2.8.2. b-d-glucosidase productionb-

2.8.2. b-d-glucosidase production
b-d-glucosidase activity was determined using p-nitrophenyl-bd- glucopyranoside (pNPG) (ε ¼ 18,5 cm2mmol
1) as substrate. Test samples were incubated with 0.55 mM pNPG in 50 mM acetate buffer pH 5.75 at 37 C for 30 min. The reaction was stopped by 1M sodium carbonate. The absorbance of released p-nitrophenol was measured at 405 nm. One unit (U mL
1) of b-D glucosidase activity was defined as the amount of enzyme required to produce 1 mmol
of p-nitrophenol per 1 min at 37 C. Specific b-glucosidase activity (U mg
1)was expressed as 1 U per 1mg of protein present in the FE. b-glucosidase isoforms were detected on nitrocellulose membrane (NC) after printing from IEF gel for 20 min. IEFwas performed as described in Section 2.8.1. b-glucosidase isoforms were visualized as previously described by Kwon et al. (1994).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8.2. b-d-glucosidase ผลิตกำหนดกิจกรรม b-d-glucosidase ใช้ p-nitrophenyl-bd-glucopyranoside (pNPG) (ε¼ 18,5 cm2mmol 1) เป็นพื้นผิว ตัวอย่างทดสอบได้ incubated กับ pNPG 0.55 มม.ใน pH บัฟเฟอร์ acetate 50 มม. 5.75 ที่ 37 C สำหรับ 30 นาที หยุดปฏิกิริยา ด้วย 1M โซเดียมคาร์บอเนต มีวัด absorbance ของ p-nitrophenol ที่นำออกใช้ที่ 405 nm หนึ่งหน่วย (U mL 1) b-D glucosidase กิจกรรมถูกกำหนดเป็นจำนวนของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1 mmolของ p-nitrophenol ต่อ 1 นาทีที่ 37 C. b-glucosidase เฉพาะ กิจกรรม (ยูเอ็มจี 1) ถูกแสดงเป็น 1 U ต่อมิลลิกรัมโปรตีนใน FE 1 b-glucosidase isoforms ตรวจพบบนเยื่อ nitrocellulose (NC) หลังจากที่พิมพ์จาก IEF เจลสำหรับ 20 นาที IEFwas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.8.1 b-glucosidase isoforms มี visualized เป็นก่อนหน้านี้ อธิบายโดย Kwon และ al. (1994)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.8.2 BD-glucosidase
ผลิตกิจกรรมBD-glucosidase ถูกกำหนดโดยใช้ P-Nitrophenyl-BD-glucopyranoside (pNPG) (ε¼ 18,5 cm2mmol? 1) เป็นสารตั้งต้น ตัวอย่างทดสอบถูกบ่มกับ 0.55 มิลลิ pNPG ในค่า pH บัฟเฟอร์อะซิเตต 50 มิลลิ 5.75 ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที ปฏิกิริยาหยุด 1M โซเดียมคาร์บอเนต การดูดกลืนแสงที่ปล่อยออกมาจาก P-nitrophenol วัดที่ 405 นาโนเมตร หนึ่งหน่วย (U มิลลิลิตร 1) ของกิจกรรม BD glucosidase ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1
มิลลิโมลของP-nitrophenol ต่อ 1 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียส กิจกรรม B-glucosidase เฉพาะ (U mg? 1) ถูกแสดงเป็น 1 ต่อ 1 มก U ของโปรตีนที่อยู่ใน FE ไอโซฟอร์ม B-glucosidase ถูกตรวจพบในเยื่อ nitrocellulose (NC) หลังจากที่พิมพ์จาก IEF เจลสำหรับ 20 นาที IEFwas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในมาตรา 2.8.1 ไอโซฟอร์ม B-glucosidase ถูกมองเห็นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยเทควันโด, et al (1994)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8.2 . กิจกรรม b-d-glucosidase การผลิต
b-d-glucosidase ตั้งใจใช้ p-nitrophenyl-bd - glucopyranoside ( pnpg ) ( ε¼ 18,5 cm2mmol
1 ) เป็นสับสเตรท ตัวอย่างทดสอบถูกบ่มกับ 0.55 มม. 50 มม. pnpg อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH ระหว่างที่ 37  C เป็นเวลา 30 นาที ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดโดย 1m โซเดียมคาร์บอเนต นปลดปล่อย p-nitrophenol ถูกวัดที่ 405 nm .หนึ่งหน่วย ( คุณมล
1 ) กิจกรรมใน b-d ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิต 1 มิลลิโมล
ของ p-nitrophenol ต่อ 1 นาทีที่ 37  C . เฉพาะ b-glucosidase กิจกรรม ( U มิลลิกรัม
1 ) แสดงเป็น 1 u / 1mg ของโปรตีนที่มีอยู่ในเหล็ก b-glucosidase ไอโซฟอร์มถูกตรวจพบบนเมมเบรนไนโตร ( NC ) หลังจากการพิมพ์จากบทสรุปเจล 20 นาที iefwas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในส่วนที่ 21 . b-glucosidase ไอโซฟอร์มถูกมองเห็นโดยการอธิบายโดยควอน et al . ( 1994 )