OligonucleotidesOligonucleotides fo

Oligonucleotides
Oligonucleotides for cloning and PCR verification are listed in
Table 1 and were generated by Eurofins Genomics and used unless
noted otherwise at 200 nM concentration for PCR and 100 nM for
sequencing.
2.2. Construction of expression vectors
To generate the new R982-X01 helper plasmid, the pMon7124
vector was isolated from DH10Bac cells (Life Technologies, Carlsbad,CA)
after overnight growthat 37Cinmedia containing 20ug/ml
tetracycline. Plasmid DNA was isolated with the QiaSpin Plasmid
miniprep kit (Qiagen), and digested with a combination of PacI
and EcoRI restriction enzymes (New England Biolabs) for 2 h at

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Oligonucleotidesระบุไว้ใน oligonucleotides สำหรับการโคลนและการตรวจ PCRตาราง 1 โดย Eurofins Genomics และถูกใช้ระบุไว้เป็นอย่างอื่นที่ความเข้มข้น nM 200 สำหรับ PCR และ 100 นิวตันเมตรการจัดลำดับ2.2. สร้างเวกเตอร์นิพจน์สร้างใหม่ R982 X01 helper plasmid, pMon7124 การเวกเตอร์คือแยกจากเซลล์ DH10Bac (เทคโนโลยีชีวิต คาร์ลบาด แคลิฟอร์เนีย)หลังจากข้ามคืน growthat 37Cinmedia ที่มี 20ug/mlเตตราไซคลีน Plasmid DNA ถูกแยกกับ QiaSpin Plasmidminiprep kit (Qiagen), และย่อยสลาย ด้วย PacIและเอนไซม์ EcoRI จำกัด (นิวอิงแลนด์ Biolabs) สำหรับ 2h ที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

oligonucleotides
oligonucleotides สำหรับการโคลนและการตรวจสอบ PCR มีการระบุไว้ใน
ตารางที่ 1 และได้รับการสร้างขึ้นโดย Eurofins ฟังก์ชั่นและใช้จนกว่า
จะสังเกตเห็นความเข้มข้นที่ 200 นาโนเมตรสำหรับ PCR และ 100 นาโนเมตรสำหรับ
ลำดับ.
2.2 การก่อสร้างของเวกเตอร์การแสดงออก
เพื่อสร้างใหม่ R982-X01 ผู้ช่วยพลาสมิดที่ pMon7124
เวกเตอร์ที่แยกได้จากเซลล์ DH10Bac (ไลฟ์เทคโนโลยีส์, คาร์ลส, CA)
หลังจากค้างคืน growthat 37Cinmedia มี 20ug / ml
tetracycline ดีเอ็นเอที่แยกกับพลาสมิด QiaSpin
ชุด miniprep (Qiagen) และย่อยด้วยการรวมกันของ PACI
และ EcoRI จำกัด เอนไซม์ (นิวอิงแลนด์ Biolabs) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โอลิโกนิวคลีโอไทด์โอลิโกนิวคลีโอไทด์สำหรับการโคลนและการตรวจสอบดีเอ็นเออยู่ในตารางที่ 1 และถูกสร้างขึ้นโดย eurofins ไรใช้ เว้นแต่ระบุเป็นอย่างอื่น ที่ความเข้มข้น 200 nm สำหรับ PCR และ 100 nm สำหรับลำดับ .2.2 . การก่อสร้างเวกเตอร์การแสดงออกเพื่อสร้างใหม่ r982-x01 ผู้ช่วย pmon7124 พลาสมิด ,เวกเตอร์ที่แยกได้จากเซลล์ ( dh10bac เทคโนโลยีชีวิต Carlsbad , CA )หลังจากคืน growthat 37cinmedia ที่มี 20ug / มิลลิลิตรเตตราซัยคลิน . พลาสมิดดีเอ็นเอได้ด้วย qiaspin พลาสมิดminiprep ชุด ( เพิ่ม ) และย่อยด้วยการรวมกันของแพ็คและการตัดด้วยเอนไซม์ ( อังกฤษ biolabs ) 2 ชั่วโมง ที่