Antibody labelling. The optimal co

Antibody labelling.
The optimal concentration of antibody for conjugation with colloidal gold was determined by titrating aliquots of diluted IgG with colloidal gold.
The purified IgG was diluted to a concentration of 0.1 mg/ml in sodium phosphate buffer (1 mM, pH 7.0).
After incubating the mixture for 10 min, 0.1 ml of 10% NaCl was added to the tubes and the absorbance was measured at 520 nm.
Aliquot (approximately 10 ml) of purified IgG (0.1 mg/ml) was added drop-wise to l00 ml of colloidal-gold solution (pH 8.0) followed by the addition of 10 ml of filtered 10% bovine serum albumin (BSA), pH 8.0 with gentle stirring for 20-25 min.The solution was incubated for 10 min at 25°C and centrifuged at 15,000 g for 30 min at 4°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แอนติบอดีที่ฉลาก ความเข้มข้นสูงสุดของแอนติบอดีการ conjugation colloidal ทองถูกกำหนด โดย aliquots titrating ของ IgG แตกออกกับ colloidal gold IgG บริสุทธิ์ถูกผสมให้เข้มข้น 0.1 mg/ml ในโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (1 มม. pH 7.0) หลังจาก incubating ส่วนผสมสำหรับ 10 นาที 0.1 ml 10% NaCl ถูกเพิ่มลงในท่อ และถูกวัด absorbance ที่ 520 nm มีเพิ่มส่วนลงตัว (ประมาณ 10 ml) ของ IgG บริสุทธิ์ (0.1 mg/ml) drop-wise เพื่อ l00 ml ของโซลูชัน colloidal gold (pH 8.0) ตาม ด้วยการเพิ่ม 10 ml ของกรอง 10% วัว serum albumin (บีเอสเอ), pH 8.0 กับกวนเบา ๆ สำหรับ 20-25 นาที โซลูชั่น incubated สำหรับ 10 นาทีที่ 25° C และ centrifuged ที่ 15000 g ใน 30 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การติดฉลากแอนติบอดี.
ความเข้มข้นที่เหมาะสมของแอนติบอดีสำหรับการเชื่อมต่อกันด้วยทองคำคอลลอยด์ถูกกำหนดโดยวิเคราะห์การ aliquots ของ IgG เจือจางด้วยทองคอลลอยด์.
IgG บริสุทธิ์ถูกเจือจางความเข้มข้น 0.1 mg / ml ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซเดียม (1 มิลลิค่า pH 7.0)
หลังจากบ่มผสมเป็นเวลา 10 นาที, 0.1 มล. 10% โซเดียมคลอไรด์ถูกบันทึกอยู่ในท่อและการดูดกลืนแสงที่ถูกวัดที่ 520 นาโนเมตร.
aliquot (ประมาณ 10 มล.) ของ IgG บริสุทธิ์ (0.1 mg / ml) ถูกบันทึกหล่นฉลาดที่จะ l00 มล. ของการแก้ปัญหาคอลลอยด์ทอง (pH 8.0) ตามด้วยนอกเหนือจาก 10 มิลลิลิตรกรอง 10% ซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) ค่า pH 8.0 กับกวนอ่อนโยน 20-25 แก้ปัญหา min.The ถูกบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 25 ° C และหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฉลากแอนติบอดี
เหมาะสมปริมาณแอนติบอดี ) ที่มี Colloidal Gold ถูกกำหนดโดย titrating เฉยๆเมื่อ IgG กับคอลลอยด์ทอง
IgG บริสุทธิ์เจือจางในความเข้มข้น 0.1 มก. / มล. ( 1 มิลลิเมตรในฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 ) .
หลังจากไข่ผสมเป็นเวลา 10 นาที 01 มิลลิลิตร เติมเกลือร้อยละ 10 หลอด และทำการวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 520 nm .
ส่วนลงตัว ( ประมาณ 10 มล. ) ของ IgG บริสุทธิ์ ( 0.1 มก. / มล. ) เพิ่ม 100 มิลลิลิตรของสารละลายลดลง ปัญญาทองคอลลอยด์ ( pH 8.0 ) ตามด้วยนอกเหนือจาก 10 มิลลิลิตร กรอง 10% เซรั่มอัลบูมิวัว ( BSA ) pH 8.0 กับอ่อนโยนกวน 20-25 นาที สารละลายที่บ่มเป็นเวลา 10 นาที ที่อุณหภูมิ 25 ° C และที่ระดับ 15 ,000 G สำหรับ 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศา