All 5 isolates used in this study w

All 5 isolates used in this study were tested with an interim PCR detection method (AP2) for AHPND bacteria that was recently released to the public (http://www.enaca.org/modules/library/publication.php?publication_id=1128).

The method was based on discovery of unique DNA sequences of V. parahaemolyticus AHPND isolates when compared to the DNA of a non-AHPND V. parahaemolyticus isolate.

The forward (F) and reverse (R) primer sets were AP2F: 5′-TCACCCGAATGCTCGCTTGTGG-3′; and AP2R: 5′-CGTCGCTACTGTCTA GCTGAAG-3′.

The cycling conditions were 5 min at 94 °C, followed by 25–30 cycles of 30 s denaturation at 94 °C, 30 s annealing at 60 °C and 60 s extension at 72 °C, plus a final 10 min extension at 72 °C. The amplified PCR products were analyzed in 2% agarose gels, stained with ethidium bromide, and visualized under UV transillumination.

AHPND positive samples give a positive band at approximately 700 bp.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทั้งหมด 5 แยกใช้ในการศึกษานี้ได้ทดสอบกับวิธีการชั่วคราว PCR ตรวจหา (AP2) สำหรับแบคทีเรีย AHPND ที่เพิ่งออกสู่สาธารณะ (http://www.enaca.org/modules/library/publication.php?publication_id=1128) วิธีการเป็นไปตามการค้นพบเฉพาะดีเอ็นเอลำดับของ V. parahaemolyticus AHPND ที่แยกได้เมื่อเปรียบเทียบกับดีเอ็นเอของแยก parahaemolyticus AHPND V. เป็น ข้างหน้า (F) และชุดรองพื้น (R) กลับถูก AP2F: 5′-TCACCCGAATGCTCGCTTGTGG-3′ และ AP2R: 5′ CGTCGCTACTGTCTA GCTGAAG 3′ สภาพขี่ได้ 5 นาทีที่ 94 ° C ตามรอบ 25-30 ของ 30 s denaturation ที่ 94 ° C, 30 s การอบเหนียวที่ 60 ° C และ 60 s ขยายที่ 72 ° C และส่วนขยายที่ 72 องศาเซลเซียส 10 นาทีสุดท้ายเป็น ผลิตภัณฑ์ PCR เอาต์ได้วิเคราะห์ใน 2% agarose เจ สีกับโบรไมด์ ethidium และ visualized ภายใต้ UV transillumination ตัวอย่างบวก AHPND ให้วงบวกที่ประมาณ 700 bp

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทั้งหมด 5 แยกที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้รับการทดสอบด้วยวิธี PCR การตรวจสอบระหว่างกาล (AP2) สำหรับแบคทีเรีย AHPND ที่ถูกปล่อยออกมาเมื่อเร็ว ๆ นี้ให้กับประชาชน (http://www.enaca.org/modules/library/publication.php?publication_id=1128 .) วิธีการที่อยู่บนพื้นฐานของการค้นพบของลำดับดีเอ็นเอที่เป็นเอกลักษณ์ของ V. parahaemolyticus AHPND แยกเมื่อเปรียบเทียบกับดีเอ็นเอที่ไม่ใช่ AHPND V. parahaemolyticus แยก. ไปข้างหน้า (F) และย้อนกลับ (R) ชุดไพรเมอร์เป็น AP2F: 5 ' -TCACCCGAATGCTCGCTTGTGG-3 '; และ AP2R: 5'-CGTCGCTACTGTCTA GCTGAAG-3 '. ขี่จักรยานเงื่อนไขที่ 5 นาทีที่ 94 ° C ตามด้วย 25-30 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติ 30 วินาทีที่ 94 องศาเซลเซียสการอบ 30 วินาทีที่ 60 องศาเซลเซียสและ 60 ของส่วนขยายที่ 72 ° C บวกเป็นครั้งสุดท้าย 10 นาทีส่วนขยายที่ 72 ° C ขยายผลิตภัณฑ์ PCR วิเคราะห์ใน 2% agarose เจล, ย้อมด้วย ethidium bromide และมองเห็นภายใต้แสงยูวี transillumination. AHPND ตัวอย่างในเชิงบวกให้เป็นวงดนตรีที่เป็นบวกที่ประมาณ 700 bp

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เสื้อผ้าวิคตอเรียเป็นที่โดดเด่นในรูปถ่าย , พิมพ์ , และบทความทุกอย่างที่ช่วยแต่งส่วนของหรูหราวิคตอเรียสุภาพสตรี สุภาพบุรุษ หรือ เด็ก สีสันแฟชั่นโชว์เสื้อผ้าพิมพ์โบราณศตวรรษที่ 19 จากระยะเวลาวิคตอเรีย ขั้นตอนโดยขั้นตอนเหรออธิบายเสื้อผ้าที่สวมใส่โดยผู้หญิงศตวรรษที่ 19 เริ่มต้นด้วยชุดชั้นในกับชุดของเธอ ค้นหาหมวกทองตัดกับ frills ,เสื้อผ้าวิคตอเรียเป็นที่โดดเด่นในรูปถ่าย , พิมพ์ , และบทความทุกอย่างที่ช่วยแต่งส่วนของหรูหราวิคตอเรียสุภาพสตรี สุภาพบุรุษ หรือ เด็ก สีสันแฟชั่นโชว์เสื้อผ้าพิมพ์โบราณศตวรรษที่ 19 จากระยะเวลาวิคตอเรีย ขั้นตอนโดยขั้นตอนเหรออธิบายเสื้อผ้าที่สวมใส่โดยผู้หญิงศตวรรษที่ 19 เริ่มต้นด้วยชุดชั้นในกับชุดของเธอ ค้นหาหมวกทองตัดกับ frills ,เสื้อผ้าวิคตอเรียเป็นที่โดดเด่นในรูปถ่าย , พิมพ์ , และบทความทุกอย่างที่ช่วยแต่งส่วนของหรูหราวิคตอเรียสุภาพสตรี สุภาพบุรุษ หรือ เด็ก สีสันแฟชั่นโชว์เสื้อผ้าพิมพ์โบราณศตวรรษที่ 19 จากระยะเวลาวิคตอเรีย ขั้นตอนโดยขั้นตอนเหรออธิบายเสื้อผ้าที่สวมใส่โดยผู้หญิงศตวรรษที่ 19 เริ่มต้นด้วยชุดชั้นในกับชุดของเธอ ค้นหาหมวกทองตัดกับ frills ,