Sample (25 g or ml) were collectd a

Sample (25 g or ml) were collectd aseptically and homogenized with with 225 ml of steril saline (0.85% Nacl) using a stomacher (Circulator 400, Seward,UK) at 239 rpm for 2 min. Aliquots of 1 ml were serially diluted ten-fold using sterile saline, and 100 -- samples were spread-plated in duplicate using the following media: plate Count Agar (PCA, Difco) supplemanted with 0.002% bromophenol blue (Sigma Aldrich,St Louis, Mo,US) for LAB; PotatoDextrose agar (PDA,Difco) adjusted to pH 3.5 with 10% tartaric acid (Sigma) for fungi; GYC medium (10% glucose, 1.0% yeast extract 2.0% calcium carbonate, 1.4% agar) and then AE medium (0.5% glucose, 0.3% yeast extract, 0.4% peptone, 0.9% agar, 3 ml absoltute ethanol, 3 ml glacial acetic acid) for AAB (Gullo & Giudici, 2008); Violet Red Bile Agar (VRBA, Difco) for coliform; and Mannitol Egg Yolk Polymyxin agar supplemented with 50% egg yolk emulsion and antimicrobial vial P (MYP,Difco) for B.cereus. To improve the lower detection limit,200 -- of ten-fold dilutions of solid samples, or 200-- of undiluted liquid samples, were spread-plated onto five plates of each agar. The detection limit were 10 CFU/g for solid sample and 1 CFU/ml for liquid sample. The different agar plates were incubated as follows: PCA, 35 --c for 48 h; MRS, 37 --c for 3 days with 5% Co2; GYC, 30 -C for 3 days; AE, 30-c for 5 days; PDA, 25 -c for 5 days; VRBA, 37 -C for 24 h; and MYP, 30 -C for 24 h.Bacteria and fungi were quantified by counting the number of colonies growing on each medium.In the case of B.cereus, typically pink colonies surrounded by a precipitation zone were randomly picked and transferred to Tryptic soy Agar (TSA, Difco) and incubated at 30 -c for 24 h. Colonies were identified using the VITEK 2 system (buoMerieux, March I'Etoile, Frence) with a BCL card (bio Merieux) and a PCR kit (PowerChek-- Bacillus cereus detertion kit, Kogene Biotech Co., Korea).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่าง (25 กรัมหรือมิลลิลิตร) มี collectd aseptically และ homogenized เป็นกลุ่มพร้อมกับ 225 ml ของ steril น้ำเกลือ (0.85% Nacl) ใช้เป็นแผงประดับหน้าอก (หมุนเวียน 400 เวิร์ด สหราชอาณาจักร) ที่ 239 rpm สำหรับ 2 นาที Aliquots ของ 1 ml ได้ serially diluted ten-fold ใช้น้ำเกลือฆ่าเชื้อ และ 100 - ตัวอย่างถูกมาชุบในซ้ำโดยใช้สื่อต่อไปนี้: แผ่น supplemanted Agar จำนวน (PCA, Difco) กับ 0.002% bromophenol blue (Aldrich ซิก , Louis เซนต์ Mo สหรัฐฯ) สำหรับห้องปฏิบัติการ PotatoDextrose agar (PDA, Difco) ปรับ pH 3.5 ด้วย 10% tartaric กรด (ซิกมา) สำหรับเชื้อรา สื่อ GYC (กลูโคส 10%, 1.0% ยีสต์สารสกัดจาก 2.0% แคลเซียมคาร์บอเนต 1.4% agar) แล้วแอะปานกลาง (กลูโคส 0.5%, 0.3% สารสกัดจากยีสต์ peptone 0.4%, 0.9% agar, 3 ml absoltute เอทานอล กรดอะซิติกน้ำแข็ง 3 ml) aab โดย (Gullo & Giudici, 2008); อมม่วงแดงน้ำดี Agar (VRBA, Difco) สำหรับโคลิฟอร์ม และเสริม ด้วย 50% ไข่แดงอิมัลชันและจุลินทรีย์คอนแทค P (MYP, Difco) สำหรับ B.cereus agar Polymyxin Mannitol ไข่แดง เพื่อปรับปรุงการตรวจสอบขีดจำกัดล่าง 200 - dilutions ten-fold ตัวอย่างของแข็ง หรือ 200-ตัวอย่างของเหลวหัว ถูกมาชุบไป 5 จานแต่ละ agar ขีดจำกัดการตรวจมี 10 CFU/g ในตัวอย่างที่เป็นของแข็งและ 1 CFU/ml สำหรับตัวอย่างของเหลว แผ่น agar ต่าง ๆ ถูก incubated เป็นดังนี้: PCA, 35 - c สำหรับ 48 h นาง 37 - ซีสำหรับวันที่ 3 กับ 5% Co2 GYC, 30 - C 3 วัน แอะ c 30 วัน 5 PDA, 25 - c 5 วัน VRBA, 37 - C ใน 24 h และ MYP, 30 - C 24 h.Bacteria และเชื้อราได้ quantified โดยการนับจำนวนของอาณานิคมที่เติบโตในแต่ละสื่อ ในกรณีของ B.cereus ทั่วอาณานิคมสีชมพูล้อมรอบ ด้วยเขตฝนถูกสุ่มรับ และโอนย้ายไปซอย Tryptic Agar (TSA, Difco) และ incubated ที่ 30 - c สำหรับอาณานิคม 24 h. ระบุใช้ระบบ VITEK 2 (buoMerieux มีนาคม I'Etoile ตาเลี่ยนฝรั่งเศส) มีการ์ด BCL (bio Merieux) และชุด PCR (PowerChek - คัด cereus detertion ชุด Kogene เทคโนโลยีชีวภาพ จำกัด เกาหลี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่าง (25 กรัมหรือมิลลิลิตร) เป็น collectd ปลอดเชื้อและปั่นด้วย 225 มล. น้ำเกลือ Steril (0.85% Nacl) โดยใช้ Stomacher (ที่ปั่น 400, เอิร์ดสหราชอาณาจักร) ที่ 239 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาที aliquots 1 มล. ถูกปรับลดลำดับสิบเท่าโดยใช้น้ำเกลือปลอดเชื้อและ 100 - ตัวอย่างที่ถูกแพร่กระจายไปชุบในที่ซ้ำกันโดยใช้สื่อดังต่อไปนี้: จานนับวุ้น (PCA, Difco) supplemanted กับ 0.002% bromophenol สีฟ้า (ซิกม่าดิช, เซนต์หลุยส์ , Mo, สหรัฐ) สำหรับ LAB; PotatoDextrose agar (PDA, Difco) ปรับค่าพีเอช 3.5 10% กรดทาร์ทาริก (Sigma) สำหรับเชื้อรา; กลาง GYC (กลูโคส 10%, 1.0% ยีสต์สารสกัดจาก 2.0% แคลเซียมคาร์บอเนต 1.4% วุ้น) และจากนั้นกลาง AE (กลูโคส 0.5% สารสกัดจากยีสต์ 0.3%, 0.4% เปปโตน, วุ้น 0.9%, 3 มล. เอทานอล absoltute 3 มล. น้ำแข็ง กรดอะซิติก) สำหรับ AAB (Gullo และ Giudici, 2008); สีม่วงสีแดงวุ้นน้ำดี (Vrba, Difco) สำหรับโคลิฟอร์ม; และ Mannitol ไข่แดง polymyxin วุ้นเสริมด้วย 50% อิมัลชันไข่แดงและขวดยาต้านจุลชีพ P (MYP, Difco) สำหรับ B.cereus เพื่อปรับปรุงการตรวจสอบวงเงินที่ต่ำกว่า 200 - การเจือจางสิบเท่าของกลุ่มตัวอย่างที่เป็นของแข็งหรือ 200-- ตัวอย่างของเหลวเจือปนกระจายชุบลงในห้าของแต่ละแผ่นวุ้น ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ 10 โคโลนี / กรัมตัวอย่างที่เป็นของแข็งและ 1 CFU / ml ตัวอย่างของเหลว แผ่นวุ้นที่แตกต่างกันถูกบ่มดังนี้ PCA 35 --c เวลา 48 ชั่วโมง; MRS 37 --c 3 วัน 5% Co2; GYC 30 -C 3 วัน; AE 30 คเป็นเวลา 5 วัน; PDA, 25-c เป็นเวลา 5 วัน; Vrba 37 -C เวลา 24 ชั่วโมง; และ MYP 30 -C 24 h.Bacteria และเชื้อราถูกวัดโดยการนับจำนวนโคโลนีที่เจริญเติบโตบน medium.In แต่ละกรณีของ B.cereus ที่อาณานิคมสีชมพูมักจะล้อมรอบไปด้วยเขตการเร่งรัดถูกสุ่มเลือกและย้ายไปถั่วเหลือง Tryptic วุ้น (TSA, Difco) และบ่มวันที่ 30 -c เป็นเวลา 24 ชั่วโมง อาณานิคมถูกระบุโดยใช้ VITEK 2 ระบบ (buoMerieux มีนาคม I'Etoile เลี่ยนฝรั่งเศส) ด้วยบัตร BCL (ไบโอ Merieux) และชุด PCR (Bacillus cereus PowerChek-- ชุด detertion, Kogene ไบโอเทค จำกัด ประเทศเกาหลี)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่าง ( 25 กรัม หรือมิลลิลิตรและ collectd aseptically บดกับ 225 มิลลิลิตร น้ำเกลือปลอดเชื้อ ( 0.85 % NaCl ) โดยใช้แผงประดับหน้าอก ( ปั่น 400 ซีเวิร์ด , UK ) ที่ 239 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาทีเฉยๆ 1 มลเป็นสิบเท่า ใช้ฆ่าเชื้อ น้ำเกลือเจือจาง และ 100 - จำนวนกระจายชุบซ้ำโดยใช้ สื่อต่อไปนี้ : Planetmath reference ( PCA difco ) supplemanted กับ 0โบรโมฟีน 002 % สีฟ้า ( ซิกม่า Aldrich เซนต์หลุยส์ โม เรา ) ห้องปฏิบัติการ ; potatodextrose Agar ( PDA , difco ) ปรับพีเอช 3.5 กับ 10% กรดทาร์ทาริก ( Sigma ) เชื้อรา ; gyc ขนาดกลาง ( 10% น้ำตาลกลูโคส 1.0 % สารสกัดจากยีสต์ 2.0 % แคลเซียมคาร์บอเนต , 1.4% วุ้น ) แล้วเอขนาดกลาง ( กลูโคส , 0.5% 0.3% ยีสต์สกัด 0.4% extract , 0.9% วุ้น 3 ml absoltute เอทานอล กรดแอซีติก 3 มล. ) สำหรับ AAB ( กูโล& giudici , 2008 )สีม่วงแดง ( vrba น้ำดี , แมนนิทอล difco ) สำหรับโคลิฟอร์ม และไข่แดง polymyxin agar ที่เติมอิมัลชันไข่แดง 50% และจุลชีพขวด P ( myp difco , ) สำหรับ b.cereus . ปรับปรุงลดขีดจำกัด , 200 -- สิบพับเจือจางตัวอย่างที่เป็นของแข็งหรือ 200 -- ตัวอย่างน้ำเจือปนอยู่กระจายลงบนจานของแต่ละห้าชุบวุ้นการจำกัดจำนวน 10 CFU / g และตัวอย่างที่เป็นของแข็ง 1 cfu / ml สำหรับตัวอย่างของเหลว แผ่นวุ้นที่แตกต่างกันมีดังนี้ : PCA ) 35 -- C 48 h ; นาง 37 -- C เป็นเวลา 3 วัน กับคาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์ gyc 30 - C เป็นเวลา 3 วัน เอ 30-c 5 วัน ; PDA , 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 วัน vrba 37 - C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ; และ myp , 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงแบคทีเรีย และเชื้อรา เป็นวัดโดยการนับจำนวนโคโลนีเติบโตในแต่ละระดับ ในกรณีของ b.cereus โดยปกติสีชมพูล้อมรอบด้วยเขตการตกตะกอนอาณานิคมสุ่มเลือกและโอนไปยังอาหารวุ้นถั่วเหลือง ( TSA difco , ) และบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง - อาณานิคมที่ถูกระบุว่าใช้ระบบไวเทค ( buomerieux 2 , i'etoile มีนาคม ,ของฝรั่งเศส ) กับ BCL การ์ด ( ไบโอ merieux ) และ PCR Kit ( powerchek -- Bacillus cereus detertion ชุด kogene เทคโนโลยีชีวภาพ Co . , เกาหลี )