2. Materials and methods2.1. Experi

2. Materials and methods
2.1. Experimental design
Three experiments were designed to test the possibility of early co-feeding of formulated diets for cobia larvae (period 8–18 dph) and to compare the effect of three formulated weaning diets for cobia juveniles (period 20–38 dph) in terms of growth performance, quality and survival. Each treatment was set up in three replicates randomly allocated in 200-L tanks which were connected to a bio-filter. Tanks were equipped with a central filter (200–500 µm mesh), aeration lines and dripping bottles for Artemia umbrella feeding as described by Nhu et al. (2009). All experiments were conducted in the marine hatchery of the Research Institute for Aquaculture No1 located in Nghe-an Province, Vietnam.
Three formulated feeds: Proton®, NRD® and an experimental diet were used from INVE Aquaculture NV (Dendermonde, Belgium). Different sizes of the diets were used according to the larval size and the manufacture's manuals such as Proton® 2 (150–300 µm), Proton® 3 (200–400 µm), Proton® 4 (300–500 µm), NRD 2/3 (200–300 µm), NRD 2/4 (200–400 µm) and NRD 3/5 (300–500 µm). The formulated experimental diet was extruded, ground and sieved into two size classes of 150–250 µm and 250–500 µm. Proton® and the experimental feed were used along with live food. From eight dph and 13 dph, Proton® and the experimental feed were tested in comparison to 18 dph as control. The treatments were named P1-D8, P2-D13 and P3-D18 for Proton®(experiment 1) and Ex1-D8, Ex2-D13 and Ex3-D18 for the experimental diet (experiment 2), indicating the diet and the day when it was first fed to the larvae. The experiments were terminated after 23 days rearing. For the juvenile stage, three treatments were named: Ex, PROTON and NRD according to the formulated diet that was fed (experiment 3). The objective of this experiment was to test the effect of those weaning diets on growth, survival and quality of cobia juvenile for the period 20–38 dph. The experiments were terminated after 18 days rearing in the same culture conditions.
The nutritional composition of the three formulated diets is shown in Table 1. Proton® is a commercial micro-particulated extruded diet that is designed for weaning marine fish larvae, substituting gradually for Artemia nauplii. From a nutritional point of view, Proton®is highly attractive due to the presence of free amino acids, high quality marine proteins, a high level of vitamin E, adequate levels of n-3 HUFA (30 mg g− 1 dry weight) and a DHA/EPA ratio of 2.0. NRD® is also a commercial micro-particulated extruded diet, designed for post-weaning and nursing phase. This product has a lower n-3 HUFA level, but a higher protein and lipid content compared to Proton®. The experimental diet contains a higher level of crude protein (62%), n-3 HUFA (35 mg g− 1 dry weight) content and DHA/EPA ratio (2.5), except for crude lipids (10%) compared to the two commercial diets. This diet was designed specially for cobia larvae based on suggestions from Faulk and Holt, 2003 and Faulk and Holt, 2008 that cobia larvae may require high levels of dietary n-3 HUFA especially DHA content and that high dietary lipid content is not effective for growth of cobia juveniles ( Chou et al., 2001 and Craig et al., 2006).
2.2. Larval rearing and feeding
Newly-hatched cobia larvae obtained from captive broodstock were volumetrically counted and randomly allocated to the tanks at a density of 50 larvae L− 1. Live food preparation and larval rearing were implemented according to Faulk and Holt, 2005 and Nhu et al., 2009, i.e. from 2 dph Nannochloropsis oculata was added and maintained at a density of 1 × 105 cell mL− 1, rotifers (Brachionus plicatilis) enriched with Protein Selco plus (INVE Aquaculture NV, Belgium) were introduced from 3 to 6 dph at a density of 10–12 rotifer mL− 1, and the umbrella-stage of Artemia franciscana (UAF) was introduced from 5 to 8 dph at a density of 2–3 umbrella mL− 1; Artemia nauplii enriched with A1 DHA Selco (INVE Aquaculture NV, Belgium) was added from eight dph at a density of 0.4–0.5 nauplii mL− 1. Photoperiod was set at 12 h dark: 12 h light. Every 4 h during the light period, live food density in the larval tanks was checked and eventually replenished. Dead larvae and other deposited waste were removed by siphoning during daily water exchange as of eight dph.
In experiments 1 and 2, Proton® or the experimental diet was manually distributed at a feeding frequency of four times day− 1. To encourage the ingestion of the formulated diet by the larvae, live food was only distributed 30 min following addition of the dry diet. The sizes of the formulated diets were adjusted according to the larvae size and user manual of the product. The formulated diets were given till satiation.
In experiment 3, cobia larvae were first reared in a production tank (3000 L) according to the procedure described above. At 20 dph, juveniles were manually graded and randomly allocated in nine experimental

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การออกแบบการทดลองสามการทดลองถูกออกแบบมาเพื่อทดสอบความเป็นไปได้ของต้นร่วมให้อาหารของอาหารสูตรสำหรับตัวอ่อนปลาช่อนทะเล (ระยะเวลา 8-18 DPH) และเปรียบเทียบผลของการหย่านมสามสูตรอาหารสำหรับหนุ่มสาวปลาช่อนทะเล (ระยะเวลา 20-38 DPH) ในแง่ การเจริญเติบโตของผลการดำเนินงานที่มีคุณภาพและความอยู่รอด
การรักษาแต่ละถูกจัดตั้งขึ้นในสามซ้ำสุ่มในถัง 200 ลิตรที่มีการเชื่อมต่อกับตัวกรองชีวภาพ ถังถูกติดตั้งด้วยตัวกรองกลาง (200-500 ตาข่ายไมครอน) สายการเติมอากาศและขวดหยดสำหรับการให้อาหารร่มอาร์ทีเมียตามที่อธิบายนูเอตอัล (2009) การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการในโรงเพาะฟักทะเลของสถาบันวิจัยเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ No1 อยู่ใน Nghe ข้อจังหวัดเวียดนาม.
สามสูตรฟีด: Proton®, NRD®และอาหารที่ถูกนำมาใช้ในการทดลองจากการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ inve เนวาดา (Dendermonde, เบลเยียม) ขนาดแตกต่างกันของอาหารถูกนำมาใช้ตามขนาดของตัวอ่อนและคู่มือการผลิตเช่นProton® 2 (150-300 ไมครอน), Proton® 3 (200-400 ไมครอน), Proton® 4 (300-500 ไมครอน), NRD 2 / 3 (200-300 ไมครอน), NRD 2/4 (200-400 ไมครอน) และ NRD 3/5 (300-500 ไมครอน) อาหารทดลองสูตรที่ได้รับการอัดพื้นดินและร่อนเป็นสองชั้นขนาด 150-250 ไมโครเมตรและ 250-500 ไมโครเมตร Proton®และฟีดทดลองใช้พร้อมกับอาหารสด จากแปด DPH และ 13 DPH, Proton®และฟีดทดลองได้รับการทดสอบในการเปรียบเทียบกับ 18 DPH เป็นตัวควบคุม การรักษาที่ถูกตั้งชื่อ P1-D8, D13-P2 และ P3-D18 สำหรับProton® (การทดลองที่ 1) และ EX1-D8, Ex2-D13 และ D18-EX3 สำหรับอาหารทดลอง (การทดลองที่ 2) ระบุว่าการรับประทานอาหารและวันที่ มันเป็นอาหารแรกที่ตัวอ่อน การทดลองยกเลิกหลังจาก 23 วันเลี้ยง สำหรับขั้นตอนที่เด็กและเยาวชนสามการรักษาชื่อ: อดีต PROTON และ NRD ตามสูตรอาหารที่เป็นอาหาร (ทดลอง 3) วัตถุประสงค์ของการทดลองนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อทดสอบผลกระทบของอาหารหย่านมผู้ที่อยู่ในการเจริญเติบโตของการอยู่รอดและคุณภาพของเด็กและเยาวชนปลาช่อนทะเลในช่วงเวลา 20-38 DPH การทดลองยกเลิกหลังจาก 18 วันที่เลี้ยงในสภาพวัฒนธรรมเดียวกัน.
องค์ประกอบทางโภชนาการของทั้งสามสูตรอาหารที่จะแสดงในตารางที่ 1 Proton®เป็นเชิงพาณิชย์ขนาดเล็กอัด particulated อาหารที่ถูกออกแบบมาสำหรับหย่านมตัวอ่อนปลาทะเลแทนค่อยๆ อาร์ทีเมีย จากจุดทางโภชนาการของมุมมองที่น่าสนใจProton®isสูงเนื่องจากมีกรดอะมิโนฟรีโปรตีนทางทะเลที่มีคุณภาพสูง, ระดับสูงของวิตามินอีในระดับที่เพียงพอ n-3 HUFA (30 มก. G- 1 น้ำหนักแห้ง) และ อัตราส่วน DHA / EPA 2.0 NRD®ยังเป็นเชิงพาณิชย์ particulated ไมโครอาหารอัดที่ออกแบบมาสำหรับการโพสต์หย่านมและเฟสพยาบาล ผลิตภัณฑ์นี้มีระดับ HUFA n-3 ลดลง แต่โปรตีนสูงและไขมันเมื่อเทียบกับProton® อาหารทดลองมีระดับที่สูงขึ้นของโปรตีน (62%), n-3 HUFA (35 มก. G- 1 น้ำหนักแห้ง) เนื้อหาและอัตรา DHA / EPA (2.5) ยกเว้นไขมันดิบ (10%) เมื่อเทียบกับทั้งสอง อาหารเชิงพาณิชย์ อาหารนี้ได้รับการออกแบบมาเป็นพิเศษสำหรับตัวอ่อนปลาช่อนทะเลอยู่บนพื้นฐานของข้อเสนอแนะจาก Faulk และโฮลท์ 2003 และ Faulk และโฮลท์ 2008 ที่ตัวอ่อนปลาช่อนทะเลอาจต้องใช้ระดับสูงของการบริโภคอาหารที่ n-3 HUFA โดยเฉพาะอย่างยิ่งเนื้อหาดีเอชเอและไขมันอาหารที่สูงไม่ได้มีประสิทธิภาพสำหรับการเจริญเติบโต ของหนุ่มสาวปลาช่อนทะเล (โจว et al., 2001 และเครก et al., 2006).
2.2 การอนุบาลและการให้อาหารตัวอ่อนปลาช่อนทะเลที่เพิ่งฟักที่ได้รับจากพ่อแม่พันธุ์ที่ถูกคุมขังนับ volumetrically และสุ่มกับรถถังที่ความหนาแน่น 50 ตัวอ่อน L- 1. การเตรียมอาหารสดและอนุบาลถูกนำมาใช้ตาม Faulk และโฮลท์ปี 2005 และนูเอต al., 2009 คือจาก 2 DPH Nannochloropsis oculata ถูกบันทึกและเก็บรักษาไว้ที่ความหนาแน่นของ 1 × 105 เซลล์ mL- 1, โรติเฟอร์ (Brachionus plicatilis) อุดมไปด้วยโปรตีน Selco บวก (inve เพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ NV, เบลเยียม) ถูกนำ 3-6 DPH ความหนาแน่น 10-12 โรติเฟอร์ mL- 1 และร่มขั้นตอนของการ franciscana อาร์ทีเมีย (UAF) ถูกนำ 5-8 DPH ความหนาแน่น 2-3 ร่ม mL- 1;
อาร์ทีเมียอุดมไปด้วย A1 DHA Selco (inve เพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ NV, เบลเยียม) ถูกบันทึกจากแปด DPH ความหนาแน่น 0.4-0.5 นอเพลียส mL- 1. ช่วงแสงตั้งอยู่ที่มืด 12 ชั่วโมง 12 ชั่วโมงแสง ทุก 4 ชั่วโมงในช่วงเวลาที่แสงความหนาแน่นของอาหารสดในถังตัวอ่อนได้รับการตรวจสอบและเติมเต็มในที่สุด ตัวอ่อนตายและเสียฝากอื่น ๆ ที่ถูกลบออกโดยการดูดในช่วงเปลี่ยนถ่ายน้ำทุกวันเป็นวันที่แปด DPH.
ในการทดลองที่ 1 และ 2 Proton®หรืออาหารทดลองถูกแจกจ่ายด้วยตนเองที่ความถี่ของการให้อาหารครั้งที่สี่ day- 1. เพื่อส่งเสริมการบริโภคของ อาหารสูตรโดยตัวอ่อนอาหารสดถูกเผยแพร่เพียง 30 นาทีต่อไปนอกเหนือจากอาหารแห้ง ขนาดของอาหารสูตรมีการปรับตามขนาดของตัวอ่อนและคู่มือการใช้ของผลิตภัณฑ์ ถูกอาหารสูตรจนได้รับการป้อยอ.
ในการทดลอง 3 ตัวอ่อนปลาช่อนทะเลได้รับการเลี้ยงดูเป็นครั้งแรกในการผลิตรถถัง (3,000 ลิตร) ตามขั้นตอนที่อธิบายข้างต้น ที่ 20 DPH หนุ่มสาวได้รับการจัดลำดับด้วยตนเองและสุ่มเก้าในการทดลอง