Colonies obtained on MRS agar were

Colonies obtained on MRS agar were extracted and
transferred to 10 mL of broth culture for the enrichment
step. After 24 h of incubation (37°C), screening for isolates
was performed through a primary morphological test
with the use of a fluorescent microscope (BX61; Olympus)
(Olympus, Tokyo, Japan) and biochemical tests,
such as Gram staining and catalase tests. The isolates were
stored in 30% (w/v) glycerol and 10% (w/v) skim milk at

70°C (Mirzaei and Barzgari 2012).
Amplification of 16S rRNA
The amplification of 16S rRNA of Lactobacillus strains
was performed by using one primer pair (16F27 50
-
AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-30 and 16R 50
-TACCTTG
TTAGGACTTCACC-30
), as previously reported by Mirzaei
and Barzgari (2012). These primers are genus-specific
and can directly amplify the 16S rRNA (1500 bp) of Lactobacillus
strains. The amplification was performed with a
25 lL final volume containing 0.4 lmol/L primer, 40 ng
of chromosomal DNA, and master mix (Ampliqon, Herlev,
Denmark). The PCR program cycles were set up as
follows: denaturation at 95°C for 4 min, 32 cycles of
94°C for 1 min, 58°C for 1 min, 72°C for 95 sec, and a
final extension at 72°C for 5 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาณานิคมที่ได้รับบน MRS agar ถูกสกัด และโอนย้ายไป 10 mL ของซุปวัฒนธรรมสำหรับการเติมเต็มขั้นตอนการ หลังจาก 24 ชมของคณะทันตแพทยศาสตร์ (37° C), การคัดกรองการแยกมีดำเนินการผ่านการทดสอบของหลักด้วยการใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (BX61 โอลิมปัส)(โอลิมปัส โตเกียว ญี่ปุ่น) และการ ทดสอบชีวเคมีเช่นกรัมย้อมสีและ catalase ทดสอบ แยกได้เก็บไว้ในกลีเซอร 30% (w/v) และ 10% (w/v) skim นมที่70° C (Mirzaei และ Barzgari 2012)ขยายของ 16S rRNAขยายของ 16S rRNA ของสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสทำ โดยใช้รองพื้นหนึ่งคู่ (16F27 50-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-30 และ 16R 50-TACCTTGTTAGGACTTCACC-30), เป็นก่อนหน้านี้ รายงาน โดย Mirzaeiและ Barzgari (2012) ไพรเมอร์เหล่านี้มีเฉพาะสกุลและสามารถขยายได้โดยตรง 16S rRNA (1500 bp) ของแลคโตบาซิลลัสสายพันธุ์ ทำการขยายด้วยการ25 จะสุดท้ายไดรฟ์ข้อมูลรองพื้น lmol 0.4 L, 40 ngของโครโมโซมดีเอ็นเอ และต้นแบบผสม (Ampliqon, Herlevเดนมาร์ก) วงจรโปรแกรม PCR ถูกตั้งค่าเป็นดังต่อไปนี้: denaturation ที่ 95° C สำหรับ 4 นาที 32 รอบของ94 องศาเซลเซียสใน 1 นาที 58 องศาเซลเซียสใน 1 นาที 72° C ใน 95 วินาที และส่วนขยายที่สุดท้ายที่ 72° C สำหรับ 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาณานิคมที่ได้รับใน MRS agar
ถูกสกัดและโอนไปยัง10
มิลลิลิตรของวัฒนธรรมน้ำซุปสำหรับการตกแต่งขั้นตอน หลังจาก 24 ชั่วโมงของการบ่ม (37 ° C)
การคัดสายพันธุ์ที่ได้ดำเนินการผ่านการทดสอบทางสัณฐานวิทยาหลักที่มีการใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง
(BX61; Olympus)
(โอลิมปักรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น)
และการทดสอบทางชีวเคมีเช่นการย้อมสีแกรมและcatalase การทดสอบ เชื้อที่ถูกเก็บไว้ใน 30% (w / v) กลีเซอรอลและ 10% (w / v) นมพร่องมันเนย? 70 ° C (Mirzaei และ Barzgari 2012). ขยายของ 16S rRNA ขยายของ 16S rRNA สายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสได้ดำเนินการโดยใช้คู่ไพรเมอร์หนึ่ง (16F27 50 - AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-30 และ 16R 50 -TACCTTG TTAGGACTTCACC-30) ขณะที่รายงานก่อนหน้านี้โดย Mirzaei และ Barzgari (2012) ไพรเมอร์เหล่านี้เป็นประเภทที่เฉพาะเจาะจงและโดยตรงสามารถขยาย 16S rRNA (1500 bp) ของแลคโตบาซิลลัสสายพันธุ์ เครื่องขยายเสียงที่ได้รับการดำเนินการกับ25 จะเป็นครั้งสุดท้ายที่มีปริมาณ 0.4 lmol / L ไพรเมอร์ 40 นาโนกรัมของดีเอ็นเอของโครโมโซมและผสมต้นแบบ(Ampliqon, เฮอร์เลฟ, เดนมาร์ก) รอบโปรแกรม PCR ถูกตั้งค่าเป็นดังนี้denaturation ที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 นาที 32 รอบของ94 ° C เป็นเวลา 1 นาที 58 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 95 วินาทีและนามสกุลสุดท้ายที่72 ° C เป็นเวลา 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาณานิคมได้รับนางวุ้นสกัดและ
โอน 10 มิลลิลิตร น้ำซุปสำหรับวัฒนธรรมการ
ขั้นตอน หลังจาก 24 ชั่วโมงที่ 1 ( 37 ° C ) , การตรวจเชื้อ
แสดงผ่านหลักของการทดสอบ
ด้วยการใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง ( bx61 ; โอลิมปัส ( Olympus )
, โตเกียว , ญี่ปุ่น ) และการทดสอบทางชีวเคมี
เช่นกรัม staining และการทดสอบสามารถ . โดย
ไอโซเลทเก็บไว้ใน 30 % ( w / v ) และกลีเซอรอล 10 % ( w / v ) หางนมผงที่

70 ° C ( mirzaei และ barzgari 2012 )
( ของ 16S rRNA ของ 16S rRNA (

ของแลคโตบาซิลลัสสายพันธุ์ได้ โดยใช้ไพรเมอร์คู่ ( 16f27 50
-
agagtttgatcmtggctcag-30 และ 16r 50
-

taccttg ttaggacttcacc-30 ) ที่รายงานว่า ก่อนหน้านี้ โดย mirzaei
และ barzgari ( 2012 ) ไพรเมอร์เหล่านี้
เฉพาะสกุลและโดยตรงสามารถขยาย 16S rRNA ( 1500 BP ) ของเชื้อ Lactobacillus

การเพิ่มปริมาณได้ด้วย
25 จะสุดท้ายที่มีปริมาณ 0.4 lmol ลิตรรองพื้น 40 ng
ของโครโมโซมดีเอ็นเอ และอาจารย์ผสม ( ampliqon เฮอ
, , เดนมาร์ก ) โปรแกรมโดยรอบถูกตั้งค่าเป็น
ดังนี้ : ( 95 องศา C เป็นเวลา 4 นาที 32 รอบ
94 ° C เป็นเวลา 1 นาที 58 องศา C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C 95 วินาทีและ
สุดท้ายที่ 72 ° C ) เป็นเวลา 5 นาที