General Experimental Procedures. Op

General Experimental Procedures. Optical rotations were recorded on a JASCO DIP-1000 digital polarimeter. UV spectra were measured on a JASCO V-530 spectrophotometer, and ECD spectra on a JASCO J-720W spectrophotometer. ESIMS were performed using a Micromass Auto Spec OA-Tof spectrophotometer in positive ion mode. The solvent used was 50% MeOH + 0.1% NH4OAc, and the flow rate was set at 20 μL/min. HRESIMS was performed using a micrOTOF-Q (Bruker Daltonics, USA) mass spectrometer. The 1H and 13C NMR spectra were recorded on a Varian INOVA AS 600 instrument (600 MHz for 1H and 151 MHz for 13C NMR). Chemical shifts are given in δ (ppm) values relative to those of the solvent signal [acetone-d6 (δH 2.04; δC 29.8)] on the tetramethylsilane scale. The standard pulse sequences programmed into the instrument (Varian INOVA AS600) were used for each 2D measurement. The JCH value was set at 5 Hz in the HMBC spectra. Normal-phase HPLC was conducted on a YMC-Pack SIL A-003 (YMC, Kyoto, Japan) column (4.6 i.d. × 250 mm) developed with nhexane/MeOH/THF/formic acid (47:39:13:1) containing oxalic acid (450 mg/L) (flow rate, 1.5 mL/min; 280 nm UV detection) at room temperature. Analytical reversed-phase HPLC was performed on a YMC-Pack ODS-A A-303 column (4.6 i.d. × 250 mm) eluted with 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/MeOH (2:2:1) (flow rate, 1 mL/min; 280 nm UV detection) at 40 °C. Preparative reversed-phase HPLC was performed at 40 °C on a YMC-Pack ODS-A A-324 column (10 i.d. × 300 mm) using 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/MeOH [either 43:43:16 (solvent I), 40:40:20 (solvent II), 41:41:18 (solventIII),
41.5:41.5:17 (solvent IV), or 37.5:37.5:25 (solvent V), v/v], at a flow rate of 2 mL/min with detection at 280 nm UV. The tumor cell lines were obtained from Riken Bioresource Center, Tsukuba, Ibaraki, Japan. The normal cells were prepared from periodontal tissues, according to the guidelines of the intramural board of Meikai University Ethics Committee (no. A0808) after obtaining informed consent from the patients. Because HGF, HPC, and HPLF cells have a limited lifespan due to in vitro senescence, these cells were used at a population doubling level of 5−8.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กระบวนการทดลองทั่วไป หมุนเวียนแสงถูกบันทึกไว้ใน polarimeter เป็นดิจิทัล JASCO จุ่ม-1000 แรมสเป็คตรา UV ถูกวัดเป็น JASCO V 530 เครื่องทดสอบกรดด่าง และเบาะแสแรมสเป็คตราบนเครื่องทดสอบกรดด่างการ JASCO เจ 720W ESIMS ได้ดำเนินการโดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่างการ Micromass รถยนต์ข้อมูลจำเพาะ OA-Tof ในโหมดไอออนบวก ตัวทำละลายที่ใช้คือ 50% ทานอ + 0.1% NH4OAc และตั้งค่าอัตราการไหลที่ต่ำ 20 μL HRESIMS ทำโดยใช้สเปกโตรมิเตอร์มวล micrOTOF-Q (Bruker Daltonics สหรัฐอเมริกา) แรมสเป็คตรา NMR 1H และ 13C ได้บันทึกไว้ในเครื่องมือแล้วแต่กำหนด INOVA AS 600 (600 MHz 1 H และ 151 MHz สำหรับ 13C NMR) เคมีกะจะให้เทียบกับของสัญญาณเป็นตัวทำละลาย [อะซีโตน-d6 (δH 2.04; δC 29.8)] ในระดับ tetramethylsilane ค่าδ (ppm) ลำดับชีพจรมาตรฐานโปรแกรมเป็นเครื่องมือ (แล้วแต่กำหนด INOVA AS600) ใช้สำหรับแต่ละการประเมิน 2 มิติ มีตั้งค่า JCH ที่ 5 Hz ในแรมสเป็คตรา HMBC วิธี HPLC เฟสปกติคอลัมน์ YMC Pack A ภาษาศาสตร์-003 (YMC เกียวโต ญี่ปุ่น) (ประชาชน 4.6 × 250 มม.) พัฒนา ด้วย nhexane/ทา นอ/THF/formic กรด (47:39:13:1) ที่ประกอบด้วยกรดออกซาลิก (450 mg/L) (อัตราการไหล 1.5 mL/min, 280 nm UV ตรวจ) ที่อุณหภูมิห้อง ทำการวิเคราะห์ HPLC ขั้นตอนย้อนกลับบนคอลัมน์ YMC Pack ODS-A A-303 (ประชาชน 4.6 × 250 มม.) eluted กับ 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/ทา นอ (2:2:1) (อัตราการไหล 1 mL/min, 280 nm UV ตรวจ) ที่ 40 องศาเซลเซียส ทำขั้นตอนย้อนกลับ preparative HPLC ที่ 40 ° C ในคอลัมน์ YMC Pack ODS-A A-324 (ประชาชน 10 × 300 มม.) ใช้ 0.01 M H3PO4/0.01 M KH2PO4/ทา นอ [43:43:16 อย่างใดอย่างหนึ่ง (ตัวทำละลายฉัน), 40:40:20 (ตัวทำละลาย II), 41:41:18 (solventIII),41.5:41.5:17 (ตัวทำละลาย IV), หรือ 37.5:37.5:25 (ตัวทำละลาย V), v/v], ที่อัตราการไหล 2 mL/นาที ด้วยการตรวจหารายการที่ 280 nm รังสียูวี รายการเซลล์เนื้องอกได้รับมาจาก ศูนย์ Bioresource เก้น อวกาศสึกุบะ อิบารากิ ญี่ปุ่น เซลล์ปกติที่เตรียมจากเนื้อเยื่อโรคเหงือก ตามแนวทางของคณะกรรมการจรรยาบรรณของมหาวิทยาลัย (ไม่ Meikai intramural A0808) หลังจากรับแจ้งความยินยอมจากผู้ป่วย เนื่องจากเซลล์ HGF, HPC และ HPLF มีอายุจำกัดเนื่องจากการเพาะเลี้ยง senescence เซลล์เหล่านี้ถูกใช้ในประชากรจะระดับของ 5−8

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขั้นตอนการทดลองทั่วไป ผลัดออฟติคอลได้ถูกบันทึกไว้ใน JASCO กรมทรัพย์สินทางปัญญา-1000 Polarimeter ดิจิตอล สเปกตรัมรังสียูวีถูกวัดใน spectrophotometer JASCO V-530, และสเปกตรัม ECD บน JASCO J-720W spectrophotometer ESIMS ถูกดำเนินการโดยใช้สเป็คอัตโนมัติ Micromass spectrophotometer OA-Tof ในโหมดไอออนบวก ตัวทำละลายที่ใช้เป็นเมธานอล 50% + 0.1% NH4OAc และอัตราการไหลที่ถูกตั้งไว้ที่ 20 ไมโครลิตร / นาที HRESIMS ได้รับการดำเนินการโดยใช้ micrOTOF-Q (Bruker Daltonics สหรัฐอเมริกา) สเปกโตรมิเตอร์มวล 1H และ 13C NMR สเปกตรัมที่ถูกบันทึกไว้ใน Varian INOVA AS 600 ตราสาร (600 MHz สำหรับ 1H และ 151 MHz สำหรับ 13C NMR) การเปลี่ยนแปลงทางเคมีจะได้รับในδ (ppm) ค่าเมื่อเทียบกับบรรดาของสัญญาณตัวทำละลาย [อะซีโตน-d6 (δH 2.04; δC 29.8)] ในระดับ tetramethylsilane ลำดับชีพจรมาตรฐานโปรแกรมลงในเครื่อง (Varian INOVA AS600) ถูกนำมาใช้สำหรับแต่ละวัด 2D ค่า JCH ตั้งอยู่ที่ 5 เฮิร์ตซ์ในสเปกตรัม HMBC HPLC ปกติเฟสได้ดำเนินการใน YMC แพ็ค SIL A-003 (YMC เกียวโตญี่ปุ่น) คอลัมน์ (4.6 รหัส× 250 มิลลิเมตร) การพัฒนากับ nhexane / เมธานอล / THF / กรด (47: 39: 13: 1) ที่มี กรดออกซาลิ (450 มิลลิกรัม / ลิตร) (อัตราการไหล 1.5 มิลลิลิตร / นาที; 280 นาโนเมตรการตรวจสอบ UV) ที่อุณหภูมิห้อง HPLC เพื่อการวิเคราะห์กลับเฟสได้ดำเนินการใน ODS-A YMC แพ็คคอลัมน์ A-303 (4.6 รหัส× 250 มิลลิเมตร) ชะ 0.01 M H3PO4 / 0.01 M KH2PO4 / เมธานอล (2: 2: 1) (อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที; 280 นาโนเมตรการตรวจสอบ UV) ที่ 40 ° C เตรียมกลับ HPLC เฟสเป็นที่ 40 ° C ใน ODS-A YMC แพ็คคอลัมน์ A-324 (10 รหัส× 300 มิลลิเมตร) โดยใช้ 0.01 M H3PO4 / 0.01 M KH2PO4 / เมธานอล [ทั้ง 43:43:16 (ฉันเป็นตัวทำละลาย ) 40:40:20 (II ตัวทำละลาย) 41:41:18 (solventIII)
41.5: 41.5: 17 (ตัวทำละลาย IV) หรือ 37.5: 37.5: 25 (ตัวทำละลาย v) ปริมาตร / ปริมาตร] ที่ไหล อัตรา 2 มิลลิลิตร / นาทีมีการตรวจสอบที่รังสียูวี 280 นาโนเมตร เซลล์เนื้องอกสายที่ได้รับจาก Riken Bioresource ศูนย์ Tsukuba, อิบารากิ, ประเทศญี่ปุ่น เซลล์ปกติที่เตรียมจากเนื้อเยื่อปริทันต์ตามแนวทางของคณะกรรมการภายในของมหาวิทยาลัย Meikai คณะกรรมการจริยธรรม (ไม่. A0808) หลังจากที่ได้รับความยินยอมจากผู้ป่วย เพราะ HGF, HPC และเซลล์ HPLF มีอายุการใช้งานที่ จำกัด เนื่องจากการเสื่อมสภาพในหลอดทดลองเซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้ในระดับที่เพิ่มขึ้นของประชากร 5-8

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขั้นตอนการทดลองทั่วไป แสงหมุนได้ถูกบันทึกไว้ใน jasco dip-1000 โพลาริมิเตอร์ดิจิตอล . แสงยูวีและวัดใน jasco v-530 Spectrophotometer และบก. สเปกตรัมบน jasco j-720w วัสดุ esims ) มีการใช้ micromass Auto spec OA tof Spectrophotometer ในโหมดอิออนบวก ตัวทำละลายที่ใช้ คือ ร้อยละ 50 nh4oac ปริมาณ 0.1 เปอร์เซ็นต์ ,และอัตราการไหลไว้ที่ 20 μลิตร / นาที hresims ถูกดำเนินการโดยใช้ microtof-q ( บรูกเกอร์ ดอลโทนิก , USA ) แมสสเปกโตรมิเตอร์ ใน 1H NMR สเปกตรัม 13C และถูกบันทึกไว้ในเครื่องไอโนว่าเป็น 600 เครื่องดนตรี ( 600 MHz สำหรับ 1H และ 151 MHz สำหรับ 13C NMR ) เคมีกะจะได้รับในδ ( ppm ) ค่าสัมพัทธ์ของ acetone-d6 สัญญาณ [ ตัวทำละลาย ( δ 2.04 C H ; δ 29.8 ) ] ในเตตร้าเมทิลไซเลนค่าลำดับชีพจรมาตรฐานโปรแกรมในเครื่องมือ ( เครื่องไอโนว่า as600 ) ใช้สำหรับแต่ละมิติการวัด ค่า JCH ไว้ที่ 5 Hz ในฤทธิ์แสง . และระยะปกติได้ดำเนินการใน ymc แพ็คซิล a-003 ( ymc , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) คอลัมน์ ( 4.6 ระบุ× 250 มม. ) พัฒนา nhexane / ปริมาณ / เตตระไฮโดรฟูแรน / กรด ( 47:39:13:1 ) ที่มีกรดออกซาลิก ( 450 มก. / ล. ) 1.5 มิลลิลิตรต่อนาที ( อัตราการไหล280 nm ตรวจจับยูวี ) ที่อุณหภูมิห้อง วิเคราะห์ reversed-phase HPLC แสดงบน ymc แพ็ค ods-a a-303 คอลัมน์ ( 4.6 ระบุ× 250 มม. ) ตัวอย่างกับ 0.01 M HCl / 0.01 M kh2po4 / เมทิลแอลกอฮอล์ ( ที่มี ) ( อัตรา 1 มิลลิลิตรต่อนาที ; 280 nm ยูวีตรวจจับการไหล ) ที่ 40 องศา เตรียมการ reversed-phase HPLC ที่ 40 ° C ใน ymc แพ็ค ods-a a-324 คอลัมน์ ( 10 ไอดี× 300 มม. ) ใช้ 0.01 M HCl / 001 / M kh2po4 เมทิลแอลกอฮอล์ [ ให้ 43:43:16 ( ตัวทำละลาย ) 40:40:20 ( ตัวทำละลาย , 2 ) , 41:41:18 ( solventiii )
41.5:41.5:17 ( ตัวทำละลาย IV ) หรือ 37.5:37.5:25 ( ตัวทำละลาย v ) V / V ) ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาทีกับการตรวจสอบที่ 280 nm ยูวี เนื้องอกเซลล์มะเร็งที่ได้จากศูนย์ทรัพยากรชีวภาพ riken สึกุบะ , ญี่ปุ่น เซลล์ปกติที่เตรียมจากเนื้อเยื่อปริทันต์ตามแนวทางของคณะกรรมการภายในของคณะกรรมการจรรยาบรรณมหาวิทยาลัยเมย์ไค ( ไม่ a0808 ) หลังจากที่ได้รับความยินยอมจากผู้ป่วย เพราะด้วย สูงมาก และ hplf เซลล์มีอายุการใช้งาน จำกัด เนื่องจากการเกิดเซลล์เหล่านี้ถูกใช้ในประชากรตามระดับ 5 − 8