Erythrocytic malaria parasites degr

Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases (plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in this process are unknown. We previously showed that falcipain-2 is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2 gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites were indistinguishable from wild-type parasites and developed normally. The knockout parasites had decreased and delayed expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased transcription of a second copy of the gene (falcipain-2′). Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type, knockout parasites were about 3 times more sensitive to the cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin degradation by malaria parasites.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ย่อยสลายฮีโมโกลบินในเปรี้ยวอาหารแวคิวโอลจะได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาภาวะธำรงดุลของปรสิต ไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบินปรากฏขึ้นเพื่อ ให้กระบวนการสหกรณ์ต้อง proteases cysteine (falcipains) และ aspartic proteases (plasmepsins), แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้จะไม่รู้จัก เราเคยพบที่ falcipain-2 เป็นราคารติเอส cysteine แวคิวโอลอาหารเป็น trophozoite หลัก การกำหนดลักษณะบทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เรายีน falcipain 2 ระหว่างสองวัน และประเมินผลของการแก้ไขนี้ Trophozoites น่าพิศวง 2 Falcipain มีกิจกรรม cysteine รติเอสลดลงอย่างเด่นชัด และ บวม สีดำย้อมสีอาหาร vacuoles สอดคล้องกับบล็อกในไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบิน เป็นสาเหตุ cysteine รติเอส inhibitors อย่างไรก็ตาม ขั้นผู้ใหญ่มากน่าพิศวงกับจำแนกไม่ได้จากปรสิตชนิดป่า และพัฒนาตามปกติ ปรสิตน่าพิศวงได้ลดลง และความล่าช้าของ falcipain-2 ที่ปรากฏการนำ โดยเพิ่ม transcription ของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2′) ของ falcipains และ plasmepsins อื่น ๆ คล้ายกับ ชนิดของป่า และน่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าชนิด ปรสิตน่าพิศวงได้ประมาณ 3 ครั้งอ่อนไหว cysteine inhibitors รติเอส E-64 และ leupeptin และ 50-fold กว่าอ่อนไหว aspartic รติเอสเตอร์ pepstatin ผลของเรากำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ไฮโตรไลซ์ของฮีโมโกลบินใน trophozoites นอกจากนี้ พวกเขาเน้นดำเนินการสหกรณ์ของ cysteine และ aspartic proteases ในการสลายตัวของฮีโมโกลบิน โดยปรสิตมาลาเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ลดฮีโมโกลใน vacuole อาหารที่เป็นกรดที่จะได้รับกรดอะมิโนอิสระและรักษาสมดุลปรสิต การย่อยสลายฮีโมโกลที่ดูเหมือนจะเป็นกระบวนการที่ต้องใช้ความร่วมมือโปรตีเอส cysteine​​ (falcipains) และโปรตีเอส aspartic (plasmepsins) แต่บทบาทที่เฉพาะเจาะจงของเอนไซม์ที่แตกต่างกันในขั้นตอนนี้ไม่เป็นที่รู้จัก ก่อนหน้านี้เราแสดงให้เห็นว่า falcipain-2 เป็นอาหารที่สำคัญ trophozoite vacuole cysteine​​ น้ำย่อย ลักษณะบทบาทที่เฉพาะเจาะจงของ falcipain-2, เราหยุดชะงักยีน falcipain-2 และการประเมินผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงนี้ trophozoites Falcipain-2-ที่น่าพิศวงได้ลดลงอย่างเห็นได้ชัดกิจกรรมโปรติเอส cysteine​​ และบวม vacuoles อาหารย้อมสีเข้มสอดคล้องกับบล็อกในการย่อยสลายฮีโมโกลเป็นที่เกิดจากน้ำย่อยโปรตีน cysteine แต่ขั้นตอนที่เป็นผู้ใหญ่มากขึ้นของปรสิตที่น่าพิศวงก็แยกไม่ออกจากปรสิตชนิดป่าและการพัฒนาตามปกติ ปรสิตที่น่าพิศวงได้ลดลงและการแสดงออกของความล่าช้า falcipain-2 ซึ่งดูเหมือนจะกำกับโดยถอดความที่เพิ่มขึ้นของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2) การแสดงออกของ falcipains อื่น ๆ และ plasmepsins เป็นที่คล้ายกันในป่าชนิดและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าประเภทปรสิตที่น่าพิศวงอยู่ประมาณ 3 ครั้งที่มีความสำคัญมากขึ้นในการน้ำย่อยโปรตีน cysteine​​ E-64 และ leupeptin และกว่า 50 เท่าที่มีความสำคัญมากขึ้นในการน้ำย่อย aspartic pepstatin ยับยั้ง ผลของเรากำหนดฟังก์ชั่นที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ falcipain-2, การย่อยสลายของเม็ดเลือดแดงใน trophozoites นอกจากนี้พวกเขาเน้นการดำเนินการความร่วมมือของโปรตีเอส cysteine​​ และ aspartic การย่อยสลายฮีโมโกลจากปรสิตมาลาเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

erythrocytic มาลาเรียปรสิตเนื่องจากฮีโมโกลบินในเซลล์จะได้รับอาหารที่เป็นกรดกรดอะมิโนอิสระ และรักษาและความสมดุลของร่างกาย ย่อยสลายเม็ดเลือดแดง ปรากฏเป็น กระบวนการทางสหกรณ์ต้องซีสเตอีน ( falcipains ) และเสียคุณค่าทางอาหาร ( plasmepsins ) แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้ จะไม่รู้จักเราเคยพบว่า falcipain-2 เป็นหลักทรอพโฟซ้อยต์แวคิวโอลอาหารซีสเตอีนโปรติเอส เพื่อวิเคราะห์บทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราหยุดชะงัก ยีน falcipain-2 และผลของการเปลี่ยนแปลงนี้ประเมิน falcipain-2-knockout trophozoites ได้เด่นชัดลดลงซีสเตอีนโปรกิจกรรมและบวม , มืดคราบอาหาร แวคิวโอล สอดคล้องกับบล็อกในการย่อยสลาย ฮีโมโกลบินเป็นกรดอะมิโนจากโปรตีนตัวยับยั้ง แต่ผู้ใหญ่มากขึ้นขั้นตอนของพยาธิ โดยถูกแยกจากปรสิตผลิตและพัฒนาได้ตามปกติ น็อกปรสิตได้ลดลงและล่าช้า การแสดงออกของ falcipain-2 ซึ่งปรากฏเป็นกำกับโดยเพิ่มสำเนาของการถอดรหัสของยีน ( falcipain-2 School )การแสดงออกของ falcipains อื่น ๆและ plasmepsins ใกล้เคียงกันในความเหมือนและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับของ ปรสิต โดยมีค่าประมาณ 3 ครั้งมีความไวต่อโปรตีนกรดอะมิโนและโปรตีน e-64 ลูเพปติน และกว่า 50 พับมีความไวต่อสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอสเสีย pepstatin . การกำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ของเรา ,การย่อยสลายของฮีโมโกลบินใน trophozoites . นอกจากนี้ จะเน้นการกระทำของกรดอะมิโน Aspartic สหกรณ์และเพื่อในการสลายเม็ดเลือดแดงโดยปรสิตมาลาเรีย