2.5 Kill-Time StudyA kill time stud

2.5 Kill-Time Study
A kill time study was carried out with the MIC values found previously in the microplate bioassay, using a
modification of the viable cells count method of Souza et al. (2006). Double strength TSB broth (5 ml) was
inoculated with overnight suspension of bacterial culture to approximately 106 CFU ml-1. Equal volumes of the
extracts (5 ml), with concentrations adjusted to obtain final concentrations similar to the MICs previously
determined, were added to the tubes and mixed using a vortex for 30 s. All tubes were incubated under optimal
conditions for each microorganism. At different time intervals (0, 1, 2, 4, 6, 18 and 24 h) of exposure, 0.1 ml of
the suspension was serially diluted up to 10-7 in sterile (0.1% w/v) peptone water (Oxoid, Basingstoke, UK) and
0.1 ml aliquots spread in duplicate on separate TSA plates (Oxoid, Basingstoke, UK) which were incubated for
24 h. The mean numbers of colonies were counted and compared with that of the control where extracts were
replaced with sterile distilled water with addition of 5 % DMSO where appropriate. The experiments were
replicated three times on different occasions with duplicate samples analyzed per replicate and the results were
expressed in log CFU ml-1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การศึกษาฆ่าเวลาการศึกษาเวลาฆ่าได้ดำเนินการกับไมโครโฟนค่าพบก่อนหน้านี้ใน microplate bioassay ใช้เป็นเปลี่ยนแปลงของเซลล์ทำงานได้นับจำนวนวิธีของอซู et al. (2006) มีความแข็งแรงคู่ซุป TSB (5 มล.)inoculated กับคืนระงับแบคทีเรียวัฒนธรรมประมาณ 106 CFU ml-1 เท่ากับปริมาณของการเข้มข้นสารสกัดจาก (5 มิลลิลิตร), ปรับความเข้มข้นสุดท้ายคล้ายกับไมค์ที่รับก่อนหน้านี้กำหนด ถูกเพิ่มลงในหลอด และผสมโดยใช้ vortex ที่ 30 s หลอดทั้งหมดได้รับการกกใต้ที่ดีที่สุดเงื่อนไขสำหรับจุลินทรีย์แต่ละ ในช่วงเวลาที่แตกต่างกัน (0, 1, 2, 4, 6, 18 และ 24 h) แสง 0.1 mlระบบกันสะเทือนถูกเจือจาง serially ขึ้นไป 10-7 ใน (0.1% w/v) peptone น้ำหมัน (Oxoid, Basingstoke, UK) และ0.1 มล. aliquots แพร่กระจายในซ้ำบนแยก TSA แผ่น (Oxoid, Basingstoke, UK) ซึ่งได้รับการกก24 ชม ตัวเลขเฉลี่ยของอาณานิคมถูกนับ และเปรียบเทียบกับของตัวควบคุมที่มีสารสกัดจากแทนที่ ด้วยน้ำกลั่นที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วยนอกเหนือจาก 5% DMSO ที่เหมาะสม มีการทดลองจำลองได้สามครั้งในโอกาสต่าง ๆ ตัวอย่างซ้ำวิเคราะห์ต่อการจำลองแบบและผลการแสดงในบันทึก CFU ml-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ฆ่าเวลาการศึกษา
การศึกษาฆ่าเวลาได้ดำเนินการที่มีค่า MIC ที่พบก่อนหน้านี้ในไมโครทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพที่ใช้
เปลี่ยนแปลงของเซลล์ที่มีชีวิตนับวิธีการ Souza, et al (2006) ความแข็งแรง TSB ดับเบิลน้ำซุป (5 มล.) ได้รับ
เชื้อด้วยการระงับในชั่วข้ามคืนของวัฒนธรรมแบคทีเรียประมาณ 106 CFU ML-1 ปริมาณที่เท่ากันของ
สารสกัด (5 มล.) ที่มีความเข้มข้นปรับเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายคล้ายกับ MICs ก่อน
กำหนดถูกเพิ่มเข้าไปในท่อและผสมโดยใช้น้ำวนเป็นเวลา 30 วินาที หลอดทั้งหมดถูกบ่มภายใต้ที่ดีที่สุด
เงื่อนไขสำหรับแต่ละจุลินทรีย์ ในช่วงเวลาที่แตกต่างกันเวลา (0, 1, 2, 4, 6, 18 และ 24 ชั่วโมง) จากการสัมผัส 0.1 มิลลิลิตร
ระงับถูกเจือจางลำดับถึง 10-7 ในการฆ่าเชื้อ (0.1% w / v) น้ำเปปโตน (Oxoid, เบซิงสหราชอาณาจักร) และ
0.1 มล. aliquots แพร่กระจายในที่ซ้ำกันบนแผ่นแยกต่างหาก TSA (Oxoid เบซิงสหราชอาณาจักร) ซึ่งได้รับการบ่มเป็นเวลา
24 ชั่วโมง ตัวเลขเฉลี่ยของอาณานิคมนับและเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่สารสกัดถูก
แทนที่ด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อด้วยนอกเหนือจาก 5% DMSO ที่เหมาะสม การทดลอง
จำลองแบบสามครั้งในโอกาสที่แตกต่างกันกับกลุ่มตัวอย่างที่ซ้ำกันวิเคราะห์ต่อซ้ำและผลลัพธ์ที่ได้
แสดงใน log CFU ML-1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 ฆ่าการศึกษาเวลาเป็นการฆ่าเวลา ศึกษาด้วยค่า MIC พบก่อนหน้านี้ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยสามารถใช้เป็นวิธีนับของ ซูซา et al ปรับเปลี่ยนเซลล์ที่ทำงานได้ ( 2006 ) คู่แรง TSB broth ( 5 ml )ใส่ช่วงล่างข้ามคืนของแบคทีเรียประมาณ 106 cfu แน่นอน . ปริมาณที่เท่าเทียมกันของสารสกัด ( 5 ml ) ที่มีความเข้มข้นปรับเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายคล้ายกับไมโครโฟน ก่อนหน้านี้กำหนด , มีการเพิ่มหลอดผสมใช้ Vortex สำหรับ 30 วินาทีทุกท่อ คือ บ่มได้ที่เหมาะสมเงื่อนไขสำหรับแต่ละจุลินทรีย์ ในช่วงเวลาที่ต่างกัน ( 0 , 1 , 2 , 4 , 6 , 18 และ 24 ชั่วโมง ) ของแสง , 0.1 มิลลิลิตรระงับได้เป็นจำนวนถึง 10-7 ในเป็นหมัน ( 0.1 % w / v ) เปปโตนน้ำ ( oxoid Basingstoke , สหราชอาณาจักร , และ0.1 ml เฉยๆกระจายซ้ำบนแผ่นแยกจากกัน ( oxoid Basingstoke , TSA , UK ) ซึ่งเป็นเชื้อสำหรับ24 ชั่วโมง หมายถึงตัวเลขของอาณานิคมได้ถูกนับและเปรียบเทียบกับของที่ถูกควบคุมจากแทนที่ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อด้วยการเพิ่ม 5% DMSO ที่เหมาะสม การทดลองจำนวนครั้งที่ 3 ในโอกาสที่แตกต่างกัน มีตัวอย่างที่ซ้ำกันซ้ำและผลวิเคราะห์ต่อแสดงออกในแน่นอน CFU เข้าสู่ระบบ