2.3. Protoplast isolation and cultu

2.3. Protoplast isolation and culture
Mesophyll protoplasts were isolated from leaves of shoot
cultures grown as described above and cultured according to a
published protocol (Nugent et al., 2006) as modified from Pelletier
et al. (1983). Shoot cultures were grown in several types of culture
vessels to determine the effect on protoplast yield and division
frequency. Shoot cultures established from 10-day-old germinated
seedlings were transferred to either Magenta vessels GA-7 (Sigma,
V8505), Phytacon Vessels (Sigma, P-5557), Glass jars
(145mm 85mm, Phytotechnology Labs, C956) or Glass jars with
vented lids. The vented lids of glass jars were prepared by cutting a
(3 cmdiameter) hole in the middle portion of the lids using a scalpel blade, and plugging the hole with absorbent cotton wool. All the
culture vessels were used with identical medium (MS + 30 g/
l sucrose +4 g/l Phytagel). These shoot cultures were maintained
at 25 8C under 16 h light/8 h dark light conditions. Protoplast
isolation experiments were carried out three times and each time
new shoot cultures were taken from germinated seedlings and
inoculated in the different containers. Protoplast viability was
measured with fluorescein diacetate (Widholm, 1972).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. protoplast แยกและวัฒนธรรมโป mesophyll ถูกแยกต่างหากจากใบยิงวัฒนธรรมปลูกตามที่อธิบายไว้ข้างต้น และอ่างตามเผยแพร่โพรโทคอล (Nugent และ al., 2006) เป็นการปรับเปลี่ยนจาก Pelletieret al. (1983) วัฒนธรรมยิงได้เติบโตในหลายประเภทของวัฒนธรรมเรือเพื่อดูผล protoplast และฝ่ายความถี่ เปลือกงอกยิงวัฒนธรรมก่อตั้งขึ้นจากอายุ 10 วันกล้าไม้ถูกโอนย้ายไปเรือใบม่วง GA-7 (ซิกV8505), Phytacon เรือ (ซิก P-5557), ขวดแก้ว(145 มม. 85 มม. Phytotechnology Labs, C956) หรือแก้วไหด้วยvented ฝา ฝา vented ขวดแก้วถูกเตรียม โดยตัดการหลุม (3 cmdiameter) ในส่วนกลางของฝาโดยใช้ใบมีด scalpel และเสียบรูกับผ้าขนสัตว์ผ้าฝ้ายดูดซับ ทั้งหมดนี้ใช้กับสื่อเหมือนเรือวัฒนธรรม (MS + 30 กรัม /ซูโครส l + 4 g/l Phytagel) ยิงเหล่านี้มีรักษาวัฒนธรรมที่ 8C 25 ใต้ 16 h ไฟ/8 h แสงมืด Protoplastได้ดำเนินการทดลองแยกสามครั้งและทุกครั้งไปจากกล้าไม้เปลือกงอกใหม่ยิงวัฒนธรรม และinoculated ในภาชนะต่าง ๆ Protoplast นี้ถูกวัดกับ fluorescein diacetate (Widholm, 1972)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การแยกโปรโตพลาสต์เซลล์มีโซฟิลล์และเพาะแยกได้จากใบของต้น

วัฒนธรรมโตตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและเพาะเลี้ยงตาม
ตีพิมพ์โพรโทคอล ( นูเจนท์ et al . , 2006 ) โดยดัดแปลงจากเพลเลอเทียร์
et al . ( 1983 ) ยิงวัฒนธรรมที่ถูกปลูกในหลายประเภทของเรือวัฒนธรรม
เพื่อศึกษาผลต่อผลผลิตและจำนวนความถี่กอง

ยิงวัฒนธรรมก่อตั้งขึ้นจาก 10 วัน อายุต้นกล้างอก
ถูกย้ายให้มาเรือ ga-7 ( Sigma ,
v8505 ) phytacon เรือ ( Sigma , p-5557 ) , ขวดแก้ว
( 145mm  85mm phytotechnology , Labs , c956 ) หรือขวดแก้วด้วย
vented ฝา การระบายฝาขวดแก้วที่ถูกเตรียมไว้ โดยการตัด
( 3 cmdiameter ) หลุมในส่วนตรงกลางของเปลือกตา ใช้มีด ดาบและเสียบรูด้วยสำลีดูดซับ เรือทั้งหมดถูกใช้ด้วยเหมือนกัน
วัฒนธรรมปานกลาง ( MS 30 g /
L ปริมาณ 4 กรัม / ลิตร phytagel ) วัฒนธรรมยิงเหล่านี้รักษา
ที่ 25 8C ภายใต้ 16 H แสง / 8 ชั่วโมง สภาพแสงที่มืด . การแยกโปรโตพลาสต์
การทดลอง 3 ครั้ง และแต่ละครั้ง
ยิงใหม่วัฒนธรรม นำมาจากต้นกล้างอกและ
ปลูกในภาชนะบรรจุที่แตกต่างกัน โปรโตพลาสต์ของถูก
วัดได ซิเตที่ ( widholm , 1972 )