dinoflagellates, and examined the t

dinoflagellates, and examined the toxicity by mouse
bioassay. The presence of PSP toxins was confirmed by
electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), and
the toxin composition of the crab and the mussel were also
analyzed by high performance liquid chromatography with
the postcolumn derivatization (HPLC-FLD) method
(Oshima, 1995a).
2. Materials and methods
2.1. Shellfish
In April 1999, specimens of the crab Telmessus
acutidens, mussel Mytylus galloprovincialis, short-necked
clam Tapes japonica, sea urchin Strongylocentrotus nudus,
oyster Crassostrea gigas, scallop Chlamys farreri nipponensis,
and ascidian Halocynthia roretzi were collected at
Onahama in Japan by scuba diving. The highest concentration
of Alexandrium spp. during our collection in 1999
reached to 2.4 £ 103 cells/l. The crabs and the mussels were
collected again in 2000 at the same point, though the
concentration of Alexandrium spp. reached only 10 cells/l.
The collected shellfishes were stored below 220 8C until
sample preparation.
2.2. Assay of toxicity
The test solution for toxicity assay was extracted from
the viscera of the crabs, and from the whole edible part of
other specimens. Briefly, each tissue was ground with the
same volume of 0.1N HCl, and heated in boiling water for
5 min after adjusting the pH to 2–4. The mixture was
centrifuged, and the supernatant was examined by the
mouse bioassay method which is the official Japanese
method for PSP monitoring (Kawabata, 1978). The activity
was expressed in mouse units (MU), 1 MU being defined as
the amount of toxin required to kill a 20 g ddY strain male
mouse in 15 min after intraperitoneal injection.
2.3. Analysis of the toxin by HPLC-FLD
The extract used for the toxicity assay was passed
through a cartridge column (Sep-Pack C18, Waters) and an
ultrafiltration membrane (Ultrafree C3GC, Millipore), and
then the filtrate was applied for HPLC-FLD analysis. HPLCFLD
analysis was performed on a reversed phase column
(Develosil C8, Nomura Chemicals) by the method of
Oshima (1995a). All chemicals and solvents used were
HPLC or analytical grade.
2.4. ESI-MS analysis of PSP toxins
The peaks expected as gonyautoxins (GTXs) and Nsulfocarbamoyl
toxins (

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

dinoflagellates และตรวจสอบความเป็นพิษที่ตามเมาส์bioassay สถานะของสารพิษ PSP ได้รับการยืนยันโดยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionization โตรเมทรี (ESI-MS), และมีส่วนประกอบของพิษของปูและหอยยังวิเคราะห์ โดย chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงด้วยวิธี derivatization postcolumn (HPLC-FLD)(Oshima, 1995a)2. วัสดุและวิธีการ2.1. หอยในเดือน 1999 เมษายน specimens ปู Telmessusacutidens, Mytylus galloprovincialis หอยแมลงภู่สั้นคอjaponica เทปหอย ปลิงทะเล Strongylocentrotus nudusออยสเตอร์ Crassostrea gigas หอยแครง Chlamys farreri nipponensisและ ascidian Halocynthia roretzi ถูกเก็บรวบรวมที่Onahama ในญี่ปุ่นโดยดำ ความเข้มข้นสูงสุดของโอ Alexandrium ระหว่างคอลเลกชันของเราในปี 1999ถึง 2.4 £ 103 เซลล์/l ปูและหอยแมลงภู่ได้รวบรวมอีกครั้งในปี 2000 ที่จุดเดียวกัน แม้ว่าการความเข้มข้นของโอ Alexandrium ถึงเซลล์เพียง 10 lShellfishes รวบรวมถูกเก็บไว้ใต้ 8C 220 จนถึงการเตรียมสารตัวอย่าง2.2 การวิเคราะห์ความเป็นพิษของโซลูชั่นทดสอบสำหรับทดสอบความเป็นพิษที่สกัดจากศพ ของปู และส่วนของกินทั้งหมดอื่น ๆ ไว้เป็นตัวอย่าง สั้น ๆ แต่ละเนื้อเยื่อถูกพื้นดินด้วยการไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันของ 0.1N HCl และความร้อนในการต้มน้ำ5 นาทีหลังจากปรับ pH 2-4 มีส่วนผสมcentrifuged และ supernatant ถูกตรวจสอบโดยการวิธี bioassay เมาส์ที่ญี่ปุ่นอย่างเป็นทางการวิธีการตรวจสอบ (สำรองห้อง 1978) PSP กิจกรรมถูกแสดงในหน่วยเมาส์ (หมู), หมู่ที่ 1 ถูกกำหนดเป็นจำนวนสารพิษที่ต้องฆ่าชายต้องใช้ ddY 20 กรัมเมาส์ใน 15 นาทีหลังจากฉีด intraperitoneal2.3 การวิเคราะห์สารพิษโดย HPLC FLDการดึงข้อมูลที่ใช้สำหรับทดสอบความเป็นพิษได้ผ่านผ่านคอลัมน์ตลับ (C18 Sep-Pack น้ำ) และเมมเบรน ultrafiltration (Ultrafree C3GC มาก), และแล้ว สารกรองที่ใช้สำหรับวิเคราะห์ HPLC FLD HPLCFLDทำการวิเคราะห์ในคอลัมน์ระยะย้อนกลับ(Develosil C8 พัฒนสินเคมี) โดยวิธีการOshima (1995a) สารเคมีและหรือสารทำละลายที่ใช้ทั้งหมดHPLC หรือเกรดวิเคราะห์2.4. ESI MS วิเคราะห์สารพิษ PSPแห่งเป็น gonyautoxins (GTXs) และ Nsulfocarbamoyl(สารพิษ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

dinoflagellates dinoflagellates, and examined the toxicity by mouse
และการตรวจสอบความเป็นพิษโดยเมาส์ชีวภาพ bioassay. The presence of PSP toxins was confirmed by
electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), and
the toxin composition of the crab and the mussel were also
analyzed by high performance liquid chromatography with
the postcolumn derivatization (HPLC-FLD) method
(Oshima, 1995a).
2. Materials and methods
2.1. Shellfish
In April 1999, specimens of the crab Telmessus
acutidens, mussel Mytylus galloprovincialis, short-necked
clam Tapes japonica, sea urchin Strongylocentrotus nudus,
oyster Crassostrea gigas, scallop Chlamys farreri nipponensis,
and ascidian Halocynthia roretzi were collected at
Onahama in Japan by scuba diving. The highest concentration
of Alexandrium spp. during our collection in 1999
reached to 2.4 £ 103 cells/l. The crabs and the mussels were
collected again in 2000 at the same point, though the
concentration of Alexandrium spp. reached only 10 cells/l.
The collected shellfishes were stored below 220 8C until
sample preparation.
2.2. Assay of toxicity
The test solution for toxicity assay was extracted from
the viscera of the crabs, and from the whole edible part of
other specimens. Briefly, each tissue was ground with the
same volume of 0.1N HCl, and heated in boiling water for
5 min after adjusting the pH to 2–4. The mixture was
centrifuged, and the supernatant was examined by the
mouse bioassay method which is the official Japanese
method for PSP monitoring (Kawabata, 1978). The activity
was expressed in mouse units (MU), 1 MU being defined as
the amount of toxin required to kill a 20 g ddY strain male
mouse in 15 min after intraperitoneal injection.
2.3. Analysis of the toxin by HPLC-FLD
The extract used for the toxicity assay was passed
through a cartridge column (Sep-Pack C18, Waters) and an
ultrafiltration membrane (Ultrafree C3GC, Millipore), and
then the filtrate was applied for HPLC-FLD analysis. HPLCFLD
analysis was performed on a reversed phase column
(Develosil C8, Nomura Chemicals) by the method of
Oshima (1995a). All chemicals and solvents used were
HPLC or analytical grade.
2.4. ESI-MS analysis of PSP toxins
The peaks expected as gonyautoxins (GTXs) and Nsulfocarbamoyl
toxins (

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไดโนแฟลกเจลลา และการตรวจสอบความเป็นพิษ โดยทดสอบเมาส์

การปรากฏตัวของ PSP สารพิษที่ได้รับการยืนยันโดยวิธีพ่นละอองไฟฟ้าไอแมสสเปกโตรเมทรี ( esi-ms

) และสารพิษส่วนประกอบของปูและหอยยัง
วิเคราะห์โดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงด้วย
postcolumn ซัล ( hplc-fld )
( ชิมะ 1995a )
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 . หอย
ในเดือนเมษายน 1999ตัวอย่างของปู telmessus
acutidens mytylus galloprovincialis , หอยแมลงภู่ , หอยคอสั้น
เทปญี่ปุ่น หอยเม่น strongylocentrotus nudus
กรามดำ Crassostrea ศึกษา , หอยนางรม , หอยเชลล์ chlamys farreri nipponensis
ascidian , และ halocynthia roretzi เก็บตัวที่
onahama ในประเทศญี่ปุ่นโดยการดำน้ำ ความเข้มข้นสูงสุดของ ล็กซานเดรียม spp . ในคอลเลกชันของเรา

ถึงปี 24 กว่า 103 เซลล์ / ลิตร ปูและหอยเป็น
รวบรวมอีกครั้งใน 2000 ที่จุดเดียวกัน แม้ว่า
ความเข้มข้นของอเล็กแซนเดรียม spp . ถึง 10 เซลล์ / ลิตร
รวบรวม shellfishes ที่ถูกเก็บไว้ด้านล่าง 8C 220 ตัวอย่างการเตรียมจนถึง
.
2.2 . การทดสอบความเป็นพิษของสารละลายเพื่อใช้ทดสอบความเป็นพิษ

ถูกสกัดจากเครื่องในของปู และจากส่วนที่กินได้ทั้ง
ตัวอย่างอื่น ๆสั้น ๆ , แต่ละเนื้อเยื่อพื้นดินที่มีปริมาณเดียวกัน
0.1n HCL และให้ความร้อนในน้ำเดือด
5 นาทีหลังจากปรับ pH 2 – 4 ส่วนผสม
ระดับ และสูงระดับ
เมาส์วิธีซึ่งเป็นวิธีทางการญี่ปุ่น
วิธีการตรวจสอบ PSP ( Kawabata , 1978 ) กิจกรรม
ถูกแสดงในหน่วยของเมาส์ ( MU ) 1 มูถูกนิยามเป็น
ปริมาณของสารพิษที่ต้องฆ่า ddy 20 g เมื่อยชาย
เมาส์ใน 15 นาทีหลังฉีดเข้าช่องท้อง .
2.3 การวิเคราะห์สารพิษ ด้วย hplc-fld
สารสกัดที่ใช้สำหรับการทดสอบความเป็นพิษผ่าน
ผ่านตลับคอลัมน์ ( กันยายนแพ็ค c18 น้ำ ) และกรองเมมเบรน ( ultrafree c3gc
,
มิลลิ ) , และจากนั้น โดยใช้การวิเคราะห์ hplc-fld . hplcfld
วิเคราะห์ข้อมูลในคอลัมน์
( กลับเฟส develosil ดอง , โนมูระสารเคมี ) โดยใช้วิธี
ชิมะ ( 1995a ) ทั้งหมดเคมีภัณฑ์และตัวทำละลายที่ใช้คือ HPLC หรือเกรดวิเคราะห์
.
2.4 . esi-ms การวิเคราะห์สารพิษ PSP
ยอดคาดว่า gonyautoxins ( gtxs ) และ nsulfocarbamoyl
สารพิษ (