KDML 105 full-fat rice bran was def

KDML 105 full-fat rice bran was defatted by extracting twice with three volumes of hexane. The defatted rice bran was air-dried overnight in a fume hood, ground and sieved through a 0.5 mm screen.

Free phenolic compounds in defatted rice bran were extracted by shaking with 80% chilled ethanol (defatted rice bran: 80% chilled ethanol, 1:5) for 30 min. After centrifugation at 3600×g for 15 min, the supernatant was discarded, and the extraction was repeated two times (Adom & Liu, 2002). The residue was air-dried overnight in a fume hood, ground and kept at −20 °C until use.

RBP was fractionated according to the method of Chanput et al. (2009) with slight modification. The defatted rice bran (10 g) was first fractionated by extracting with distilled water for 60 min (rice bran: water, 1:6 w/v), filtered through nylon cloth (100 mesh) and centrifuged at 10,000×g for 30 min at 20 °C to obtain the albumin fraction (AF). The supernatants were pooled and ammonium sulfate was added at a final concentration of 70%. The resulting precipitate was collected, washed with distilled water to remove salt, and concentrated using ultra filtration concentrator units. The rice bran residue was extracted with 60 mL of 2% NaCl to recover the globulin fraction (GbF). The residue after extraction of globulin was further extracted with 0.1 N NaOH to yield the glutelin fraction (GlF). Then the residue was extracted with 70% ethanol to obtain the prolamin fraction (PF). To further improve the yield of the protein fractions, each extraction step was repeated with 40 mL solution.

AF was dialyzed in water, while GbF and GlF were dialyzed in 50 mM ammonium bicarbonate buffer pH 7.8 for desalting. Then, they were concentrated using ultra filtration cartridges with a MWCO of 5000 Da. The concentrated protein fractions were freeze-dried and stored at −20 °C until use. Crude protein content was determined by Bradford’s method (Bradford, 1976).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รำข้าวไขมันมะลิ 105 ถูก defatted โดยแยกสองกับสามปริมาณโพลี รำข้าวสกัดไขมันถูก air-dried ค้างคืนในควัน พื้นดิน และแหลกลาญผ่านจอ 0.5 มม.สารฟีนอฟรีในรำสกัด โดยการเขย่าด้วยเอทานอล 80% แช่เย็น (defatted รำข้าว: แช่เย็น 80% เอทานอล 1:5) 30 นาที หลังจากหมุนเหวี่ยงที่ 3600 × g 15 นาที supernatant ถูกละทิ้ง และการสกัดซ้ำครั้งสองครั้ง (Adom และหลิว 2002) สารตกค้างไม่ air-dried ค้างคืนในควัน พื้นดิน และเก็บไว้ที่ −20 ° C จนถึงใช้RBP ถูกแบ่งตามวิธีของ Chanput et al. (2009) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย รำข้าวสกัดไขมัน (10 กรัม) ถูกแบ่ง โดยแยกด้วยน้ำกลั่นสำหรับ 60 นาทีแรก (รำข้าว: น้ำ 1:6 w/v), กรองผ่านผ้าไนล่อน (100 ตาข่าย) และเหวี่ยงที่ 10, 000 × g 30 นาทีที่อุณหภูมิ 20 ° C เพื่อขอเศษ albumin (AF) Supernatants ถูกพู และเพิ่มแอมโมเนียมซัลเฟตที่ความเข้มข้นสุดท้าย 70% ตะกอนเกิดการรวบรวม ล้าง ด้วยน้ำกลั่นเพื่อเอาเกลือ และเข้มข้นใช้หน่วยหัวกรองพิเศษ กากรำข้าวถูกสกัด ด้วย 60 มล. 2% NaCl ในการกู้คืนส่วนกลอบูลิน (GbF) ตกค้างหลังจากการถูกแยกสกัดกล ด้วย 0.1 N NaOH ให้ผลเศษ glutelin (GlF) แล้ว สารถูกสกัด ด้วยเอทานอล 70% รับเศษ prolamin (PF) เพื่อปรับปรุงผลผลิตของเศษโปรตีน แต่ละขั้นตอนการสกัดด้วย 40 มล.ซ้ำอีกครั้งAF เป็น dialyzed ในน้ำ ในขณะที่ GbF และ GlF ถูก dialyzed ใน 50 มม.แอมโมเนียมไบคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ pH 7.8 สำหรับกระบวนการกำจัด แล้ว พวกเขาก็เข้มข้นใช้ตลับกรองพิเศษ MWCO ดา 5000 เศษโปรตีนเข้มข้นชนิดแห้ง และเก็บไว้ที่ −20 ° C จนถึงใช้ มีกำหนดเนื้อหาโปรตีน โดยวิธีของแบรดฟอร์ด (แบรดฟอร์ด 1976)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ข้าวขาวดอกมะลิ 105 ไขมันเต็มรำข้าวโปรตีนโดยแยกเป็นครั้งที่สองกับสามเล่มของเฮกเซน รำสกัดเป็นอากาศแห้งค้างคืนในตู้ดูดควัน, พื้นดินและร่อนผ่านหน้าจอ 0.5 มม. สารประกอบฟีนอลฟรีในรำสกัดถูกสกัดโดยการเขย่าด้วย 80% แช่เย็นเอทานอล (รำสกัด: 80% เอทานอลแช่เย็น 1 : 5) เป็นเวลา 30 นาที หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 3600 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาที, สารละลายที่ถูกทิ้งและการสกัดซ้ำสองครั้ง (ตบแต่งและหลิว, 2002) ที่เหลือเป็นอากาศแห้งค้างคืนในควันเครื่องดูดควัน, พื้นดินและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน. RBP ถูก fractionated ตามวิธีการของ Chanput et al, (2009) กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย รำสกัด (10 กรัม) เป็นครั้งแรกที่ fractionated โดยแยกด้วยน้ำกลั่นเป็นเวลา 60 นาที (รำข้าว: น้ำ, 1: 6 w / v) กรองผ่านผ้าไนลอน (100 ตาข่าย) และหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาที ที่ 20 ° C จะได้รับส่วนโปรตีนชนิดนี้ (AF) supernatants ถูกรวบรวมและแอมโมเนียมซัลเฟตที่ถูกเพิ่มความเข้มข้นสุดท้ายของ 70% ตะกอนที่เกิดขึ้นถูกเก็บรวบรวม, การล้างด้วยน้ำกลั่นเพื่อเอาเกลือและเข้มข้นใช้หน่วยหัวกรองพิเศษ ที่เหลือรำข้าวถูกสกัดด้วย 60 มล NaCl 2% ในการกู้คืนส่วน globulin นี้ (GBF) ที่เหลือหลังจากการสกัดของผลไม้สกัดต่อไปด้วย 0.1 N NaOH ที่จะให้ผลผลิตส่วน glutelin นี้ (GLF) แล้วที่เหลือถูกสกัดด้วยเอทานอล 70% ที่จะได้รับส่วน prolamin นี้ (PF) เพื่อปรับปรุงผลผลิตของเศษส่วนโปรตีนในแต่ละขั้นตอนการสกัดซ้ำกับวิธีการแก้ปัญหา 40 มล. AF ถูก dialyzed ในน้ำขณะ GBF และ GLF ถูก dialyzed ในขนาด 50 มมแอมโมเนียมไบคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.8 สำหรับ desalting จากนั้นพวกเขามีความเข้มข้นโดยใช้ตลับกรองพิเศษที่มี MWCO 5000 ดา โดยเศษโปรตีนเข้มข้นถูกแห้งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน โปรตีนถูกกำหนดโดยวิธีการของ Bradford (แบรด, 1976)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ข้าวขาวดอกมะลิ 105 รำข้าวไขมันเต็มถูกสกัดโดยการแยกสองกับสามเล่มของเฮกเซน . ใช้รำข้าวเป็นคืนในตู้ดูดควัน อากาศแห้ง ดิน และ ผ่านจอขนาด 0.5 มม.ฟรีสารประกอบฟีนอลในรำข้าวสกัดเย็นโดยการเขย่าด้วย 80% เอทานอล ( รำข้าว : 80% แช่เย็นเอทานอล , 1 : 5 ) เป็นเวลา 30 นาที หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 3600 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาที นำทิ้ง และการสกัดซ้ำ 2 ครั้ง ( adom & หลิว , 2002 ) ตกค้างคืนในตู้ดูดควัน อากาศแห้ง ดิน และเก็บไว้ที่ 20 ° C −จนใช้ได้รับเป็นลำดับตามวิธีการของ chanput et al . ( 2009 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ในรำข้าว ( 10 กรัม ) เป็นลำดับแรก โดยสกัดด้วยน้ำกลั่นเป็นเวลา 60 นาที ( น้ำมันรำข้าว : น้ำ 1 : 6 W / V ) กรองผ่านผ้าไนล่อน ( 100 mesh ) และระดับที่ 10 × G สำหรับ 30 นาทีที่ 20 ° C เพื่อให้ได้อัลบูมินเศษส่วน ( AF ) การ supernatants ถูก pooled และแอมโมเนียมซัลเฟตที่ความเข้มข้นสุดท้ายเพิ่ม 70% เกิดตกตะกอน เก็บ ล้างด้วยน้ำกลั่นเพื่อเอาเกลือและเข้มข้นใช้กรองพิเศษหัวหน่วย ในน้ำมันรำข้าวสกัดมีตกค้าง 60 ml 2 โซเดียมคลอไรด์เพื่อกู้คืนส่วนที่ gbf ) กากหลังการสกัดที่ ลดลง 0.1 N NaOH ที่ให้ผลผลิตกลูเทลินเศษส่วน ( GLF ) แล้วที่เหลือถูกสกัดด้วยเอทานอล 70% ที่จะได้รับโพรลามินเศษส่วน ( PF ) เพื่อปรับปรุงผลผลิตของโปรตีนเศษส่วนแต่ละขั้นตอนการสกัดกัน 40 มิลลิลิตร สารละลายAF คือผ่านในน้ำ ในขณะที่กลุ่มที่ผ่านและอยู่ใน gbf 50 มิลลิเมตร แอมโมเนียมไบคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ pH 7.8 สำหรับ desalting . แล้วพวกเขามีความเข้มข้นที่ใช้ตลับกรองพิเศษกับ mwco 5000 ดา . เศษส่วนมีโปรตีนเข้มข้นแห้งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 ° C −จนใช้ ปริมาณโปรตีนหยาบถูกกำหนดโดยวิธีของแบรดฟอร์ด ( แบรดฟอร์ด , 1976 )