2.4.2. Gas chromatographic (GC) ana

2.4.2. Gas chromatographic (GC) analysis
Trimethyl silylated oximes (TMSO) of monosaccharides (glucose,
galactose, fructose and tagatose) and disaccharides (allolactose,
lactose, b-1,6-galactobiose and sucrose) were determined by GC
following the method of Cardelle-Cobas et al. (2009). Chromatographic
analysis was performed on Agilent Technologies gas chromatograph
(Mod 7890A) equipped with a flame ionization detector (FID).
Separation was carried out in a fused silica capillary column HP-5MS
(5% phenyl methylsilicone, 25 m  0.32 mm  0.25 mm thickness; J
& W Scientific, Folsom, CA, USA). Nitrogen was used as carrier gas at a
flow rate of 1 mL/min. Injector and detector temperatures were 280
and 315 8C, respectively. The oven temperature was programmed
from 180 to 315 8C at a heating rate of 3 8C/min and held for 20 min.
Injections were made in the split mode (1:20). Data acquisition and
integration were done using Agilent ChemStations Reb. 4B. 03.01
software (Wilmington, DE, USA).
The oximes were formed following the method of Brobst and
Lott (1966). First, 1 mL of methanolic extract (4 mg of sugars) was
added to 0.4 mL of internal standard (I.S.) solution (0.5 mg/mL
phenyl-b-glucoside). Afterwards, the mixture was dried at 38–
40 8C in a rotary evaporator (Bu¨ chi Labortechnik AG, Flawil,
Switzerland). Sugar oximes were formed by adding 200 mL
hydroxylamine chloride (2.5%) in pyridine and heating the mixture
at 70 8C for 30 min and then silylated with hexamethyldisilazane
(200 mL) and trifluoroacetic acid (20 mL) and kept at 50 8C for
30 min. Reaction mixtures were centrifuged at 7000  g for 2 min
at room temperature. Supernatants were injected or stored at 4 8C
prior to analysis. All analyses were carried out in duplicate and
data were expressed as mean  standard deviation (SD).
Response factors were calculated after the triplicate analysis of
5 standard solutions (galactose, glucose, fructose, tagatose and
lactose) over the expected concentration range in samples.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4.2. แก๊ส chromatographic (GC) วิเคราะห์Trimethyl silylated oximes (TMSO) ของ monosaccharides (กลูโคสกาแล็กโทส ฟรักโทส และ tagatose) และ disaccharides (allolactoseย่อยแลคโตส บี-1,6-galactobiose และซูโครส) ถูกกำหนด โดย GCตามวิธีของ Cardelle Cobas et al. (2009) Chromatographicทำการวิเคราะห์ตามเทคโนโลยี Agilent แก๊ส chromatograph(Mod 7890A) พร้อมกับตรวจจับ ionization เปลวไฟ (FID)แยกถูกดำเนินในนส่วน fused รูพรุนคอลัมน์ HP 5MS(5% phenyl methylsilicone, m 0.32 มม. 0.25 ความหนา 25 มม. เจ& W โฟลซัม วิทยาศาสตร์ CA, USA) มีใช้ไนโตรเจนเป็นก๊าซผู้ขนส่งที่มีอัตราการไหลของหัวฉีด 1 mL/นาที และเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 280และ 315 8C ตามลำดับ โปรแกรมอุณหภูมิเตาอบจาก 180 ไป 315 8C ในอัตรานาทีละ 3 8 C ความร้อนขึ้นใน 20 นาทีฉีดที่เกิดขึ้นในโหมดแยก (1:20) ซื้อข้อมูล และทำรวมใช้ Agilent ChemStations Reb 4B. 03.01ซอฟต์แวร์ (วิลมิ DE สหรัฐอเมริกา)Oximes มีรูปแบบตามวิธีของ Brobst และLott (1966) ครั้งแรก มี 1 mL ของสารสกัด methanolic (4 มิลลิกรัมของน้ำตาล)เพิ่ม 0.4 mL ของภายใน (I.S.) สารละลายมาตรฐาน (0.5 mg/mLphenyl-บี-glucoside) ภายหลัง ส่วนผสมที่แห้งที่ 38 –40 C 8 ใน evaporator โรตารี่ (Bu¨ ชี Labortechnik AG, Flawilสวิตเซอร์แลนด์) น้ำตาล oximes ถูกก่อตั้งขึ้น โดยเพิ่ม 200 mLhydroxylamine คลอไรด์ (2.5%) pyridine และความร้อนผสมที่ 8C 70 30 นาทีแล้ว silylated กับ hexamethyldisilazane(200 มล) และกรด trifluoroacetic (20 มล.) และเก็บที่ 8C 50 สำหรับน้ำยาผสมปฏิกิริยา 30 นาทีได้ centrifuged ที่ 7000 g ใน 2 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ฉีด หรือเก็บที่ 4 8C supernatantsก่อนที่จะวิเคราะห์ วิเคราะห์ทั้งหมดถูกทำสำเนา และข้อมูลที่แสดงเป็นค่าเฉลี่ยเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD)มีคำนวณปัจจัยตอบสนองหลังจากการวิเคราะห์ triplicateโซลูชั่นมาตรฐานที่ 5 (กาแล็กโทส กลูโคส ฟรักโทส tagatose และแล็กโทส) ช่วงความเข้มข้นที่คาดไว้ในตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4.2 โครมาก๊าซ (GC) การวิเคราะห์
Trimethyl silylated oximes (TMSO) ของ monosaccharides (กลูโคส
ฟรุกโตสกาแลคและ tagatose) และ disaccharides (allolactose,
แลคโตส, B-1,6-galactobiose และซูโครส) ได้รับการพิจารณาโดย GC
ต่อไปนี้วิธีการ Cardelle- Cobas และคณะ (2009) โครมา
วิเคราะห์ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับ Agilent ก๊าซ Chromatograph เทคโนโลยี
(Mod 7890A) การติดตั้งเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ (FID).
แยกได้ดำเนินการในเส้นเลือดฝอยผสมซิลิกาคอลัมน์ HP-5MS
(5% methylsilicone phenyl, 25 เมตร? 0.32 มม? 0.25 มิลลิเมตร ความหนา; J
& W วิทยาศาสตร์ Folsom, CA, USA) ไนโตรเจนที่ใช้เป็นก๊าซที่
อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีดและอุณหภูมิที่ตรวจจับได้ 280
และ 315 8C ตามลำดับ อุณหภูมิเตาอบเป็นโปรแกรม
180-315 8C ในอัตราความร้อนจาก 3 8C / นาทีและจัดขึ้นเป็นเวลา 20 นาที.
ฉีดได้ทำในโหมดการแบ่ง (1:20) เก็บข้อมูลและ
บูรณาการได้รับการดำเนินการโดยใช้ Agilent ChemStations Reb 4B 03.01
ซอฟแวร์ (Wilmington, DE, USA).
oximes กำลังก่อตัวขึ้นต่อไปนี้วิธีการ Brobst และ
Lott (1966) ครั้งแรก 1 มิลลิลิตรของสารสกัดเมทานอล (4 มิลลิกรัมของน้ำตาล) ที่ถูก
เพิ่มเข้ามาใน 0.4 มิลลิลิตรมาตรฐานภายใน (IS) การแก้ปัญหา (0.5 mg / ml
phenyl-B-glucoside) หลังจากนั้นผสมแห้งที่ 38-
40 8C ในเครื่องระเหยแบบหมุน (บุไค Labortechnik AG, Flawil,
วิตเซอร์แลนด์) oximes น้ำตาลถูกสร้างขึ้นโดยการเพิ่ม 200 มิลลิลิตร
ไฮดรอกซิคลอไรด์ (2.5%) ในไพริดีนและความร้อนส่วนผสม
ที่ 70 8C เวลา 30 นาทีและ silylated แล้วด้วย hexamethyldisilazane
(200 มิลลิลิตร) และกรด Trifluoroacetic (20 มิลลิลิตร) และเก็บไว้ที่ 50 8C สำหรับ
30 นาที . ผสมปฏิกิริยาถูกหมุนเหวี่ยงที่ 7000? กรัม 2 นาที
ที่อุณหภูมิห้อง supernatants ถูกฉีดหรือเก็บไว้ที่ 4 8C
ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ การวิเคราะห์ทั้งหมดได้ดำเนินการในที่ซ้ำกันและ
ข้อมูลที่ได้แสดงเป็นหมายความว่าอย่างไร ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD).
ปัจจัยการตอบสนองจะถูกคำนวณหลังจากการวิเคราะห์เพิ่มขึ้นสามเท่าของ
5 โซลูชั่นมาตรฐาน (กาแลคกลูโคสฟรุกโตส, tagatose และ
แลคโตส) ในช่วงความเข้มข้นคาดว่าในตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4.2 . แก๊สโครมาโทกราฟี ( GC ) ไตรการวิเคราะห์
silylated oximes ( tmso ) ของมอโนแซ็กคาไรด์ ( กลูโคส ,
กาแลกโตส ฟรุคโตส และทากาโทส ) และน้ำตาลโมเลกุลคู่ ( โลแล็คโตส
b-1,6-galactobiose , แลคโตส และซูโครส ) ถูกกำหนดโดย GC
ต่อไปนี้วิธีการ cardelle cobas et al . ( 2009 ) การวิเคราะห์ทางโครมาโตกราฟี
คือใช้แก๊ส
Agilent เทคโนโลยี( mod 7890a ) พร้อมกับเฟลมไอออไนเซชันตรวจจับ ( FID )
แยกข้อมูลในฟิวส์ซิลิกาคอลัมน์ capillary hp-5ms
( 5% ) methylsilicone 25 เมตร  0.32 มม. ความหนา 0.25 มม.  J
& W ทางวิทยาศาสตร์ ฟอลซัม , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ไนโตรเจนเป็นก๊าซที่ใช้เป็นพาหะใน
1 มิลลิลิตร / นาที อัตราการไหลของหัวฉีด และอุณหภูมิเครื่อง 28
315 8C ตามลำดับ อุณหภูมิเตาอบโปรแกรม
จาก 180 ถึง 315 8C ที่อัตราความร้อน 3 8B / min และจัดขึ้นเป็นเวลา 20 นาที
ฉีดได้ในโหมดแยก ( 1 ) ข้อมูลเพิ่มเติมและการทำใช้เลนต์
chemstations เร้บ 4B . 03.01
ซอฟต์แวร์ ( Wilmington , DE , USA )
oximes ขึ้นตามวิธีการและ brobst
ลอต ( 1966 ) อันดับแรก 1 มิลลิลิตรของสารสกัดเมทานอล ( 4 มิลลิกรัมของน้ำตาลเพิ่ม )
04 มิลลิลิตรมาตรฐานภายใน ( i.s. ) สารละลาย ( 0.5 mg / ml
phenyl-b-glucoside ) หลังจากนั้น ผสมส่วนผสมแห้งที่ 38 – 40 8C ในเครื่องระเหยแบบหมุน
( บูตั้งจี๋ labortechnik AG , flawil
, สวิตเซอร์แลนด์ ) น้ำตาล oximes ถูกสร้างขึ้นโดยการเพิ่ม 200 ml
มีนคลอไรด์ ( 2.5% ) ใน pyridine และความร้อนผสม
ที่ 70 8C 30 นาที แล้ว silylated กับเฮกซาเมทิลไดซิลาเซน
( 200 มล. ) และกรดไตรฟลูออโรอะซิติก ( 20 มล. ) และเก็บไว้ที่ 50 8C สำหรับ
30 นาที ปฏิกิริยาผสมอยู่ที่ระดับ 7 , 000  g
2 นาที ที่อุณหภูมิห้อง supernatants ฉีดหรือเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 8C
ก่อนการวิเคราะห์ ทั้งหมดถูกดำเนินการและวิเคราะห์ซ้ำ
ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย  ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ( SD ) .
ปัจจัยตอบสนองได้หลังจากการวิเคราะห์ทำสำเนาสามฉบับของ
5 โซลูชั่นมาตรฐาน ( กาแลกโตส กลูโคส ฟรุคโตส ทากาโทสและ
แลคโตส ) มากกว่าคาดในช่วงความเข้มข้นของตัวอย่าง