2.7. Wire myography
Vascular reactivity experiments were conducted in HEPES-buffered phosphate saline solution (HEPES-PSS); containing 142 (in mmol/L) NaCl, 4.7 KCl, 1.17 MgSO4, 1.56 CaCl2, 1.18 K2PO4, 10 HEPES and 5.5 glucose, pH of the buffer was adjusted to 7.4. Stock solution of L-phenylephrine hydrochloride (PE) (Sigma Aldrich, Oakville, ON, Canada) was prepared in distilled water at concentrations of 10−7–10−4 mol/L.
Following animal sacrifice, the distal part of the small intestine and its associated vascular arcade was quickly removed through a midline laparotomy and transferred into a silicone coated petri-plate containing ice-cold HEPES-PSS. Small mesenteric arteries (
2.7 ลวด myography
หลอดเลือดทดลองการเกิดปฏิกิริยาได้ดำเนินการใน HEPES บัฟเฟอร์แก้ปัญหาฟอสเฟตน้ำเกลือ (HEPES-PSS); มี 142 (ในมิลลิโมล / ลิตร) โซเดียมคลอไรด์ 4.7 KCl, 1.17 MgSO4, 1.56 CaCl2 1.18 K2PO4 10 HEPES และ 5.5 ของกลูโคส pH ของบัฟเฟอร์ปรับ 7.4 วิธีการแก้ปัญหาสต็อกของ L-phenylephrine ไฮโดรคลอไร (PE) (ซิกม่าดิช Oakville, ON, Canada) ถูกจัดทำขึ้นในน้ำกลั่นที่ระดับความเข้มข้นของ 10-7-10-4 โมล / ลิตร.
หลังจากเสียสละสัตว์ส่วนปลายของลำไส้เล็ก และอาเขตหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องจะถูกลบออกได้อย่างรวดเร็วผ่าน laparotomy กึ่งและโอนเข้ามาในซิลิโคนเคลือบ Petri แผ่นมีเย็น HEPES-PSS หลอดเลือดแดง mesenteric ขนาดเล็ก (<250 ไมโครเมตรและมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง ~2 มิลลิเมตรยาว) สกัด หลอดเลือดแดงได้รับการทำความสะอาดทุกรอบไขมันและเกี่ยวพันเนื้อเยื่อและติดตั้งอยู่บนสอง 25 ไมครอนสายไฟทังสเตน ( บริษัท ลวดวิจิตร, ชายหาดโกรเวอร์, California, USA) และติดตั้งอยู่บนลวด myograph (Kent วิทยาศาสตร์ทอร์ตสหรัฐอเมริกา) ระบบจะอนุญาตให้ บันทึกความตึงเครียดมีมิติเท่ากัน หลังจากติดตั้งเรือได้รับอนุญาตให้มีเสถียรภาพเป็นเวลา 30 นาทีใน HEPES-PSS บัฟเฟอร์ภายใต้ศูนย์ความตึงเครียด หลังจากการรักษาเสถียรภาพยืด preconditioning ได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบความตึงเครียดที่เหมาะสมและจากนั้นเรือได้รับอนุญาตให้มีเสถียรภาพใน HEPES-PSS บัฟเฟอร์อีก 10 นาที หลังจากการรักษาเสถียรภาพเรือที่ถูกตั้งไว้ที่ความตึงเครียดที่ดีที่สุดของพวกเขาและเส้นโค้งการตอบสนองต่อความเข้มข้นของความเข้มข้นสะสมของ PE ถูกสร้างขึ้น ในตอนท้ายของการทดลองเรือได้สัมผัสกับ K + สูงเพื่อยืนยันว่าพวกเขายังคงทำงานได้
การแปล กรุณารอสักครู่..
