Determination of tumor necrosis fac

Determination of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) production by LPS-activated macrophages

RAW264.7 cells were seeded in the 96-well microplate at a density of 1.0×106 cells/100 µl/well and incubated for 1 h, and then the cells were treated with various concentrations of compounds for 10 min. After that, LPS (1 µg/ml) was added to each well and the cells were incubated for 20 h. The supernatant (50 µl) was transferred to ELISA plate and levels of TNF-α in the culture media were determined using a commercial kit (Mouse TNF-α ELISA kit, R&D System) according to the manufacturer׳s instructions and the absorbance was read at 450 nm within 30 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เรื่องของเนื้องอกการตายเฉพาะส่วนปัจจัยอัลฟ่า (TNF-α) ผลิตโดยบังเอิญใช้ LPSRAW264.7 เซลล์ถูก seeded ใน microplate 96 ดีที่ความหนาแน่นของ 1.0 × 106 เซลล์/100 µl/ดี และ incubated สำหรับ 1 h แล้ว เซลล์ก็ถือว่า มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของสารใน 10 นาที หลังจากนั้น LPS เพิ่ม (1 ไมโครกรัมเป็น เครื่อง/ml) ให้แต่ละดีและเซลล์ถูก incubated สำหรับ 20 h Supernatant (50 µl) ถูกโอนย้ายไปที่แผ่น ELISA และระดับ TNF-αในวัฒนธรรมสื่อถูกกำหนดใช้ชุดพาณิชย์ (ELISA TNF-αเมาส์ชุด R & D ระบบ) ตามคำแนะนำ manufacturer׳s และ absorbance ที่ถูกอ่านที่ 450 nm ภายใน 30 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความมุ่งมั่นของเนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัยอัลฟา (TNF-α) ผลิตโดย macrophages LPS-เปิดใช้งานเซลล์ RAW264.7 เป็นเมล็ดใน microplate 96 หลุมที่มีความหนาแน่นของ 1.0 × 106 เซลล์ / 100 ไมโครลิตร / ดีและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและ จากนั้นเซลล์ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นของสารต่างๆเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้น LPS (1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละดีและเซลล์ถูกบ่มเป็นเวลา 20 ชั่วโมง ใส (50 ไมโครลิตร) ถูกย้ายไปแผ่นวิธี ELISA และระดับของ TNF-αในสื่อวัฒนธรรมได้รับการพิจารณาโดยใช้ชุดการค้า (Mouse TNF-αชุด ELISA, R & D ระบบ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตและดูดกลืนแสงได้อ่าน ที่ 450 นาโนเมตรภายใน 30 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การกำหนดเนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัย Alpha ( TNF - α ) ผลิตโดย LPS กระตุ้น macrophages

raw264.7 เซลล์ถูก seeded ใน 96 ดีพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยที่ความหนาแน่นของ 1.0 × 106 เซลล์ / ลิตร / 100 µและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง จากนั้นเซลล์จะถูกสารที่มีความเข้มข้นต่างๆเป็นเวลา 10 นาทีหลังจากนั้น สเปรย์หล่อลื่น ( 1 µ g / ml ) ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละ และเซลล์ก็บ่มเป็นเวลา 20 ชั่วโมงและน่าน ( 50 µ L ) ย้ายไป 3 จาน และระดับของ TNF - αในวัฒนธรรมสื่อถูกกำหนดโดยใช้ชุดพาณิชย์ ( TNF - เมาส์αชุด ELISA , R & D ระบบ ) ตามที่ผู้ผลิต׳ด้วยคำสั่งและการดูดกลืนแสงก็อ่าน 450 nm ภายใน 30 นาที