetroxide 1% in a 0.1M sodium phosphate buffer for 2 hat 4 ◦C, after they were washed with the same buffer twice during10 min each time. The cross-sections cuts consisted of thinsections (about 200m) and were cut with a rotation microtomeHM 550 (MICROM International GmbH, Walldorf). Then, thesamples were dehydrated in a 30–100% ethanol series and weredehydrated a second time in liquid CO2 by a critical point dryer(Balzers Union FL-9496, Holland) (Anderson, 1951). Immediately,cuts and complete roots were mounted on a aluminum sampleholder with a carbon film and were then gold plated by a metallizer(Edwards S 150 Sputter Coater, USA) for 3min at 30 mA, leaving athickness of approximately 400 Å. Specimens were viewed underscanning electron microscopy (JEOL JSM- 6380 LV, Japan) and amorphological changes comparison in root hairs and tissues (rhizodermis,parenchyma cortex, endoderm and vascular tissue) wasdone between control and treatments. Widths of five to seven sampleswere measured from micrographs using the cell elongationzone and measurements were made at 467mfrom the lower end
of the radicle tip.
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 กล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอนแบบส่องกราดสามมิลลิเมตร ส่วนของปลายรากเซลล์ยืดตัว โซนและรากผมของแต่ละโซน ตัวอย่างการรักษาเช่นเดียวกับที่สมบูรณ์รากถูกกำหนดเป็นเวลา 24 ชั่วโมง 2.5% glutaraldehyde ในโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 ที่ 4 ◦ C จากนั้นล้างด้วยโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 0.1m ) 2 ครั้ง เป็นเวลา 10 นาที และคงที่ออสเมียม tetroxide 1% ใน 0.1m โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์สำหรับ 2 ชั่วโมงที่ 4 ◦ C , หลังจากที่พวกเขาล้างบัฟเฟอร์สองครั้งในช่วงเดียวกัน10 นาทีในแต่ละครั้ง การตัดและมีบางส่วน ( ประมาณ 200 เมตร ) และถูกตัดด้วยเครื่องตัดชิ้นเนื้อหมุนHM 550 ( microm ระหว่างประเทศ GmbH , วอลล์ ดอร์ฟ ) งั้นตัวอย่างที่แห้งใน 30 – 100 % ชุดและเอทานอลอบแห้งเป็นครั้งที่สองใน CO2 เหลว โดยเครื่องอบแห้งแบบจุดวิกฤต( บัลเซอร์สหภาพ fl-9496 ) ฮอลแลนด์ ( Anderson , 1951 ) ทันทีและตัดรากสมบูรณ์ติดบนอลูมิเนียม ตัวอย่างยึดด้วยฟิล์มคาร์บอนและจากนั้นชุบทอง โดย metallizer( เอ็ดเวิร์ด S 150 ละล่ำละลักเครื่องเคลือบ สหรัฐอเมริกา ) ที่ 3min มา 30 , ออกจากความหนาประมาณ 400 • . จำนวนที่ดูใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( Jeol JSM - 6380 LV , ญี่ปุ่น ) และการเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงลักษณะ ขนราก ( rhizodermis เนื้อเยื่อ ,มีเปลือกและเนื้อเยื่อ ) แบล็กเบอร์รี , หลอดเลือดระหว่างการควบคุมและการรักษา ความกว้างของห้าถึงเจ็ดคนวัดจาก micrographs โดยใช้เซลล์ยืดตัวการวัดและโซนที่ผลิตจาก 467mfrom ช่วงล่างของรากปลาย
การแปล กรุณารอสักครู่..