techniques have some disadvantages such as need for
previous isolation of the pathogen and insufficient
sensitivity to detect low levels of pathogen.
Molecular techniques such as polymerase chain
reaction (PCR) can be used to solve that type of
problems and increase sensitivity and specificity of
pathogen detection. Individual PCR assays have been
developed for detection and identification of the fish
pathogens. However, a large number of individual
PCR assays would be necessary if single primer sets
are used on a large number of clinical samples, which
can be a relatively costly and time consuming process.
The simultaneous detection of several pathogens with
a multiplex PCR (mPCR) approach would be
relatively rapid and cost effective. Although mPCR
has been widely applied to the detection of multiple
viruses and bacteria in clinical specimens, it is not a
common tool to the detection of fish pathogens
(Brasher et al., 1998; Osorio et al., 2000; del Cerro
et al., 2002; Mata et al., 2004). In this investigation, an
mPCR assay was developed for the simultaneous
detection of Y. ruckeri, A. salmonicida subsp.
salmonicida, A. hydrophila, F. columnare, and R.
salmoninarum from pure cultures, spiked samples,
and asymptomatic fish.
techniques have some disadvantages such as need forprevious isolation of the pathogen and insufficientsensitivity to detect low levels of pathogen.Molecular techniques such as polymerase chainreaction (PCR) can be used to solve that type ofproblems and increase sensitivity and specificity ofpathogen detection. Individual PCR assays have beendeveloped for detection and identification of the fishpathogens. However, a large number of individualPCR assays would be necessary if single primer setsare used on a large number of clinical samples, whichcan be a relatively costly and time consuming process.The simultaneous detection of several pathogens witha multiplex PCR (mPCR) approach would berelatively rapid and cost effective. Although mPCRhas been widely applied to the detection of multipleviruses and bacteria in clinical specimens, it is not acommon tool to the detection of fish pathogens(Brasher et al., 1998; Osorio et al., 2000; del Cerroet al., 2002; Mata et al., 2004). In this investigation, anmPCR assay was developed for the simultaneousdetection of Y. ruckeri, A. salmonicida subsp.salmonicida, A. hydrophila, F. columnare, and R.salmoninarum from pure cultures, spiked samples,and asymptomatic fish.
การแปล กรุณารอสักครู่..
เทคนิคมีข้อเสียบางอย่างเช่นความจำเป็นในการแยกก่อนหน้าของเชื้อโรคและไม่เพียงพอความไวในการตรวจสอบในระดับต่ำของเชื้อโรค. เทคนิคโมเลกุลเช่นลูกโซ่โพลิเมอร์ปฏิกิริยา (PCR) สามารถนำมาใช้ในการแก้ประเภทของปัญหาและการเพิ่มความไวและความจำเพาะของการตรวจหาเชื้อโรค. การตรวจ PCR ส่วนบุคคลที่ได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจสอบและบัตรประจำตัวของปลาเชื้อโรค แต่จำนวนมากของแต่ละบุคคลการตรวจ PCR จะเป็นสิ่งที่จำเป็นถ้าชุดไพรเมอร์ซิงเกิ้ลที่มีการใช้ในจำนวนมากของกลุ่มตัวอย่างทางคลินิกซึ่งอาจจะเป็นค่อนข้างค่าใช้จ่ายและเวลาในการบริโภค. การตรวจจับพร้อมกันของเชื้อโรคหลายPCR multiplex (mPCR) วิธีการที่จะมีความรวดเร็วและต้นทุนที่มีประสิทธิภาพ แม้ว่า mPCR ได้รับการใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจสอบของหลายไวรัสและแบคทีเรียในตัวอย่างทางคลินิกมันไม่ได้เป็นเครื่องมือร่วมกันเพื่อการตรวจสอบของเชื้อโรคปลา(รช, et al, 1998;. Osorio et al, 2000;. เดล Cerro et al, ., 2002; Mata, et al, 2004) ในการสืบสวนคดีนี้การทดสอบ mPCR ได้รับการพัฒนาไปพร้อม ๆ กันสำหรับการตรวจสอบของวายruckeri ก salmonicida subsp. salmonicida, hydrophila เอเอฟ columnare และอาร์salmoninarum จากวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ถูกแทงตัวอย่างและปลาที่ไม่มีอาการ
การแปล กรุณารอสักครู่..
เทคนิคมีข้อเสียบางอย่าง เช่น ต้องการ
แยกก่อนหน้านี้ของเชื้อและความไวเพียงพอ
เพื่อตรวจหาระดับต่ำของเชื้อโรค .
เทคนิคโมเลกุลเช่น
โดยปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) สามารถใช้ในการแก้ประเภทของปัญหาและเพิ่มความไวของ
การตรวจหาเชื้อโรค specificity บุคคลซึ่งได้รับ
)การพัฒนาการตรวจหาและพิสูจน์ชนิดของปลา
เชื้อโรค อย่างไรก็ตาม ตัวเลขขนาดใหญ่ของบุคคลซึ่งจำเป็นจะต้องใช้ ถ้าใช้
รองพื้นชุดเดียวจะใช้จำนวนตัวอย่างทางคลินิกซึ่ง
สามารถค่อนข้างแพงกระบวนการนาน และเวลา .
พร้อมกันตรวจหาเชื้อโรคด้วยการหลายเทคนิค multoplex PCR ( mpcr ) วิธีการจะ
ค่อนข้างอย่างรวดเร็วและต้นทุนที่มีประสิทธิภาพ .แม้ว่า mpcr
ถูกใช้อย่างกว้างขวางในการตรวจหาไวรัสและแบคทีเรียในตัวอย่างทางคลินิกหลาย
ไม่ใช่เครื่องมือทั่วไปเพื่อตรวจหาเชื้อโรคปลา
( บราเชอร์ et al . , 1998 ; โอโซริโอ et al . , 2000 ; del Cerro
et al . , 2002 ; Mata et al . , 2547 ) ในการตรวจสอบนี้ ,
mpcr ) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อใช้สำหรับการตรวจสอบของ ruckeri พร้อมกัน
Y , A . salmonicida subsp .
salmonicida Aการทดสอบ columnare F และ R .
salmoninarum จากวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์อย่างที่ถูกแทง
และหรือปลา
การแปล กรุณารอสักครู่..