and raised in a greenhouse at the University of KwaZulu-Natal Botanical
Gardens, Pietermaritzburg, South Africa. Different explants (shoot-tip,
young leaf, petiole of young leaf and stem-cuttings) were collected in
a beaker and washed under running tap water for 2 min followed by
distilled water containing a few drops of liquid soap (Sunlight™).
Explants were surface decontaminated by soaking them in 70% ethanol
for 2 min followed by a 3.5% (m/v) NaOCl solution containing a few
drops of Tween 20 for 5 min. The explants were subsequently rinsed
four times with sterile distilled water. The surface decontaminated
explants were inoculated on full strength Murashige and Skoog (MS)
medium (Murashige and Skoog, 1962) containing 30 g l−1 sucrose
and 0.1 g l−1 myo-inositol with BA (0, 2.5, 5.0, 7.5, and 10.0 μM). The
pH of themedia were adjusted to 5.8with HCl or KOH before solidifying
with 8 g l−1 agar (Bacteriological agar—Oxoid Ltd., Basingstoke, Hampshire,
England) and autoclaving at 121 °C and 103 kPa for 20 min. Decontamination
frequency and shoot regeneration rate were recorded
after 8 weeks of culture. The use of shoot-tips as explants was selected
based on preliminary findings. Plant material was subsequently bulked
up by culturing shoot-tips on MS medium supplemented with 2.5 μM
BA and 0.54 μM α-naphthalene acetic acid (NAA). Cultures were
grown under constant light provided by cool white fluorescent tubes
(30 μmol m−2 s−1 photosynthetic photon flux) at 25 ± 2 °C.
และเลี้ยงในเรือนกระจกที่มหาวิทยาลัยแห่งควาซูลูนาตาลพฤกษศาสตร์
สวน Pietermaritzburg , แอฟริกาใต้ อาหารที่แตกต่างกัน ( ยิงปลาย
ใบอ่อน ก้านใบของใบอ่อนและก้าน , กิ่ง ) เก็บตัว
บีกเกอร์ และล้างภายใต้น้ำสำหรับ 2 นาทีวิ่งตาม
น้ำกลั่นที่มีไม่กี่หยดของสบู่เหลว ( แสงแดด
™ )เป็นอาหารผิว decontaminated โดยการแช่ไว้ใน 70% เอทานอล
2 นาที ตามด้วย 3.5% ( M / V ) ไม่ระบุโซลูชั่นที่มีไม่กี่หยด Tween 20
5 นาที เลี้ยง จัดการล้าง
4 ครั้งกับการเป็นหมัน น้ำกลั่น พื้นผิว decontaminated
อาหารปลูกเชื้อบนอาหารสูตร Murashige และ Skoog ( MS ) เต็มแรงปานกลาง อาหารสูตร Murashige and Skoog (
,1962 ) ที่มี 30 g L − 1 ซูโครส
และ 0.1 g L − 1 เมียวอลกับ BA ความเข้มข้น 0 , 2.5 , 5.0 , 7.5 และ 10.0 μ M )
pH ของการปรับข้อมูลให้ 5.8with HCl หรือเกาะก่อนที่จะแข็งตัว L − 1
8 G ( แบคทีเรียวุ้น oxoid จำกัด Basingstoke , Hampshire ,
อังกฤษ ) และอัตราส่วนโฟกัสที่ 121 ° C และ 103 กิโลปาสคาลสำหรับ 20 นาทีและอัตราความถี่ในการยิง
ถูกบันทึกหลังจาก 8 สัปดาห์ของวัฒนธรรม ใช้ยิงเคล็ดลับอาหารถูกเลือก
ตามผลวิเคราะห์เบื้องต้น . วัสดุโรงงานและยก
ขึ้นโดยการเพาะเลี้ยงปลายยอดบนอาหารสูตร MS ที่เติม BA 2.5 μ M
M หรือμแนพทาลีน กรดแอลฟา ( NAA ) วัฒนธรรมที่ถูกปลูกภายใต้แสงให้คงที่
เย็นสีขาวเรืองแสง หลอด( 30 μ m mol − 2 s − 1 แสงโฟตอนฟลักซ์ ) ที่ 25 ± 2 องศา
การแปล กรุณารอสักครู่..