The skin of ocellate puffer fish was not completely
solubilized with 0.5Macetic acid. In this way it was similar
to the skin of Callistoctopus arakawai arm (Nagai,
Nagamori, Yamashita, & Suzuki, 2001), cuttlefish outer
skin (Nagai, Yamashita, Taniguchi, Kanamori, & Suzuki,
2001) and paper nautilus outer skin (Nagai & Suzuki,
2001). This result was different from those for Japanese
sea bass, chub mackerel, and bullhead shark skin (Nagai
& Suzuki, 2000a). The collagen of ocellate puffer fish skin
was easiliy solubilized by limited pepsin proteolysis. This
was similar to those of edible jellyfish exumbrella (Nagai
et al., 1999) and rhizostomous jellyfish mesogloea (Nagai
et al., 2000). PSC was effectively purified by differential
salt precipitation. The yield of PSC was very high (44.7%
on a dry weight basis). On the other hand, the yield of
ASC was low (10.7% on a dry weight basis). This result
was similar to those for fish skin (Japanese sea bass,
51.4%, chub mackerel, 49.8%, and bullhead shark,
50.1%) (Nagai & Suzuki, 2000a), purple sea urchin test
(35.0%) (Nagai & Suzuki, 2000b), fish bone (Japanese sea
bass, 40.7%, horse mackerel, 43.5%, and ayu, 53.6%)
(Nagai & Suzuki, 2000c), edible jellyfish exumbrella
(46.4%) (Nagai et al., 1999), rhizostomous jellyfish
mesogloea (35.2%) (Nagai et al., 2000), C. arakawai
arm (62.9%) (Nagai, Nagamori, Yamashita, & Suzuki
et al., 2001), cuttlefish outer skin (35.0%) (Nagai,
Yamashita, Taniguchi, Kanamori, & Suzuki, 2001),
and paper nautilus outer skin (50.0%) (Nagai & Suzuki,
2001). It appears that a large amount of collagen can be
obtained fromaquatic animals. The collagen obtained was examined by SDS-PAGE using 3.5% gel. It was found
that these collagens comprised at least two different a
chains;a 1 and a 2 (Fig. 1). In electrophoretic mobility, the
positions of a chains of these collagens differed from those
of porcine skin a chains. That is, a chains of ocellate puffer
fish skin collagen are distinct in this primary structure. If
other a chains, such as a3 and a4, were present in these
collagens, they were not separated from the corresponding
a 1 chain under the electrophoretic conditions employed.
To determine the subunit composition of ocellate
puffer fish skin PSC, the denatured collagen was further
resolved by CM-Toyopearl 650M column chromatography
and its chromatographic fractions were identified
by SDS-PAGE. It was shown that PSC consists of
two a chains (Fig. 2). This collagen is a heterotrimer
with a chain composition of (a1)2a2. Kimura, Ohno,
Miyauchi, and Uchida (1987) examined the fish skin
collagens and reported that the a 3 chain was widely
distributed in teleosts, such as eel, sardine, chum salmon,
rainbow trout, carp, anger, Alaska pollack, cod,
halfbeak, common mackerel, tilapia, red barracuda,
northern dab, and file fish. In the previous paper
(Kimura, 1985; Kimura & Ohno, 1987; Kimura et al.,
1987; Piez, 1965), it was reported that the a 3 chain was
detected in 14 fish species of 17 teleosts. Moreover, we
have reported the existence of a 3 chain in edible jellyfish
exumbrella (Nagai et al., 1999), rhizostomous jellyfish
mesogloea (Nagai et al., 2000), ayu bone (Nagai &
Suzuki, 2000c), paper nautilus outer skin (Nagai &
Suzuki, 2001), and C. arakawai arm (Nagai, Nagamori,
Yamashita, & Suzuki, 2001a). Now our present data are
different from those of previous papers.
The collagens digested by lysyl endopeptidase were
applied to 15% gel SDS-PAGE to compare the patterns
of peptide fragment with porcine and other fish species
skin collagens. As a result, the electrophoretic pattern of
ocellate puffer PSC was similar to that of ASC (Fig. 3).
ผิวของปลาปักเป้า ocellate ไม่ถูกสมบูรณ์
ละลายด้วยกรด 0.5Macetic ด้วยวิธีนี้มันก็คล้าย
กับผิวของ Callistoctopus แขน arakawai (นากาอิที่
Nagamori, ยามาชิตะและซูซูกิ, 2001), ปลาหมึกนอก
ผิว (นากาอิ, ยามาชิตะ, ทานิกูชิคานาโมริและซูซูกิ
2001) และกระดาษผิวด้านนอก Nautilus (นากาอิ และซูซูกิ
2001) นี่คือผลที่แตกต่างจากที่ญี่ปุ่น
กะพงปลาน้ำจืดปลาทูและผิวฉลามวัว (นากาอิ
และซูซูกิ 2000A) คอลลาเจนของผิวปลาปักเป้า ocellate
ถูกละลาย easiliy โดยน้ำย่อย proteolysis จำกัด นี้
ก็คล้ายกับของ exumbrella แมงกะพรุนกิน (นากาอิ
et al., 1999) และ rhizostomous แมงกะพรุน mesogloea (นากาอิ
et al., 2000) PSC บริสุทธิ์อย่างมีประสิทธิภาพโดยค่า
การตกตะกอนเกลือ อัตราผลตอบแทนของ PSC สูงมาก (44.7%
บนพื้นฐานน้ำหนักแห้ง) บนมืออื่น ๆ , อัตราผลตอบแทนของ
ASC ต่ำ (10.7% บนพื้นฐานน้ำหนักแห้ง) ผลที่ได้นี้
ก็คล้ายคลึงกับที่สำหรับหนังปลา (ปลากะพงญี่ปุ่น,
51.4%, ปลาน้ำจืดปลาทู, 49.8% และฉลามวัว,
50.1%) (นากาอิและซูซูกิ 2000A) การทดสอบสีม่วงเม่นทะเล
(35.0%) (นากาอิและอีกแห่งหนึ่งโดย , 2000b) กระดูกปลา (ทะเลญี่ปุ่น
เบส 40.7% ม้าปลาทู, 43.5% และ Ayu, 53.6%)
(นากาอิและซูซูกิ 2000c) exumbrella แมงกะพรุนกินได้
(46.4%) (นากาอิ et al., 1999) rhizostomous แมงกะพรุน
mesogloea (35.2%) (นากาอิ et al., 2000), ซี arakawai
แขน (62.9%) (นากาอิ, Nagamori, ยามาชิตะและซูซูกิ
et al., 2001), ปลาหมึกผิวด้านนอก (35.0%) (นากาอิ
ยามาชิตะ, ทานิกูชิคานาโมริและซูซูกิ, 2001),
และกระดาษผิวด้านนอก Nautilus (50.0%) (นากาอิและซูซูกิ
2001) ก็ปรากฏว่ามีจำนวนมากของคอลลาเจนสามารถ
รับสัตว์ fromaquatic คอลลาเจนที่ได้รับการตรวจสอบโดยวิธี SDS-PAGE ใช้เจล 3.5% นอกจากนี้ยังพบ
ว่าคอลลาเจนเหล่านี้ประกอบด้วยอย่างน้อยสองแตกต่างกัน
โซ่; 1 และ 2 (รูปที่ 1). ในการเคลื่อนย้าย electrophoretic ที่
ตำแหน่งของเครือข่ายของคอลลาเจนเหล่านี้แตกต่างไปจากผู้ที่
ผิวของสุกรโซ่ นั่นคือโซ่ ocellate ปักเป้า
คอลลาเจนปลาผิวมีความแตกต่างในโครงสร้างหลักนี้ ถ้า
โซ่อื่น ๆ เช่น A3 และ A4, มีอยู่ในเหล่านี้
คอลลาเจน, พวกเขาไม่ได้แยกออกจากที่สอดคล้องกัน
1 ห่วงโซ่ภายใต้เงื่อนไข electrophoretic ลูกจ้าง.
เพื่อตรวจสอบองค์ประกอบ subunit ของ ocellate
ปักเป้า PSC หนังปลา, คอลลาเจนแปลงสภาพเป็นต่อ
แก้ไขได้โดย CM-650M Toyopearl คอลัมน์
และเศษส่วนโครมาถูกระบุ
โดยวิธี SDS-PAGE มันก็แสดงให้เห็นว่า PSC ประกอบด้วย
สองโซ่ (รูปที่. 2) คอลลาเจนนี้เป็น heterotrimer
กับองค์ประกอบของห่วงโซ่ (A1) 2a2 คิมูระโอโนะ
Miyauchi และดะ (1987) ตรวจสอบหนังปลา
คอลลาเจนและรายงานว่าห่วงโซ่ 3 กันอย่างแพร่หลาย
กระจายใน teleosts เช่นปลาไหลปลาซาร์ดีน, ชุมปลาแซลมอน, ปลา
เรนโบว์เทราท์, ปลาคาร์พ, โกรธ, อลาสกาพอลแล็ค, COD,
วงศ์ปลาเข็ม, ปลาทูที่พบบ่อย, ปลานิล, ปลาน้ำดอกไม้สีแดง,
ตบเบา ๆ ทางตอนเหนือและปลาไฟล์ ในกระดาษก่อนหน้า
(Kimura 1985; คิมูระและโอโนะ 1987; คิมูระ, et al.,
1987; Piez, 1965) มีรายงานว่าห่วงโซ่ 3 ถูก
ตรวจพบในปลา 14 ชนิดจาก 17 teleosts นอกจากนี้เรายัง
ได้มีการรายงานการดำรงอยู่ของ 3 ห่วงโซ่อุปทานในแมงกะพรุนกิน
exumbrella (นากาอิ et al., 1999) rhizostomous แมงกะพรุน
mesogloea (นากาอิ et al., 2000), กระดูก Ayu (นากาอิและ
ซูซูกิ 2000c) กระดาษผิวด้านนอกหอยโข่ง (นากาอิและ
ซูซูกิ, 2001) และ C แขน arakawai (นากาอิ, Nagamori,
ยามาชิตะและซูซูกิ 2001a) ตอนนี้นำเสนอข้อมูลของเรามีความ
แตกต่างจากที่ก่อนหน้านี้ของเอกสาร.
คอลลาเจนย่อยโดย lysyl endopeptidase ถูก
นำไปใช้กับ 15% เจล SDS-PAGE เพื่อเปรียบเทียบรูปแบบ
ของชิ้นส่วนเปปไทด์ที่มีหมูและปลาสายพันธุ์อื่น ๆ
คอลลาเจนผิว เป็นผลให้รูปแบบของอิเลค
ocellate ปักเป้า PSC ก็คล้ายกับที่ของ ASC (รูปที่. 3)
การแปล กรุณารอสักครู่..
