Population genetics analyses requir

Population genetics analyses require easy and nonbulky storage methods, and fast, inexpensive and reliable DNA extraction methodologies (Elphinstone et al. 2003; Mogg & Bond 2003). These requirements are fundamental for conservation genetics studies aiming to investigate DNA differences within and among populations by means of nondestructive techniques and without animal sacrifice. For these purposes, several methods have been reported to obtain DNA while avoiding animal injury. In terrestrial vertebrates, the most frequent source for DNA genotyping is peripheral blood, but its use in fish presents greater difficulties. In fact, it is difficult to perform a blood sampling on most fishes; therefore, large-size individuals, specialized staff and high sampling speed would be necessary to assure the samples’ survival. Recently, several DNA extraction procedures for fish samples have been published, using nondestructive specimens such as scales or fin clips (Whitmore et al. 1992; Yu & Orban 2001; Wasko et al. 2003). Although some of these sampling and extracting procedures are fast and relatively nondestructive, they require freezers to store samples, expensive and environmentally hazardous chemicals or commercial kits and specialized laboratory equipment. In this paper we describe a simple, cheap, nondestructive and rapid DNA sampling from fish body mucus and buccal cells from which good quality DNA from a large number of individuals can be obtained. Besides, samples are not bulky, do not require immediate processing, could be stored for years at room temperature (Smith & Burgoyne 2004) and are directly suitable for polymerase chain reaction (PCR). For DNA binding FTA Cards (Whatman) are employed, a commercially available product already tested on some wildlife species by Smith & Burgoyne (2004). These authors tested FTA Cards using blood, saliva and cheek swabs of fish, amphibians, birds and mammals, demonstrating that FTA could be an interesting tool in wildlife genetics. Saliva and buccal swabs are already used for human DNA extraction. A 7-month saliva storage was positively tested and up to 9 ng of DNA for each microlitre of saliva was obtained (Ng et al. 2004). Moreover, FTA Cards increase the DNA storage period when the medium contains residual substances, as in the case of human saliva of betel chewers (Salvador & DeUngria 2003).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พันธุศาสตร์เชิงประชากรวิเคราะห์ต้องใช้วิธีการจัดเก็บที่ง่าย และ nonbulky และรวดเร็ว ราคาไม่แพง และเชื่อถือได้ดีเอ็นเอแยกวิธีการ (Elphinstone et al. 2003 Mogg & พันธบัตร 2003) ข้อกำหนดเหล่านี้เป็นพื้นฐานของการตรวจสอบความแตกต่างของดีเอ็นเอภายใน และ ระหว่างกลุ่มประชากรโดย ใช้เทคนิคที่ไม่ทำลาย และไม่ มีการเสียสละสัตว์การศึกษาพันธุศาสตร์อนุรักษ์ สำหรับวัตถุประสงค์เหล่านี้ วิธีการต่าง ๆ มีการรายงานรับดีเอ็นเอขณะที่หลีกเลี่ยงสัตว์บาดเจ็บ ในสัตว์มีกระดูกสันหลังบก แหล่งบ่อยที่สุดสำหรับ genotyping ดีเอ็นเอเป็นเลือด แต่ใช้ในปลาแสดงความยากลำบากมากขึ้น ในความเป็นจริง มันยากที่จะทำการเก็บตัวอย่างเลือดปลามากที่สุด ดังนั้น บุคคลขนาดใหญ่ พนักงานพิเศษ และความเร็วในการสุ่มตัวอย่างสูงจะต้องมั่นใจรอดตัวอย่าง เมื่อเร็ว ๆ นี้ ขั้นตอนการสกัดดีเอ็นเอต่าง ๆ ตัวอย่างปลาถูกประกาศ ใช้ไม่ทำลายตัวอย่างเช่นเครื่องชั่งหรือหูคลิป (Whitmore et al. 1992 ยู & Orban 2001 Wasko et al. 2003) แม้ว่ากระบวนการเหล่านี้ตัวอย่าง และขยายบาง และไม่ทำลายค่อนข้างรวดเร็ว พวกเขาต้องแช่แข็งที่เก็บตัวอย่าง สารเคมีที่เป็นอันตรายต่อสิ่งแวดล้อม และมีราคาแพง หรือชุดพาณิชย์ และอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการเฉพาะ ในเอกสารนี้ เราอธิบายตัวอย่างรวดเร็ว และง่าย ราคาถูก ไม่ทำลายอย่างดีเอ็นเอจากเมือกปลาเนื้อและปากเซลล์ที่ดีเอ็นเอคุณภาพดีจากบุคคลจำนวนมากได้ ตัวอย่างไม่ใหญ่ ไม่จำเป็นต้องประมวลผลทันที สามารถจัดเก็บปีที่อุณหภูมิห้อง (Smith & Burgoyne 2004) และโดยตรงเหมาะสำหรับปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) นี้ สำหรับการผูกดีเอ็นเอจะจ้างบัตรเขตการค้าเสรี (Whatman) ผลิตภัณฑ์ใช้ในเชิงพาณิชย์แล้วทดสอบในบางสายพันธุ์ของสัตว์ป่าโดย Smith & Burgoyne (2004) เหล่านี้ผู้เขียนทดสอบบัตรเขตการค้าเสรีโดยใช้สวับเลือด น้ำลาย และแก้มของปลา สัตว์ นก และ สัตว์ ที่เห็นว่า เขตการค้าเสรีอาจจะเป็นเครื่องมือที่น่าสนใจในพันธุศาสตร์สัตว์ป่า น้ำลายและสวับปากแล้วใช้สำหรับสกัดดีเอ็นเอมนุษย์ เก็บน้ำลาย 7 เดือนได้ผ่านการทดสอบในเชิงบวก และสูงสุด 9 ฉบับของดีเอ็นเอสำหรับแต่ละ microlitre น้ำลายมา (Ng et al. 2004) นอกจากนี้ บัตรเขตการค้าเสรีเพิ่มรอบระยะเวลาการเก็บดีเอ็นเอที่เมื่อสื่อประกอบด้วยสารตกค้าง เช่นในกรณีของน้ำลายมนุษย์ของหมาก chewers (ซัลวาดอร์และ DeUngria 2003)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พันธุศาสตร์ประชากรวิเคราะห์ต้องมีวิธีการเก็บรักษาง่ายและ nonbulky และรวดเร็วราคาไม่แพงและมีความน่าเชื่อถือวิธีการสกัดดีเอ็นเอ (Elphinstone et al, 2003. คค์ & Bond 2003) ความต้องการเหล่านี้เป็นพื้นฐานสำหรับการศึกษาพันธุศาสตร์อนุรักษ์วัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบความแตกต่างของดีเอ็นเอภายในและระหว่างประชากรโดยวิธีการของเทคนิคการทำลายและไม่มีสัตว์บูชายัญ เพื่อวัตถุประสงค์เหล่านี้หลายวิธีที่ได้รับรายงานที่จะได้รับดีเอ็นเอขณะที่หลีกเลี่ยงการบาดเจ็บสัตว์ ในสัตว์มีกระดูกสันหลังบก, แหล่งที่พบบ่อยที่สุดสำหรับ genotyping ดีเอ็นเอเป็นเลือด แต่การใช้งานในปลาที่มีการจัดความยากลำบากมากขึ้น ในความเป็นจริงมันเป็นเรื่องยากที่จะดำเนินการเจาะเลือดปลามากที่สุด; ดังนั้นบุคคลขนาดใหญ่, พนักงานผู้เชี่ยวชาญและความเร็วในการสุ่มตัวอย่างสูงจำเป็นจะต้องมีความมั่นใจในการอยู่รอดของกลุ่มตัวอย่าง เมื่อเร็ว ๆ นี้ขั้นตอนการสกัดดีเอ็นเอหลายตัวอย่างปลาที่ได้รับการตีพิมพ์โดยใช้ตัวอย่างโดยไม่ทำลายเช่นเครื่องชั่งน้ำหนักหรือคลิปครีบ (Whitmore et al, 1992. Yu & ออร์ 2001 Wasko et al, 2003). แม้ว่าบางส่วนของขั้นตอนการสุ่มตัวอย่างและการสกัดเหล่านี้เป็นไปอย่างรวดเร็วและค่อนข้างไม่ทำลายพวกเขาจำเป็นต้องมีตู้แช่แข็งเพื่อเก็บตัวอย่างสารเคมีราคาแพงและเป็นอันตรายต่อสิ่งแวดล้อมหรือชุดในเชิงพาณิชย์และอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการเฉพาะ ในบทความนี้เราอธิบายง่ายราคาถูกทำลายอย่างรวดเร็วและการสุ่มตัวอย่างดีเอ็นเอจากเมือกปลาร่างกายและเซลล์ปากซึ่งดีเอ็นเอที่มีคุณภาพดีจากประชาชนจำนวนมากที่สามารถรับได้ นอกจากนี้กลุ่มตัวอย่างยังไม่ได้ขนาดใหญ่ไม่จำเป็นต้องมีการประมวลผลในทันทีอาจจะเก็บไว้เป็นเวลาหลายปีที่อุณหภูมิห้อง (สมิ ธ แอนด์ Burgoyne 2004) และได้โดยตรงเหมาะสำหรับวิธี Polymerase chain reaction (PCR) ดีเอ็นเอผูกพันเขตการค้าเสรีการ์ด (Whatman) มีการจ้างงานเป็นผลิตภัณฑ์เชิงพาณิชย์ที่มีการทดสอบแล้วในบางสายพันธุ์สัตว์ป่าโดยสมิ ธ แอนด์ Burgoyne (2004) ผู้เขียนเหล่านี้ผ่านการทดสอบโดยใช้บัตรเอฟทีเอในเลือดน้ำลายและแก้ม swabs ของปลาสัตว์ครึ่งบกครึ่งนกและสัตว์เลี้ยงลูกด้วยแสดงให้เห็นว่าเอฟทีเออาจจะเป็นเครื่องมือที่น่าสนใจทางพันธุศาสตร์สัตว์ป่า น้ำลายและแก้ม swabs ที่ใช้แล้วสำหรับการสกัดดีเอ็นเอของมนุษย์ การจัดเก็บน้ำลาย 7 เดือนได้รับการทดสอบในเชิงบวกและถึง 9 NG ของดีเอ็นเอไมโครลิตรของน้ำลายแต่ละที่ได้รับ (Ng et al. 2004) นอกจากนี้เอฟทีเอการ์ดเพิ่มระยะเวลาการเก็บดีเอ็นเอเมื่อกลางมีสารตกค้างเช่นในกรณีของน้ำลายของมนุษย์ chewers พลู (ซัลวาดอและ DeUngria 2003)