5 volumes of 0.1M ammonium acetate in methanol. After
overnight incubation (−20 ◦C), the precipitate was collected
by centrifugation (16 000×g, 10 min, room temperature).
The resulting pellet was washed by resuspension in 0.1M
ammonium acetate in methanol (1 ml) and sonication (1 min)
on ice. Following centrifugation (16 000×g, 10 min, room
temperature), the supernatant was discarded. After two more
rinses with 0.1M ammonium acetate in methanol (1 ml) and
one with acetone (1 ml), the resulting pellet was air-dried.
The protein pellet was resuspended in the sample buffer, centrifuged,
and supernatant was collected and stored as above
5 เล่ม 0.1M acetate แอมโมเนียมในเมทานอล หลังจาก
บ่มข้ามคืน (-20 ◦C) ตะกอนถูกเก็บรวบรวม
โดยการหมุนเหวี่ยง (16 × 000 กรัม, 10 นาที, อุณหภูมิห้อง).
เม็ดผลถูกล้างโดยแขวนลอยใน 0.1M
acetate แอมโมเนียมในเมทานอล (1 มิลลิลิตร) และ sonication ( 1 นาที)
บนน้ำแข็ง ต่อไปนี้การหมุนเหวี่ยง (16 × 000 กรัม, 10 นาที, ห้อง
อุณหภูมิ) ใสถูกทิ้ง หลังจากที่ทั้งสองมากขึ้น
ล้างด้วยอะซิเตตแอมโมเนียม 0.1M ในเมทานอล (1 มิลลิลิตร) และ
เป็นหนึ่งเดียวกับอะซิโตน (1 ml), เม็ดที่เกิดเป็นอากาศแห้ง.
เม็ดโปรตีนถูก resuspended ในบัฟเฟอร์ตัวอย่างปั่น,
และใสถูกเก็บรวบรวมและจัดเก็บไว้ ดังกล่าว
การแปล กรุณารอสักครู่..
