Throughout this study stationary phase cells of E. coli
O157:H7 were added to soil. The ability to detect
stationary phase starved populations of E. coli O157:H7
may be particularly important in environmental samples,
where substrate concentrations are unlikely to favour
growth. The limited data available suggest that E. coli
O157:H7 can remain viable in soil and water for considerable lengths of time (Wang and Doyle 1998;
Fenlon et al. 2000; Mubiru et al. 2000). It is likely
therefore that during survival in such environments, cells
will encounter conditions of stress, such as nutrient
starvation. This may alter the ability of E. coli O157:H7
to compete with indigenous microbial populations for
nutrients during subsequent enrichment stages of detection,
particularly when cell concentrations are low. This has been
shown in studies in ground meat where stressing E. coli
O157:H7 has been shown to reduce recovery of cells on
nutrient agar (Rocelle et al. 1995). Experiments conducted
in this study exposed cultures of E. coli O157:H7 to a range
of periods of starvation in phosphate buffer, prior to soil
inoculation. Starvation did not affect detection of low cell
numbers in soil by the PCR assay (Table 2). Even after
starvation for 35 d, the assay was suf®ciently sensitive to
detect numbers of E. coli O157:H7 as low as 10 cfu g±1 soil.
Previous studies, reporting high PCR detection sensitivities
in bovine faeces and meat, are limited through the use of
freshly prepared cell cultures as inocula for spiking material
(Hu et al. 1999; Sharma et al. 1999). However, in this
study, the ability to detect low numbers of starved populations of E. coli O157:H7 was encouraging and
increases con®dence in the use of enrichment and PCRbased
strategies for detection of this pathogen in environmental
samples.
Throughout this study stationary phase cells of E. coliO157:H7 were added to soil. The ability to detectstationary phase starved populations of E. coli O157:H7may be particularly important in environmental samples,where substrate concentrations are unlikely to favourgrowth. The limited data available suggest that E. coliO157:H7 can remain viable in soil and water for considerable lengths of time (Wang and Doyle 1998;Fenlon et al. 2000; Mubiru et al. 2000). It is likelytherefore that during survival in such environments, cellswill encounter conditions of stress, such as nutrientstarvation. This may alter the ability of E. coli O157:H7to compete with indigenous microbial populations fornutrients during subsequent enrichment stages of detection,particularly when cell concentrations are low. This has beenshown in studies in ground meat where stressing E. coliO157:H7 has been shown to reduce recovery of cells onnutrient agar (Rocelle et al. 1995). Experiments conductedin this study exposed cultures of E. coli O157:H7 to a rangeof periods of starvation in phosphate buffer, prior to soilinoculation. Starvation did not affect detection of low cellnumbers in soil by the PCR assay (Table 2). Even afterstarvation for 35 d, the assay was suf®ciently sensitive todetect numbers of E. coli O157:H7 as low as 10 cfu g±1 soil.Previous studies, reporting high PCR detection sensitivitiesin bovine faeces and meat, are limited through the use offreshly prepared cell cultures as inocula for spiking material(Hu et al. 1999; Sharma et al. 1999). However, in thisstudy, the ability to detect low numbers of starved populations of E. coli O157:H7 was encouraging andincreases con®dence in the use of enrichment and PCRbasedstrategies for detection of this pathogen in environmentalsamples.
การแปล กรุณารอสักครู่..
ตลอดการศึกษาเซลล์เฟสของเชื้อ E. coli
O157: H7 ถูกเพิ่มเข้าไปในดิน ความสามารถในการตรวจจับเฟสประชากรหิวโหยของเชื้อ E. coli O157: H7 อาจมีความสำคัญโดยเฉพาะอย่างยิ่งในตัวอย่างสิ่งแวดล้อมที่มีความเข้มข้นสารตั้งต้นที่มีโอกาสน้อยที่จะสนับสนุนการเจริญเติบโต ข้อมูลที่ จำกัด ที่มีอยู่แสดงให้เห็นว่าเชื้อ E. coli O157: H7 จะยังคงทำงานได้ในดินและน้ำสำหรับความยาวมากของเวลา (วังและดอยล์ 1998; Fenlon et al, 2000; Mubiru et al, 2000..) มันอาจเป็นเหตุที่ในระหว่างการอยู่รอดในสภาพแวดล้อมเช่นเซลล์จะพบเงื่อนไขของความเครียดเช่นสารอาหารความอดอยาก นี้อาจปรับเปลี่ยนความสามารถของเชื้อ E. coli O157: H7 ที่จะแข่งขันกับประชากรจุลินทรีย์พื้นเมืองสารอาหารในระหว่างขั้นตอนการตกแต่งที่ตามมาของการตรวจสอบโดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อความเข้มข้นของเซลล์อยู่ในระดับต่ำ นี้ได้รับการแสดงในการศึกษาในเนื้อดินที่เน้นหนักเชื้อ E. coli O157: H7 ได้รับการแสดงเพื่อลดการฟื้นตัวของเซลล์บนอาหารเลี้ยงเชื้อ(Rocelle et al, 1995). การทดลองดำเนินการในการศึกษานี้สัมผัสวัฒนธรรมของเชื้อ E. coli O157: H7 ไปยังช่วงของระยะเวลาของความอดอยากในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ก่อนที่จะดินฉีดวัคซีน ความอดอยากไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการตรวจสอบของเซลล์ต่ำตัวเลขในดินโดยการทดสอบ PCR (ตารางที่ 2) แม้หลังจากการอดอาหารเป็นเวลา 35 D, การทดสอบเป็นsuf®cientlyความไวต่อการตรวจสอบตัวเลขของเชื้อE. coli O157:. H7 ต่ำเป็น 10 โคโลนีต่อกรัม± 1 ดินศึกษาก่อนหน้านี้รายงานการตรวจสอบความไวสูงPCR ในอุจจาระวัวและเนื้อสัตว์จะถูก จำกัด ผ่านการใช้ปรุงสดใหม่เซลล์เพาะเลี้ยงเป็นinocula สำหรับวัสดุองศา(Hu et al, 1999;.. ชาร์ et al, 1999) อย่างไรก็ตามในการศึกษาความสามารถในการตรวจสอบตัวเลขที่ต่ำของประชากรที่หิวโหยของเชื้อ E. coli O157: H7 เป็นกำลังใจและเพิ่มcon®denceในการใช้งานของการเพิ่มปริมาณและPCRbased กลยุทธ์สำหรับการตรวจสอบของเชื้อโรคในสิ่งแวดล้อมนี้ตัวอย่าง
การแปล กรุณารอสักครู่..