2.3. Analysis of plasma osmolality

2.3. Analysis of plasma osmolality and cortisol level
The plasma osmolality was measured using a vapor pressure
osmometer (Wescor 5520, Logan, UT). The plasma osmolality values
of the FW and SW fish during the salinity stress are expressed
as mOsm/kg.
The plasma cortisol levels were analyzed by an enzyme immunoassay.
Blood was collected into 2-ml eppendorf tubes from the
caudal vessel of the FW and SW groups (n = 10) using a 1-ml plastic
syringe. Plasma was obtained by centrifugation at 10,000g for
5 min at 4 C, and the supernatant was frozen at 20 C until further
use. Cortisol was measured using the Cortisol EIA kit (Cayman
Chemical, Ann Arbor, MI). Prior to the application, a preliminary
test was performed to purify the plasma. The plasma samples
(200 ll) were extracted with 3 ml of diethyl ether. After the extraction,
the supernatant was kept at 40 C in a water bath for evaporation
and then stored at 20 C until further analysis. The extracts
of cortisol were re-suspended with 500 ll of EIA buffer (kit provided)
for the assay. Standards were prepared according to the
manufacturer’s instructions. To validate the cortisol assay, a parallelism
between the standard curve and a serial dilution of the extracted
solution was established. The plasma cortisol levels were
expressed as ng/ml.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การวิเคราะห์ระดับ cortisol และ osmolality ของพลาสม่าOsmolality พลาสมาถูกวัดโดยใช้ความดันไอน้ำosmometer (Wescor 5520 โล UT) ค่า osmolality พลาสม่ากำลังแสดงปลาในระหว่างความเครียดเค็ม FW และ SWเป็น mOsm/kgระดับ cortisol พลาสมาถูกวิเคราะห์ โดย immunoassay มีเอนไซม์รวบรวมไว้ในหลอด 2 มล. eppendorf จากเลือดเรือ caudal กลุ่ม FW และ SW (n = 10) ใช้พลาสติก 1 mlเข็ม พลาสม่ากล่าว โดย centrifugation ที่ 10000 g สำหรับ5 นาทีที่ 4 C, supernatant ถูกแช่แข็งที่ 20 C เป็นต้นไปใช้ Cortisol ถูกวัดโดยใช้ชุด Cortisol EIA (เคย์เคมี Ann Arbor, MI) แอพลิเคชัน การเบื้องต้นก่อนการทดสอบที่ดำเนินการต้องทำสม่า ตัวอย่างพลาสม่า(200 จะ) ถูกสกัด ด้วย 3 ml ของอีเทอร์ diethyl หลังจากสกัดsupernatant ถูกเก็บไว้ที่ 40 C ในห้องน้ำการระเหยแล้ว เก็บไว้ที่ 20 C จนถึงการวิเคราะห์ต่อไป สารสกัดจากใบของ cortisol ที่ใหม่ชั่วคราวกับ 500 จะบัฟเฟอร์ EIA (จัดชุด)สำหรับการวิเคราะห์ มีเตรียมมาตรฐานตามคำแนะนำของผู้ผลิต การตรวจสอบวิเคราะห์ cortisol, parallelism การระหว่างเส้นโค้งมาตรฐานและเจือจางประจำของการแยกโซลูชั่นก่อตั้งขึ้น ระดับ cortisol พลาสมาได้แสดงเป็น ng/ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การวิเคราะห์ osmolality พลาสมาและระดับคอร์ติซอ
osmolality พลาสม่าได้รับการวัดโดยใช้ความดันไอ
Osmometer (Wescor 5520, โลแกน, ยูทาห์) ค่า osmolality พลาสม่า
ของ FW SW และปลาระหว่างความเครียดความเค็มจะแสดง
เป็น mOsm / กก.
ระดับ cortisol พลาสม่าวิเคราะห์ immunoassay เอนไซม์.
เลือดถูกเก็บรวบรวมเป็น 2 มิลลิลิตรหลอด Eppendorf จาก
เรือหางของ FW และ SW กลุ่ม (n = 10) โดยใช้พลาสติก 1 มล.
เข็มฉีดยา พลาสม่าที่ได้รับจากการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000g สำหรับ
5 นาทีที่ 4 C และใสถูกแช่แข็งที่ 20 C จนกระทั่งต่อ
การใช้งาน Cortisol ถูกวัดโดยใช้ชุดคอร์ติซอประเมินผลกระทบสิ่งแวดล้อม (เคย์แมน
เคมี Ann Arbor, MI) ก่อนที่จะมีการประยุกต์ใช้เบื้องต้น
ได้ดำเนินการทดสอบในการชำระล้างพลาสม่า ตัวอย่างพลาสมา
(200 LL) ถูกสกัดด้วย 3 มิลลิลิตรอีเทอร์ หลังจากสกัด
ใสถูกเก็บไว้ที่ 40 C ในอ่างน้ำระเหย
แล้วเก็บไว้ที่ 20 องศาเซลเซียสจนการวิเคราะห์ต่อไป สารสกัด
ของคอร์ติซออีกครั้งระงับ 500 LL ของ buffer ประเมินผลกระทบสิ่งแวดล้อม (ชุดให้)
สำหรับการทดสอบ มาตรฐานที่ถูกจัดทำขึ้นตาม
คำแนะนำของผู้ผลิต ในการตรวจสอบการทดสอบคอร์ติซอขนาน
ระหว่างเส้นโค้งมาตรฐานและเจือจางอนุกรมของการสกัด
การแก้ปัญหาเป็นที่ยอมรับ ระดับ cortisol พลาสม่าถูก
แสดงเป็น ng / ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การวิเคราะห์ค่าออสโมลาลิตี้และระดับ cortisol พลาสม่าพลาสม่าคือวัดค่าออสโมลาลิตี้

ใช้ความดันไอออสโมมิเตอร์ ( wescor 5520 , โลแกน , ยูทาห์ ) พลาสมาค่าออสโมลาลิตี้ค่า
ของ FW และ SW ปลาในช่วงความเค็มความเครียดแสดง
เป็น mOsm / kg .
พลาสมา ระดับฮอร์โมน โดยใช้เอนไซม์ทาง .
เลือดเก็บลงในท่อจาก
2-ml เพนดอร์ฟหางเรือของ FW และ SW กลุ่ม ( N = 10 ) ใช้ 1-ml พลาสติก
ฉีดยา พลาสมาได้โดยการเหวี่ยงแยกที่ 10000g สำหรับนาทีที่ 4
5 C และนำแช่แข็งที่ 20 C จนกระทั่งใช้ต่อไป

การวัดระดับคอร์ติซอล EIA Kit ( Cayman
เคมี , Ann Arbor , Mi ) ก่อนที่ใบสมัครการทดสอบเบื้องต้น
กระทำให้บริสุทธิ์ พลาสมา
ตัวอย่างพลาสมา( 200 จะถูกสกัดด้วยอีเทอร์ 3 ml . หลังจากการสกัด
น่านถูกเก็บไว้ที่ 40 องศาเซลเซียสในน้ำอาบเพื่อการระเหย
แล้วเก็บไว้ที่ 20 C จนถึงการวิเคราะห์ต่อไป สารสกัด
ของ cortisol เป็นอีกครั้งกับ 500 จะถูกระงับหรือบัฟเฟอร์ ( ชุดให้ )
สำหรับการทดสอบ มาตรฐานที่ถูกเตรียมไว้ตามคำสั่ง
ของผู้ผลิต เพื่อตรวจสอบว่าระดับคอร์ติซอล ,แบบขนาน
ระหว่างเส้นโค้งมาตรฐาน และอุทิศถวายของสารละลายสกัด
ตั้งขึ้น ระดับ cortisol พลาสม่าถูก
แสดงเป็นนาโนกรัมต่อมิลลิลิตร