2.6.6. GC-FID analysis of total cho

2.6.6. GC-FID analysis of total cholesterol
One-tenth of the unsaponifiable matter was dried under
nitrogen flow and subjected to silylation by adding 0.1 mL of
the derivatizing mixture (pyridine/hexamethyldisilazane/trimethylchlorosilane,
5:2:1, v/v/v) at 40 C for 15 min; thereafter, it was
dried under nitrogen flow and dissolved in 100 lL of n-hexane
(Sweeley, Bentley, Makita, & Wells, 1963). One microlitre of the
silylated solution was injected into an Agilent 7820 gas chromatograph
(Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, USA), equipped
with a split-splitless injector and flame ionization detector (FID).
A HP-5 fused–silica capillary column (30 m  0.32 mm i.d.
0.25 lm film thickness) coated with 5%-phenyl-methylpolysiloxane
(Hewlett–Packard, Palo Alto, USA) was used. Oven temperature
was programmed from 230 to 270 C at a rate of 2 C/min, then
increased to 300 C at a rate of 1 C/min and finally held at
300 C for 10 min. Nitrogen was used as carrier gas at a flow rate
of 1.5 mL/min. Injector and FID temperatures were both set at
325 C.
Total cholesterol was quantified by the internal standard method,
using 5a-cholestane as internal standard (IS). Peak identification
of cholesterol was carried out by comparing the peak
retention time with that of the cholesterol standard and by spiking
the samples with a small amount of cholesterol standard. Quantification
of cholesterol was performed by using relative response
factors (Guardiola, Bou, Boatella, & Codony, 2004), which were calculated using standard solutions with known concentrations
of cholesterol and 5a-cholestane.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6.6 GC-FID วิเคราะห์คอเลสเตอรอลรวม
หนึ่งในสิบของเรื่อง unsaponifiable แห้งภายใต้
การไหลของไนโตรเจนและยัดเยียดให้ silylation โดยการเพิ่ม 0.1 มิลลิลิตร
ผสม derivatizing (ไพริดีน / hexamethyldisilazane / trimethylchlorosilane,
5: 2: 1, v / v / v) ที่ 40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที; หลังจากนั้นมันก็
แห้งภายใต้การไหลของไนโตรเจนและละลายใน 100 LL n-เฮกเซน
(Sweeley เบนท์ลีย์, Makita และเวลส์ 1963) หนึ่งไมโครลิตรของ
การแก้ปัญหา silylated ถูกฉีดเข้าไปในก๊าซ Chromatograph Agilent 7820
(Agilent Technologies, Inc, ซานตาคลารา, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) พร้อม
กับหัวฉีดแยก Splitless และเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ (FID).
HP-5 ผสมซิลิกา คอลัมน์ฝอย (30 เมตร? 0.32 มมรหัส
? 0.25 ไมครอนความหนาของฟิล์ม) เคลือบด้วย 5% -phenyl-methylpolysiloxane
(Hewlett-Packard, พาโลอัลโต, สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้ อุณหภูมิเตาอบ
เป็นโปรแกรม 230-270 องศาเซลเซียสในอัตรา 2 องศาเซลเซียส / นาทีแล้ว
เพิ่มขึ้นถึง 300 องศาเซลเซียสในอัตรา 1 องศาเซลเซียส / นาทีและในที่สุดก็จัดขึ้นที่
300 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที ไนโตรเจนที่ใช้เป็นก๊าซที่อัตราการไหล
1.5 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีดและอุณหภูมิ FID ทั้งสองตั้งอยู่ที่
325 องศาเซลเซียส.
คอเลสเตอรอลทั้งหมดถูกวัดโดยวิธีมาตรฐานภายใน
ใช้ 5a-cholestane เป็นมาตรฐานภายใน (IS) การระบุจุดสูงสุด
ของคอเลสเตอรอลได้ดำเนินการโดยการเปรียบเทียบจุดสูงสุด
เวลาการเก็บรักษาที่มีมาตรฐานคอเลสเตอรอลและองศา
ตัวอย่างมีจำนวนน้อยของมาตรฐานคอเลสเตอรอล ปริมาณ
ของคอเลสเตอรอลที่ได้ดำเนินการโดยใช้การตอบสนองญาติ
ปัจจัย (Guardiola, Bou, Boatella และ Codony, 2004) ซึ่งได้รับการคำนวณโดยใช้โซลูชั่นมาตรฐานที่มีความเข้มข้นที่เป็นที่รู้จัก
ของคอเลสเตอรอลและ 5a-cholestane

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6.6 . การวิเคราะห์ gc-fid รวมคอเลสเตอรอล
หนึ่งในสิบของเรื่อง unsaponifiable แห้งภายใต้
ไหลไนโตรเจนและภายใต้ซิลิเวชัน โดยเพิ่ม 0.1 มิลลิลิตร ผสมสารท derivatizing
/ /
5:2:1 trimethylchlorosilane เฮกซาเมทิลไดซิลาเซน , V / V / V ) ที่ 40  เป็นเวลา 15 นาที ; หลังจากนั้นมัน
แห้งภายใต้การไหลไนโตรเจน และละลายใน 100 จะบีบ
( sweeley มากิน , บ่อ , & 1963 )หนึ่งไมโครลิตรของ
silylated สารละลายที่ฉีดเข้าไปในแก๊สโครมาโตกราฟ
7820 เลนต์ ( Agilent Technologies Inc , ซานตา คลาร่า , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) , การติดตั้ง
กับแยก splitless ฉีดและเครื่องตรวจจับไอเปลว ( FID ) : hp-5 ผสมซิลิกาคอลัมน์ capillary ) ( 30 ม.  0.32 มม. ด้วย
 0.25 โดยฟิล์ม ความหนาเคลือบด้วย 5 - ฟีนิล methylpolysiloxane
( Hewlett - Packard , พาโลอัลโต , สหรัฐอเมริกา ) คือใช้
อุณหภูมิเตาอบเป็นโปรแกรมจาก 230 ถึง 270  C ที่อัตรา 2  องศาเซลเซียส / นาที แล้วเพิ่มเป็น 300 
C อัตรา 1  องศาเซลเซียส / นาที และสุดท้ายที่จัดขึ้นที่ 
300 C 10 นาทีไนโตรเจนที่ใช้เป็นแก๊สตัวพา ที่อัตราการไหล
1.5 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีด และอุณหภูมิ FID ทั้งสองไว้ที่ 325 C .

 รวมคอเลสเตอรอลถูกตรวจโดยวิธีมาตรฐานภายใน
ใช้ 5A cholestane เป็นมาตรฐานภายใน ( คือ )ยอดบัตร
ของคอเลสเตอรอลที่กระทำโดยเปรียบเทียบยอด
retention time กับมาตรฐานของคอเลสเตอรอลและ spiking
ตัวอย่างที่มีจำนวนเล็ก ๆของมาตรฐานคอเลสเตอรอล ปริมาณของคอเลสเตอรอลโดยใช้

ใช้ปัจจัยตอบสนองญาติ ( Guardiola Bou boatella & , , , codony , 2004 ) ซึ่งคำนวณโดยใช้โซลูชั่นมาตรฐานที่ทราบค่าความเข้มข้น
ของคอเลสเตอรอลและ 5A cholestane .