The alkaline protease was purified

The alkaline protease was purified to homogeneity using DEAE cellulose ion exchange chromatography, with a 5.2-fold increase in specific activity and 34% recovery. The apparent molecular weight of the enzyme was determined as 40 kDa by SDS–PAGE study. The pH and temperature optima were 9.0 and 50 °C respectively with maximum protease activity of 1164 U/ml. Protease of MSF 46 was active in a broad pH range 7.0–11.0 with a maximum at pH 8.5 and exhibited thermostability at 50 °C. The enzyme activity was inhibited by PMSF but showed stability with Tween 20, Triton X-100 and hydrogen peroxide. Nearly 30% reduction in enzyme activity was observed in the presence of EDTA and DTT. The enzyme was effective in hydrolyzing gelatin, skimmed milk and blood clots and exhibited the potency for dehairing of goat skin and removing blood stain from cotton fabric. Significant morphological changes were observed under scanning electron microscope between cells grown in normal and casein amended medium. This first detailed report on the production of alkaline protease by a PPFM strain appears promising toward development of protocols for mass production, study of the molecular mechanism and other applications.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รติเอสด่างที่บริสุทธิ์เพื่อ homogeneity DEAE เซลลูโลสสารกรอง chromatography ด้วยการเพิ่ม 5.2-fold เฉพาะกิจกรรมและ 34% การกู้คืน ชัดเจนน้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์นี้ถูกกำหนดเป็น 40 kDa โดย SDS – หน้าศึกษา พติค่า pH และอุณหภูมิได้ 9.0 และ 50 ° C ตามลำดับ โดยมีกิจกรรมรติเอสสูงสุดของ 1164 U / ml รติเอส 46 MSF ถูกใช้งานในช่วง pH กว้าง 7.0-11.0 มากที่สุดที่ค่า pH 8.5 และจัดแสดง thermostability ที่ 50 องศาเซลเซียส เอนไซม์ที่ถูกห้าม โดย PMSF แต่แสดงให้เห็นว่าความมั่นคงกับ Tween 20 ไตรตั้น X 100 และไฮโดรเจนเพอร์ออกไซด์ ลด 30% ในเอนไซม์เกือบถูกสังเกตในต่อหน้าของ EDTA และ DTT เอนไซม์มีประสิทธิภาพใน hydrolyzing ตุ๋น นมขาดมันเนย และ clots เลือด และจัดแสดงศักยภาพสำหรับ dehairing แพะผิวและคราบเลือดเอาจากผ้าฝ้าย เปลี่ยนแปลงสัณฐานที่สำคัญถูกสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการสแกนระหว่างเซลล์ที่เติบโตขึ้นในกลางแก้ไขปกติและเคซีน รายงานรายละเอียดนี้ครั้งแรกในการผลิตอัลคาไลน์รติเอสโดยต้องใช้ PPFM ปรากฏแนวโน้มต่อการพัฒนาของโปรโตคอลสำหรับการผลิตมวล การศึกษากลไกระดับโมเลกุลและโปรแกรมประยุกต์อื่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรติเอสอัลคาไลน์บริสุทธิ์จะเป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้เซลลูโลส DEAE ไอออนโครมาแลกเปลี่ยนกับการเพิ่มขึ้น 5.2 เท่าในกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงและ 34% กู้คืน น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์ที่ถูกกำหนดเป็น 40 กิโลดาลตันจากการศึกษาระบบ SDS-PAGE พีเอชและอุณหภูมิที่ดีที่สุดได้ 9.0 และ 50 ° C ตามลำดับกับกิจกรรมโปรติเอสสูงสุด 1164 U / ml โปรติเอสของ MSF 46 กำลังทำงานอยู่ในช่วง pH กว้าง 7.0-11.0 กับสูงสุดที่ pH 8.5 และแสดงทนร้อนที่ 50 ° C กิจกรรมของเอนไซม์ถูกยับยั้งโดย PMSF แต่แสดงให้เห็นถึงความมั่นคงกับ Tween 20, Triton X-100 และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ลดเกือบ 30% ในกิจกรรมของเอนไซม์พบว่าในการแสดงตนของ EDTA และ DTT เอนไซม์ที่มีประสิทธิภาพในการย่อยเจลาติน, นมไขมันต่ำและเลือดอุดตันและแสดงความแข็งแรงสำหรับ dehairing ของหนังแพะและขจัดคราบเลือดจากผ้าฝ้าย การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาอย่างมีนัยสำคัญภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดระหว่างเซลล์ที่ปลูกในปกติและเคซีนแก้ไขกลาง นี้รายงานรายละเอียดเป็นครั้งแรกในการผลิตเอนไซม์โปรติเอด่างโดยสายพันธุ์ Ppfm ปรากฏมีแนวโน้มต่อการพัฒนาของโปรโตคอลสำหรับการผลิตมวล, การศึกษากลไกในระดับโมเลกุลและโปรแกรมอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พวกอัลคาไลน์โปรติเอสบริสุทธิ์วิธีการแลกเปลี่ยนไอออนโดยใช้ DEAE cellulose chromatography ด้วย 5.2-fold เพิ่มในกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงและการกู้คืน 34 % น้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์ชัดเจนว่าเป็น 40 กิโลดาลตันโดยเฉพาะการศึกษาหน้า– . pH และอุณหภูมิ 50 องศาและ Optima 9.0 C ตามลำดับกับกิจกรรมโปรสูงสุดของ 1164 U / mlโปรของ MSF 46 ถูกใช้งานในช่วงกว้าง pH 7.0 – 11.0 กับสูงสุดที่ pH 8.5 และจัดแสดงทดลที่ 50 องศา กิจกรรมของเอนไซม์ถูกยับยั้ง PMSF มีเสถียรภาพกับ Tween 20 , Triton X-100 และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ลดลงเกือบ 30% ในกิจกรรมของเอนไซม์พบว่าในการแสดงตนของ EDTA ส่วน . เอนไซม์ที่มีประสิทธิภาพในการย่อยเป็นเจลาตินนมและเลือดอุดตันและมีศักยภาพสำหรับ dehairing หนังแพะ และเอาเลือดเปื้อนจากผ้าฝ้าย การเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่สำคัญที่พบภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนระหว่างเซลล์ปกติและเซลล์ที่ปลูกในการสื่อก่อนรายงานรายละเอียดในการผลิตอัลคาไลน์โปรติเอสจาก ppfm ความเครียดปรากฏสัญญาที่มีต่อการพัฒนาของระบบสำหรับการผลิต , การศึกษาของกลไกระดับโมเลกุลและโปรแกรมอื่น ๆ