Recent studies have suggested the p

Recent studies have suggested the potential of probiotic organisms to be adapted for the synthesis and delivery of oral therapeutics. The probiotic yeast Saccharomyces boulardii would be especially well suited for this purpose due to its ability, in contrast to probiotic prokaryotes, to perform eukaryotic post translational modifications. This probiotic yeast thus has the potential to express a broad array of therapeutic proteins. Currently, however, use of wild type (WT) S. boulardii relies on antibiotic resistance for the selection of transformed yeast. Here we report the creation of auxotrophic mutant strains of S. boulardii that can be selected without antibiotics and demonstrate that these yeast can express functional recombinant protein even when recovered from gastrointestinal immune tissues in mice. A UV mutagenesis approach was employed to generate three uracil auxotrophic S. boulardii mutants that show a low rate of reversion to wild type growth. These mutants can express recombinant protein and are resistant in vitro to low pH, bile acid salts, and anaerobic conditions. Critically, oral gavage experiments using C57BL/6 mice demonstrate that mutant S. boulardii survive and are taken up into gastrointestinal immune tissues on a similar level as WT S. boulardii. Mutant yeast recovered from gastrointestinal immune tissues furthermore retain expression of functional recombinant protein. These data show that auxotrophic mutant S. boulardii can safely express recombinant protein without antibiotic selection and

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การศึกษาล่าสุดได้แนะนำศักยภาพของสิ่งมีชีวิตโปรไบโอติกส์การปรับสำหรับการสังเคราะห์และส่ง therapeutics ปาก โปรไบโอติกส์ยีสต์ Saccharomyces boulardii จะเป็นเหมาะสำหรับวัตถุประสงค์นี้เนื่องจากความสามารถใน ตรงข้ามโปรไบโอติกส์ prokaryotes การแก้ไข translational eukaryotic ลงอย่างเช่น ยีสต์โปรไบโอติกส์นี้จึงมีศักยภาพในการแสดงหลากหลายโปรตีนบำบัดกว้าง ปัจจุบัน อย่างไรก็ตาม ใช้ของชนิดป่า (WT) S. boulardii อาศัยความต้านทานยาปฏิชีวนะสำหรับการเลือกแปรรูปยีสต์ ที่นี่เราสามารถรายงานการสร้างสายพันธุ์กลายพันธุ์ auxotrophic ของ S. boulardii ซึ่งสามารถเลือกได้ โดยยาปฏิชีวนะ และแสดงว่า ยีสต์เหล่านี้สามารถแสดงหน้าที่ recombinant โปรตีนแม้ว่ากู้จากระบบเนื้อเยื่อที่ภูมิคุ้มกันในหนู วิธี mutagenesis UV ถูกจ้างเพื่อสร้างสาม uracil auxotrophic S. boulardii สายพันธุ์ที่แสดงอัตรา reversion ให้ป่าชนิดเจริญเติบโตต่ำ สายพันธุ์เหล่านี้สามารถแสดง recombinant โปรตีนค่า pH ในหลอดไปน้อยจะทน เกลือของกรดน้ำดี และเงื่อนไขไม่ใช้ออกซิเจน เหลือ gavage ปากทดลองโดยใช้หนู C57BL/6 สาธิตที่กลายพันธุ์ S. boulardii อยู่รอด และถูกนำขึ้นในระบบเนื้อเยื่อที่ภูมิคุ้มกันในระดับคล้ายเป็น WT S. boulardii นอกจากนี้ยีสต์กลายพันธุ์จากเนื้อเยื่อที่ภูมิคุ้มกันระบบการกู้คืนเก็บไว้ของ recombinant โปรตีนทำงาน ข้อมูลเหล่านี้แสดงว่า auxotrophic เต่า S. boulardii ปลอดภัยสามารถแสดง recombinant โปรตีน โดยการเลือกยาปฏิชีวนะ และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การศึกษาล่าสุดได้ชี้ให้เห็นถึงศักยภาพของสิ่งมีชีวิตโปรไบโอติกที่จะเหมาะสำหรับการสังเคราะห์และการส่งมอบการรักษาช่องปาก โปรไบโอติกยีสต์ Saccharomyces boulardii จะเป็นอย่างยิ่งสำหรับการนี​​้เนื่องจากความสามารถของตนในทางตรงกันข้ามกับ prokaryotes โปรไบโอติกเพื่อดำเนินการปรับเปลี่ยนแปลโพสต์ eukaryotic นี้ยีสต์โปรไบโอติกจึงมีศักยภาพที่จะแสดงความหลากหลายของโปรตีนในการรักษา ในปัจจุบันอย่างไรก็ตามการใช้ประเภทป่า (น้ำหนัก) เอส boulardii อาศัยต้านทานยาปฏิชีวนะสำหรับการเลือกของยีสต์เปลี่ยน ที่นี่เรารายงานการสร้างสายพันธุ์ที่กลายพันธุ์ของ auxotrophic boulardii เอสที่สามารถเลือกได้โดยไม่ต้องใช้ยาปฏิชีวนะและแสดงให้เห็นว่ายีสต์เหล่านี้สามารถแสดงความโปรตีนทำงานแม้ในขณะที่การกู้คืนจากเนื้อเยื่อของระบบภูมิคุ้มกันในทางเดินอาหารในหนู วิธีฉับ UV ถูกจ้างมาเพื่อสร้างสาม uracil auxotrophic S. กลายพันธุ์ boulardii ที่แสดงอัตราที่ต่ำของการพลิกกลับไปสู่​​การเติบโตป่าประเภท การกลายพันธุ์เหล่านี้สามารถแสดงความโปรตีนและมีความทนทานในการทดลองกับค่า pH ต่ำเกลือของกรดน้ำดีและสภาวะไร้ออกซิเจน วิกฤตการทดลอง Gavage ในช่องปากโดยใช้ C57BL / 6 หนูแสดงให้เห็นว่ามนุษย์กลายพันธุ์ boulardii เอสอยู่รอดและจะถูกนำขึ้นเข้าไปในเนื้อเยื่อของระบบภูมิคุ้มกันในทางเดินอาหารในระดับที่ใกล้เคียงกับ WT เอส boulardii ยีสต์กลายพันธุ์หายจากเนื้อเยื่อของระบบภูมิคุ้มกันในทางเดินอาหารนอกจากนี้ยังคงมีการแสดงออกของโปรตีนทำงาน ข้อมูลเหล่านี้แสดงให้เห็นว่ามนุษย์กลายพันธุ์ auxotrophic เอส boulardii สามารถแสดงความโปรตีนโดยไม่ต้องเลือกยาปฏิชีวนะและ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษาล่าสุดชี้ให้เห็นศักยภาพของโปรไบโอติก สิ่งมีชีวิตที่จะสามารถสังเคราะห์และการรักษาในช่องปาก . การใช้ยีสต์ Saccharomyces boulardii จะโดยเฉพาะอย่างยิ่งเหมาะสำหรับวัตถุประสงค์นี้เนื่องจากความสามารถในทางตรงกันข้ามกับโปรไบโอติกโพรคาริโ ที่จะแสดงความแตกต่างระหว่างการโพสต์สำหรับการปรับเปลี่ยนโปรไบโอติกยีสต์นี้จึงมีศักยภาพที่จะแสดงอาร์เรย์กว้างของโปรตีนในการรักษา ในปัจจุบัน อย่างไรก็ตาม การใช้พันธุ์ป่า ( WT ) boulardii อาศัยความต้านทานยาปฏิชีวนะสำหรับเลือกเปลี่ยนยีสต์ ที่นี่เรารายงานการสร้าง auxotrophic กลายพันธุ์สายพันธุ์ S boulardii that can be selected without antibiotics and demonstrate that these yeast can express functional recombinant protein even when recovered from gastrointestinal immune tissues in mice. A UV mutagenesis approach was employed to generate three uracil auxotrophic S. boulardii mutants that show a low rate of reversion to wild type growth. These mutants can express recombinant protein and are resistant in vitro to low pH, bile acid salts, and anaerobic conditions. Critically, oral gavage experiments using C57BL/6 mice demonstrate that mutant S. boulardii survive and are taken up into gastrointestinal immune tissues on a similar level as WT S. boulardii. Mutant yeast recovered from gastrointestinal immune tissues furthermore retain expression of functional recombinant protein. These data show that auxotrophic mutant S. boulardii can safely express recombinant protein without antibiotic selection and