Cell Culture. The murine melanoma c

Cell Culture. The murine melanoma cell line B16F10 was obtained from the UCSF Cell Culture Facility. The cells were cultured in pre warmed medium (MEM Eagle's with EBSS medium containing 10% fetal bovine serum, 1% MEM nonessential amino acids, 110 mg/L sodium pyruvate, and 1% penicillin−streptomycin) at 37 °C in a humidified atmosphere composed of 5% CO2. MDA-MB-231 and MDA-MB-435 breast cancer cell lines were cultured in a medium consisting of Dulbecco's Modified Earl's medium (DME) H-16, containing 10% FBS and 1% MEM nonessential amino acids. The medium for culturing the monkey kidney fibroblast CV-1 cells consisted of DME H-21 (high glucose 4.5 g/L) containing 10% fetal bovine serum, 1% MEM nonessential amino acids, 1% HEPES buffer, and 1% penicillin−streptomycin. For all of our experiments, cells were harvested from subconfluent cultures using trypsin-versene (0.05 and 0.02% respectively) and were suspended in medium. Cell viability was determined using the trypan blue exclusion method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัฒนธรรมที่เซลล์ เซลล์ murine melanoma บรรทัด B16F10 ได้รับจาก UCSF เซลล์วัฒนธรรมสถาน เซลล์ถูกล้างในก่อนอุ่นปานกลาง (MEM อีเกิ้ล EBSS ขนาดกลางที่มี 10% ทารกวัวซีรั่ม กรดอะมิโนไม่จำเป็น 1% MEM, pyruvate โซเดียม 110 mg/L และ 1% penicillin−streptomycin) ที่อุณหภูมิ 37 ° C ในบรรยากาศณอุณหภูมิที่ประกอบด้วย 5% CO2 MDA-MB-231 และบรรทัดเซลล์มะเร็งเต้านม MDA-MB-435 ถูกล้างในสื่อประกอบด้วย Dulbecco ของแก้ไขเอิร์ลปานกลาง (DME) H-16 ที่ประกอบด้วย 10% FBS และ 1% MEM ไม่จำเป็นกรดอะมิโน สื่อสำหรับนำไปเลี้ยงเซลล์ fibroblast CV 1 ไตลิงที่ประกอบด้วย DME H-21 (กลูโคสสูง 4.5 g/L) ที่ มี 10% ซีรั่มทารกวัว กรดอะมิโนไม่จำเป็น 1% MEM บัฟเฟอร์ HEPES 1%, 1% penicillin−streptomycin สำหรับการทดลองของเรา เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวจากวัฒนธรรม subconfluent ใช้ versene ทริปซิน (0.05 และ 0.02% ตามลำดับ) และถูกหยุดชั่วคราวในกลาง เซลล์ชีวิตที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธีแยก trypan blue

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเพาะเลี้ยงเซลล์ B16F10 สายพันธุ์ของเซลล์เนื้องอกหมาที่ได้รับจาก UCSF เซลล์เพาะเลี้ยงสิ่งอำนวยความสะดวก เซลล์เพาะเลี้ยงใน pre อบอุ่นกลาง (MEM อินทรีกับสื่อ EBSS ที่มี 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์วัว, 1% MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น 110 มิลลิกรัม / ลิตรโซเดียมไพรูและ 1% penicillin-streptomycin) ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในบรรยากาศความชื้น ประกอบด้วย CO2 5% MDA-MB-231 และ MDA-MB-435 โรคมะเร็งเต้านมเซลล์เพาะเลี้ยงในอาหารที่ประกอบด้วยดัดแปลงกลางเอิร์ล Dulbecco ของ (DME) H-16 ที่มี 10% FBS และ 1% MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น สื่อสำหรับการเพาะเลี้ยงไตลาสท์ลิง CV-1 เซลล์ประกอบด้วย DME H-21 (กลูโคสสูง 4.5 กรัม / ลิตร) ที่มี 10% ซีรั่มของทารกในครรภ์วัว, 1% MEM กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น, 1% HEPES บัฟเฟอร์และ 1% penicillin- streptomycin สำหรับทุกการทดลองของเราเก็บเกี่ยวเซลล์จากวัฒนธรรม subconfluent ใช้ trypsin-versene (0.05 และ 0.02% ตามลำดับ) และถูกระงับในระดับปานกลาง เซลล์ที่มีชีวิตถูกกำหนดโดยใช้วิธีการยกเว้น Trypan สีฟ้า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์เพาะเลี้ยง โดย ~ เนื้องอกเซลล์เส้น b16f10 ได้จาก UCSF เซลล์สิ่งอำนวยความสะดวก เซลล์เพาะเลี้ยงก่อนอุ่นปานกลาง ( แหม่ม นกอินทรีกับ ebss BAP ความเข้มข้น 10% fetal bovine serum , 1% แหม่มกรดอะมิโน 110 mg / L โซเดียมไพรูเวทและ 1% เพนนิซิลลิน− streptomycin ) ที่ 37 ° C ในบรรยากาศ humidified ประกอบด้วย CO2 5% mda-mb-231 mda-mb-435 มะเร็งเต้านมและเซลล์มะเร็งเพาะเลี้ยงในอาหารที่ประกอบด้วยดัลเบโค่การเอิร์ลขนาดกลาง ( DME ) h-16 ที่มี FBS 10% และ 1% แหม่มกรดอะมิโน . อาหารสำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ไฟโบรบลาสต์ cv-1 ไตลิงเป็นฝูง DME ( กลูโคสสูง 4.5 กรัม / ลิตร ) ผสม 10% fetal bovine serum , 1% แหม่ม กรดอะมิโน , 1% และ 1% ฮีเปส บัฟเฟอร์ เพนนิซิลลิน−เหมือนเคย . สำหรับการทดลองของเรา เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวจากวัฒนธรรม subconfluent โดยใช้เอนไซม์ versene ( 0.05 และ 0.02 ตามลำดับ ) และแขวนลอยในตัวกลาง เซลล์ถูกกำหนดโดยใช้ไตรแพนสีฟ้าไปวิธี