Bacterial strain and vectorThe βC1g

Bacterial strain and vector

The βC1gene was amplified by PCR and cloned into pGEMT-Easy vector in antisense orientation. The resulting clones were sequenced and further sub-cloned into binary vector-PBI 121 and electroporation was used to mobilize into A. Tumefaciens (strain LBA 4404). The confirmation of correct clones were done by colony PCR and sequencing. Bacterial culture was maintained on luria broth medium containing kanamycin (50 mg/l) and Rifampicin (25 mg/l). The Agrobacterium culture was developed by inoculating and overnight culture of a single colony in the Agrobacterium minimal medium. The design of gene construct is presented

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์แบคทีเรียและเวกเตอร์βC1geneถูกขยายโดยวิธี PCR และโคลนเป็นเวกเตอร์ pGEMT-ง่ายในแนวแอนตี้ โคลนที่เกิดมีลำดับขั้นตอนและต่อไปย่อยโคลนเข้าสู่ไบนารีเวกเตอร์ PBI 121 และ electroporation ถูกใช้ในการระดมเข้า A. tumefaciens (สายพันธุ์ LBA 4404) ยืนยันของโคลนที่ถูกต้องถูกทำโดยอาณานิคม PCR และการเรียงลำดับ วัฒนธรรมแบคทีเรียถูกเก็บรักษาไว้ในสื่อ Luria น้ำซุปที่มีกานามัยซิ (50 mg / l) และ Rifampicin (25 mg / l) วัฒนธรรม Agrobacterium รับการพัฒนาโดยการฉีดวัคซีนและวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของอาณานิคมเดียวในกลางน้อยที่สุด Agrobacterium การออกแบบโครงสร้างของยีนที่จะนำเสนอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แบคทีเรียและเวกเตอร์ที่ถูกขยายโดยวิธี PCR และบีตา c1gene โคลนเข้า pgemt ง่ายเวกเตอร์ในทิศทาง antisense . ทำให้โคลนและโคลนเข้าลำดับต่อไปซับไบนารีเวกเตอร์ pbi 121 และ electroporation ถูกใช้เพื่อระดมเป็น A . tumefaciens ( สายพันธุ์ LBA 4404 ) การยืนยันของโคลนที่ถูกต้อง ทำโดยวิธี PCR และอาณานิคมของ เพาะเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีน้ำซุปยังคงลุเรียน ( 50 mg / L ) และ rifampicin ( 25 mg / l ) ที่ถูกพัฒนาขึ้นโดย Agrobacterium วัฒนธรรมและวัฒนธรรมค้างคืนณของอาณานิคมใน Agrobacterium น้อยที่สุด ) การออกแบบของยีนสร้างเสนอ