2.8. In vivo trails
In vivo studies were carried out following two distinct
procedures.
2.8.1. Direct application of antagonists
Experiments were performed statistically as a completely
randomized design (CRD) with 10 replicates for each treatment.
After surface disinfestation (Zhou et al., 2001; He et al., 2003) of
fruit, wounding of fruit to the depth of 1 mm was performed with a
sterile needle upon which appropriate disk plugs were placed as
follows. For each isolate of Actinomycetes, four treatments were
designated: (A) 10 wounded apple fruit were treated with plain
disks of CGA medium, (B) 10 wounded apple fruit were inoculated
with 6 mm disks of well-grown culture of Actinomycete isolate on
wounded areas, (C) 10 wounded apple fruit were inoculate with
6 mm disks of well-grown culture of C. gloeosporioides, (D) 10 fruit
were inoculate with 6 mm disks of well-grown cultures (possessing
abundant conidia) of both antagonist and the pathogen,
consecutively. Inoculation of the antagonist and pathogen was
performed as follows: (1) All apple fruit were aseptically needlewounded
as described above, (2) 6 mm plugs of antagonist or
pathogen were placed on wounds and incubated for 12 h, (3) after
this period, disks in treatment 4 were removed and replaced with
6 mm disks of well-grown culture of C. gloeosporioides (possessing
abundant conidia). Replacements in treatment 1 were done with
plain agar disks and in treatment 2 with Actinomycete plugs. All
treatments were kept for an additional 12 h under sealed
incubation, (4) after this period, all disk plugs were removed from
all treated samples, (5) All treatments were packed in new,
separate, sealed, plastic bags and incubated at 28 C up to 16 days,
(6) Progress of the disease was monitored at 4 days intervals up to
the 16th day by measuring the diameter of rotten areas for
statistical analysis.
2.8 . ในเส้นทาง วีโวการศึกษาในสัตว์ทดลองต่อไปนี้สองแตกต่างกันขั้นตอนที่2.8.1 . การใช้โดยตรงของปฏิปักษ์ทดลองอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เป็น สมบูรณ์Randomized Design ( CRD ) กับ 10 นาทีสำหรับการรักษาแต่ละหลังจาก disinfestation พื้นผิว ( โจว et al . , 2001 ; เขา et al . , 2003 ) ของผลไม้ , กระทบกระทั่งของผลไม้เพื่อความลึกของ 1 มิลลิเมตร แสดงด้วยการฆ่าเชื้อเข็มบนดิสก์ที่เหมาะสมอยู่ที่ปลั๊กดังนี้ สำหรับแต่ละแยกด้วยกัน 4 พื้นที่ คือเขต : ( ) 10 บาดเจ็บผลไม้แอปเปิ้ลได้รับการรักษากับธรรมดาดิสก์ของ CGA ขนาดกลาง ( B ) 10 บาดเจ็บแอปเปิ้ลผลไม้ปลูกเชื้อกับ 6 มิลลิเมตร ดิสก์ ของวัฒนธรรมของแอคติโนมัยซีทแยกบนโตพื้นที่ได้รับบาดเจ็บ , ( C ) 10 บาดเจ็บแอปเปิ้ลผลไม้ถูกปลูกฝีด้วย6 mm ดิสก์โตดีวัฒนธรรมของ C . gloeosporioides , ( D ) 10 ผลถูกปลูกฝีด้วย 6 มม. ดิสก์โตดี ( มีวัฒนธรรมโคนิมากมาย ) ทั้งปฏิปักษ์และเชื้อโรค4.4 การฉีดวัคซีนของเชื้อโรคและเป็นปฏิปักษ์ดำเนินการดังนี้ ( 1 ) มี aseptically needlewounded แอปเปิ้ลผลไม้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ( 2 ) 6 มม. ปลั๊กของคู่ต่อสู้ หรือเชื้อโรคถูกวางไว้บนบาดแผลและบ่มเป็นเวลา 12 ชั่วโมง ( 3 ) หลังจากช่วงเวลานี้ , ดิสก์ในการรักษา 4 ถูกถอดออกและแทนที่ด้วย6 มิลลิเมตร ดิสก์ ของวัฒนธรรมของ C . gloeosporioides ได้ดีขึ้น ( ที่มีโคนิมากมาย ) แทนที่ในทรีทเมนต์ที่ 1 เสร็จวุ้นแผ่นธรรมดาและในการรักษา 2 กับแอคติโนมัยซีทปลั๊ก ทั้งหมดการรักษาเก็บเพิ่มอีก 12 ชั่วโมง ภายใต้ผนึกระยะเวลา ( 4 ) หลังจากช่วงเวลานี้ดิสก์ทั้งหมดถูกถอดออกจากปลั๊กทั้งหมดปฏิบัติ ตัวอย่าง ( 5 ) การรักษาทั้งหมดถูกบรรจุในใหม่แยก , ปิดผนึก , ถุงพลาสติกและบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียส ถึง 16 วัน( 6 ) ความก้าวหน้าของโรคได้ตรวจสอบใน 4 วัน ช่วงขึ้น16 วัน โดยการวัดเส้นผ่านศูนย์กลางของพื้นที่เน่าสำหรับสถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูล
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)