Feed, refusal and fecal sample (gra

Feed, refusal and fecal sample (grab sampling) were randomly collected (2 samples/day/cow)
from each individual cow during the last 7 days of each period. Combined samples were dried at 60ºC
and ground (1-mm screen, Cyclotech mill, Teactor, Sweden) and then analysed for DM, OM, ash, CP
content [10], NDF, ADF [11] and acid-insoluble ash (AIA). The AIA was used to estimate digestibility
of nutrients as described by Van Keulen and Young [12].
Cows were milked twice daily by a bucket-type milking system and milk was weighed at each
milking of each period. Milk samples from both the morning and afternoon milking were combined
daily, preserved with 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol and stored at 4°C until analysis of milk
composition (fat, protein, lactose, total solids and solids-not-fat) by infrared method using Milko-Scan
33 (Foss Electric, Hillerod, Denmark). Milk urea nitrogen (MUN) was determined using Sigma kits
#640 (Sigma Diagnostics, USA).
Rumen fluid was collected by a stomach tube connected with a vacuum pump and jugular blood
samples were collected at 0 and 4 h post-feeding on the last day of each period. Approximately 200 mL
of rumen fluid were taken from the rumen using a 60-mL hand syringe at the end of each period. The
pH and temperature of the rumen fluid were immediately measured by means of a portable pH and
temperature meter (Hanna HI 8424, Singapore). Rumen fluid samples were then filtered through two
layers of cheesecloth and divided into three portions.
The first portion was used for analysis of volatile fatty acids (VFA) and NH3-N. 1M H2SO4
solution (5 mL) was added to 45 mL of rumen fluid. The mixture was centrifuged at 16,000×g for 15
minutes and the supernatant was stored at -20C prior to VFA analysis by HPLC (Waters, model 600E
with a UV detector; Novapak C18 column, column size: 4 mm x 150 mm; mobile phase: 10 mM H2SO4,
pH 2.5) according to Samuel et al. [13]. NH3-N analysis was done by micro-Kjeldahl method [10].
The second portion was used for a total direct count of bacteria, protozoa and fungal zoospores
with a haemacytometer (Hausser Scientific, USA) by the methods of Galyean [14]. The third portion
was taken for the study of cultured groups of viable bacteria by roll-tube technique [15] for identifying
rumen bacterial groups (cellulolytic, proteolytic, amylolytic and total viable bacteria).
A blood sample (about 10 mL) was drawn from the jugular vein at the same time as rumen fluid
sampling (at 0 and 4 h post-feeding) and centrifuged at 5000×g for 10 minutes (Table-top Centrifuge
PLC-02, USA). The supernatant was stored at -20ºC until analysis of blood urea nitrogen (BUN)
according to the method of Crocker [16].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาหาร ปฏิเสธและตัวอย่างอุจจาระ (สุ่ม) ถูกสุ่มเก็บ 2 ตัวอย่าง/วัน/วัว)จากแต่ละวัวแต่ละตัวในช่วง 7 วันที่ผ่านมาของแต่ละงวด รวมตัวอย่างอบแห้งที่ 60 ° cพื้นดิน (1 มม.หน้าจอ โรงงาน Cyclotech, Teactor สวีเดน) และวิเคราะห์แล้ว สำหรับ DM ออม เถ้า CPเนื้อหา [10], NDF, ADF [11] และเถ้าละลายกรด (AIA) เอไอเอที่ใช้ในการประเมินย่อยสารอาหารตามที่อธิบายไว้ โดย Van Keulen และหนุ่ม [12]วัวถูกเร็ว milked วันละสองครั้ง โดยระบบรีดนมแบบถัง และนมได้ชั่งน้ำหนักแต่ละนมของแต่ละงวด ตัวอย่างนมจากทั้งเช้าและบ่ายที่รีดนมได้รวมทุกวัน มี 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol และเก็บที่ 4° C จนถึงวิเคราะห์นมองค์ประกอบ (ไขมัน โปรตีน แลคโตส ของเหลว และของแข็งไม่ไขมัน) โดยวิธีอินฟราเรดที่ใช้สแกน Milko33 (ไฟฟ้า foss ฮิลเลรอด เดนมาร์ก) นมยูเรียไนโตรเจน (มูล) กำหนดใช้ชุด Sigma#640 (sigma วินิจฉัย สหรัฐอเมริกา)รวบรวมของเหลวรูเมน โดยกระเพาะหลอดสูญญากาศและเลือด jugularตัวอย่างที่ถูกเก็บรวบรวมที่ 0 และ 4 ชั่วโมงหลังให้อาหารในวันสุดท้ายของรอบระยะเวลา ประมาณ 200 mLของเหลวรูเมนถูกนำมาจากอาหารที่ใช้กับเข็มมือ 60 มิลลิลิตรในแต่ละช่วง การค่า pH และอุณหภูมิของของเหลวรูเมนได้ทันทีวัด โดยค่า pH แบบพกพา และเครื่องวัดอุณหภูมิ (Hanna HI 8424 สิงคโปร์) ตัวอย่างของเหลวรูเมนได้กรองแล้วผ่านสองชั้นของผ้า และแบ่งออกเป็นสามส่วนส่วนแรกใช้สำหรับการวิเคราะห์กรดไขมันระเหย (VFA) และ NH3 N. ซัลฟิวริกกรดกำมะถัน 1Mวิธีการแก้ไขปัญหา (5 มล.) ถูกเพิ่มไป 45 มล.ของเหลวรูเมน ส่วนผสมถูกเหวี่ยงที่ 16, 000 × g 15นาทีและ supernatant ถูกเก็บไว้ที่ - 20C ก่อน VFA วิเคราะห์ ด้วย HPLC (น้ำ รุ่น 600Eด้วยเครื่องตรวจจับ UV คอลัมน์ Novapak C18 คอลัมน์ขนาด: 4 x 150 มม. เฟสมือถือ: 10 มม.ซัลฟิวริก กรดกำมะถันค่า pH 2.5) ตาม Samuel et al. [13] การวิเคราะห์ NH3 N ทำ โดยวิธีเจลดาห์ลเมื่อต้องไมโคร [10]ส่วนสองใช้สำหรับนับโดยตรงรวมของแบคทีเรีย โปรโตซัว และเชื้อรา zoosporesด้วยการ haemacytometer (Hausser วิทยาศาสตร์ สหรัฐอเมริกา) โดยวิธีการของ Galyean [14] ส่วนสามถ่ายสำหรับการศึกษาของกลุ่มเพาะเลี้ยงเชื้อแบคทีเรียได้ โดยเทคนิคการม้วนท่อ [15] สำหรับการระบุอาหารกลุ่มแบคทีเรีย (cellulolytic ได้ amylolytic และจำนวนแบคทีเรียทำงานได้)ตัวอย่างเลือด (ประมาณ 10 มล.) มาจากหลอดเลือดดำ jugular ในเวลาเดียวกันเป็นของเหลวรูเมนตัวอย่าง (ที่ 0 และ 4 ชั่วโมงหลังอาหาร) และเหวี่ยงที่ 5000 × g 10 นาที (โต๊ะหมุนเหวี่ยงPLC-02 สหรัฐอเมริกา) Supernatant ถูกเก็บไว้ที่ - 20 ºc ถึงวิเคราะห์เลือดยูเรียไนโตรเจน (BUN)ตามวิธีการของซคูทีฟ [16]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ฟีดปฏิเสธและตัวอย่างอุจจาระ (สุ่มตัวอย่างคว้า) ได้รับการสุ่มเก็บ (2 ตัวอย่าง / วัน / วัว)
จากวัวแต่ละช่วง 7 วันสุดท้ายของแต่ละช่วงเวลา ตัวอย่างรวมแห้งที่ 60 ° C
และพื้นดิน (หน้าจอ 1 มิลลิเมตร Cyclotech โรงงาน Teactor, สวีเดน) และจากนั้นวิเคราะห์ DM อ้อมเถ้า CP
เนื้อหา [10], NDF, ADF [11] และเถ้ากรดที่ไม่ละลายน้ำ (AIA ) เอไอเอถูกใช้ในการประเมินการย่อย
สารอาหารตามที่อธิบายไว้โดยรถตู้ Keulen และหนุ่ม [12].
วัวรีดนมวันละสองครั้งโดยระบบการรีดนมถังชนิดและนมได้รับการชั่งน้ำหนักในแต่ละ
รีดนมในแต่ละยุคสมัย ตัวอย่างน้ำนมจากทั้งช่วงเช้าและบ่ายรีดนมมารวมกัน
ในชีวิตประจำวัน, เก็บรักษาไว้มี 2-Bromo-2-nitropropane-1,3-diol และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจนการวิเคราะห์ของนม
องค์ประกอบ (ไขมันโปรตีนแลคโตสของแข็งทั้งหมดและของแข็ง -Not ไขมัน) โดยวิธีอินฟราเรดโดยใช้ Milko-Scan
33 (ฟอสส์ไฟฟ้า, ฮิลเลอรอดเดนมาร์ก) ยูเรียนมไนโตรเจน (MUN) ถูกกำหนดโดยใช้ Sigma ชุด
# 640 (Sigma วินิจฉัยสหรัฐอเมริกา).
ของเหลว Rumen ถูกเก็บรวบรวมโดยหลอดกระเพาะอาหารที่เชื่อมต่อกับปั๊มสูญญากาศและเลือดคอ
เก็บตัวอย่างที่ 0 และ 4 ชั่วโมงหลังการให้อาหารในวันสุดท้าย วันในแต่ละยุคสมัย ระยะทางประมาณ 200 มิลลิลิตร
ของของเหลวในกระเพาะรูเมนถูกนำมาจากกระเพาะรูเมนโดยใช้เข็มฉีดยามือ 60 มิลลิลิตรในตอนท้ายของแต่ละช่วงเวลา
ค่า pH และอุณหภูมิของของเหลวในกระเพาะรูเมนที่ถูกวัดทันทีโดยวิธีการของพีเอชและแบบพกพา
อุณหภูมิเมตร (ฮันนา HI 8424 สิงคโปร์) กระเพาะตัวอย่างของเหลวถูกกรองแล้วผ่านสอง
ชั้นของผ้าและแบ่งออกเป็นสามส่วน.
ส่วนแรกถูกนำมาใช้สำหรับการวิเคราะห์ของกรดไขมันระเหย (VFA) และ NH3-N 1M H2SO4
วิธีการแก้ปัญหา (5 มิลลิลิตร) ถูกบันทึกอยู่ใน 45 มิลลิลิตรของของเหลวในกระเพาะรูเมน ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 16,000 ×กรัมเป็นเวลา 15
นาทีและสารละลายที่ถูกเก็บไว้ที่-20Cก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ VFA โดย HPLC (Waters, 600E รุ่น
ที่มีเครื่องตรวจจับรังสียูวีคอลัมน์ Novapak C18 ขนาดคอลัมน์: 4 mm x 150 มิลลิเมตร; เฟสเคลื่อนที่ 10 มม H2SO4,
ค่า pH 2.5) ตามที่ซามูเอล, et al [13] วิเคราะห์ NH3-N ทำโดยไมโคร Kjeldahl วิธี [10].
ส่วนที่สองที่ใช้สำหรับการนับรวมทางตรงของแบคทีเรียโปรโตซัวและเชื้อรา zoospores
กับ haemacytometer (Hausser วิทยาศาสตร์, สหรัฐอเมริกา) โดยวิธีการของ Galyean ม [14] ส่วนที่สาม
ถูกนำสำหรับการศึกษาของกลุ่มเพาะเลี้ยงแบคทีเรียทำงานได้โดยใช้เทคนิคม้วนหลอด [15] สำหรับการระบุ
กระเพาะกลุ่มแบคทีเรีย (เซลลูโลส, โปรตีน, เอนไซม์และแบคทีเรียทำงานได้ทั้งหมด).
ตัวอย่างเลือด (ประมาณ 10 มิลลิลิตร) ถูกดึงออกมาจาก เส้นเลือดใหญ่เส้นในเวลาเดียวกันเป็นของเหลวในกระเพาะรูเมน
สุ่มตัวอย่าง (ที่ 0 และ 4 ชั่วโมงหลังการให้อาหาร) และหมุนเหวี่ยงที่ 5000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที (บนโต๊ะเครื่องปั่นเหวี่ยง
PLC-02, สหรัฐอเมริกา) ใสถูกเก็บไว้ที่-20ºCจนการวิเคราะห์ของยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN)
ตามวิธีการของคร็อกเกอร์ม [16]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาหาร , การปฏิเสธและอุจจาระตัวอย่าง ( คว้า Sampling ) สุ่ม ( 2 คน / วัน / วัว )จากวัวแต่ละบุคคลในช่วง 7 วันของแต่ละช่วงเวลา ตัวอย่างแบบแห้งที่ 60 º cและพื้นดิน ( 1-mm หน้าจอ cyclotech โรงสี teactor , สวีเดน ) แล้ววิเคราะห์หา DM , โอม , เถ้า , ซีพีเนื้อหา [ 10 ] , NDF [ 11 ] และเถ้าที่ไม่ละลายในกรด ( AIA ) AIA ถูกใช้ในการประเมินค่าการย่อยได้สารอาหารตามที่อธิบายไว้โดยรถตู้ keulen และหนุ่ม [ 12 ]วัวถูกรีดนมวันละ 2 ครั้ง โดยชนิดถังรีดนมและนมเป็นหนักในแต่ละระบบการรีดนมของแต่ละช่วงเวลา ตัวอย่างนมจากทั้งช่วงเช้าและช่วงบ่ายไปรีดนมได้รวมทุกวัน , รักษากับ 2-bromo-2-nitropropane-1,3-diol ที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C จนถึงการวิเคราะห์ของนมส่วนประกอบ ( ไขมัน , โปรตีน , แลคโตส ของแข็งทั้งหมดและของแข็งที่ไม่ใช่ไขมัน ) โดยวิธีอินฟราเรด milko สแกนโดยใช้33 ( ฟอสไฟฟ้า hillerod , เดนมาร์ก ) ยูเรียไนโตรเจนในน้ำนม ( มูล ) คือการพิจารณา Sigma ชนิดติดตั้งอิสระ# 640 ( Sigma การวินิจฉัย , USA )อาหารเหลวเพื่อท้องท่อเชื่อมต่อกับปั๊มสูญญากาศเก็บเลือดตัวอย่างที่ 1 และ 4 ชั่วโมงหลังการให้อาหารในวันสุดท้ายของแต่ละช่วงเวลา ประมาณ 200 มิลลิลิตรของเหลว ทั้งหมดถ่ายจากกระเพาะหมักโดยใช้ 60 ml มือเข็มที่ส่วนท้ายของแต่ละช่วงเวลา ที่พีเอช และอุณหภูมิของอาหารเหลวได้ทันทีวัดโดยวิธีการของ Ph แบบพกพา และเครื่องวัดค่าอุณหภูมิ ( ฮันนา สวัสดี 8424 สิงคโปร์ ) อาหารเหลวจำนวนแล้วกรองผ่านสองชั้นของผ้าและแบ่งออกเป็นสามส่วนส่วนแรกคือการใช้เพื่อการวิเคราะห์กรดไขมันที่ระเหยได้ ( ง่าย ) และ nh3-n. 1m กรดซัลฟิวริกโซลูชั่น ( 5 ml ) คือเพิ่ม 45 มิลลิลิตรของอาหารของเหลว ส่วนผสมคือระดับที่ 16000 × 15 กรัมนาทีและนำที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ - 20 องศาเซลเซียส ลดลงก่อนการวิเคราะห์โดย HPLC ( น้ำ , รูปแบบ 600eกับ UV เครื่องตรวจจับ ; คอลัมน์ คอลัมน์ : novapak c18 ขนาด 4 มม. x 150 มม. ; เฟสเคลื่อนที่ : กรดซัลฟิวริก 10 มม.pH 2.5 ) ตามซามูเอล et al . [ 13 ] การวิเคราะห์กระทำโดย ไมโคร 4 cluster วิธีเจลดาห์ล [ 10 ]ส่วนที่สองคือใช้สำหรับนับโดยรวมของแบคทีเรีย โปรโตซัว เชื้อรา และ zoosporesกับ haemacytometer ( hausser ทางวิทยาศาสตร์ , USA ) โดยวิธีการของ galyean [ 14 ] ส่วนที่สามถ่ายเพื่อการศึกษาวัฒนธรรมของกลุ่มแบคทีเรีย โดยวางท่อม้วนเทคนิค [ 15 ] สำหรับการระบุอาหารกลุ่มโปรตีนย่อยสลายเซลลูโลสแบคทีเรีย , , และรวมได้ไมโลไลติกแบคทีเรีย )ตัวอย่างเลือด ( 10 ml ) ถูกวาดจากเส้นเลือดดำใหญ่ในเวลาเดียวกับอาหารของเหลวตัวอย่าง ( ที่ 0 และ 4 ชั่วโมงหลังการให้อาหาร ) และระดับที่ 5 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที ( ซึ่งบนโต๊ะplc-02 , USA ) และน่านถูกเก็บไว้ที่ - 20 º C จนถึงการวิเคราะห์สารยูเรียไนโตรเจนในเลือด ( ขนมปัง )ตามวิธีการของคร็อกเกอร์ [ 16 ]