2.3.2. Extraction and clean-up
Analyses of maize and gluten meal were done according to
AOAC Official Methods 995.15 and 2001.04, respectively (AOAC
International, 2005), with some modifications.
Maize and gluten meal samples (25 g) were extracted with
100 mL methanol:water (75:25, v/v). Mixture was blended for
3 min at maximum speed (Osterizer Cycle Blend 10 Pulse Matic,
Sunbeam Products Inc., Boca Raton, FL, USA) and filtered afterwards
(Whatman N 4 filter).
Clean-up of maize samples: PuriTox® TC-F120 Fumonisin solid
phase extraction (SPE) strong anion exchange columns for clean-up
of maize samples were obtained from Trilogy Analytical Laboratory
(Washington, MO, USA).pH of filtered extract was adjusted to
5.8e6.0 with HCl 0.1 M. SPE columns were conditioned by passing
5 mL methanol followed by 5 mL methanol:water (75:25, v/v).
Extract (20 mL) was passed through the column at a flow rate of 1
drop per second. Column was washed with 5 mL methanol:water
(75:25, v/v) followed by 5 mL methanol. FBs were eluted with
10 mL methanol:acetic acid (99:1, v/v). Extract was evaporated at
60 C under vacuum.
Clean-up of gluten meal samples: Fumoniprep®immunoaffinity
chromatography columns (IAC) for clean-up of gluten meal samples
were obtained from R-BiopharmAG (Darmstadt, Germany). Filtered
extract (5 mL) was mixed with 20 mL PBS solution. pH of diluted
extract was adjusted to 7.0 with saturated NaOH solution, and
10 mL of this dilution were passed through the IAC at a flow rate of
1 drop per second. IAC was washed with 10 mL PBS, and FBs were
eluted with 2 mL methanol. Extract was evaporated at 60 C under
vacuum.
2.3.2 การสกัดและการทำความสะอาด
การวิเคราะห์ของข้าวโพดและ Gluten อาหารได้ทำตาม
AOAC วิธีการอย่างเป็นทางการ 995.15 และ 2,001.04 ตามลำดับ (AOAC
นานาชาติ 2005) ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง.
ข้าวโพดและตัวอย่าง gluten อาหาร (25 กรัม) ถูกสกัดด้วย
100 มลเมทานอล: น้ำ (75:25, v / v) ส่วนผสมที่ถูกผสมสำหรับ
3 นาทีที่ความเร็วสูงสุด (Osterizer วงจรผสม 10 ชีพจร Matic,
Sunbeam Products Inc. , Boca Raton, FL, USA) และกรองหลังจากนั้น
(Whatman 4 n กรอง?).
ทำความสะอาดของตัวอย่างข้าวโพด: PuriTox® TC -F120 ฟูโมนิซิของแข็ง
เฟสสกัด (SPE) ไอออนที่แข็งแกร่งคอลัมน์แลกเปลี่ยนสำหรับการทำความสะอาดขึ้น
ของกลุ่มตัวอย่างข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ที่ได้รับจากตอนจบวิเคราะห์ทางห้องปฏิบัติการ
(วอชิงตัน, MO, USA) .pH ของสารสกัดกรองปรับ
5.8e6.0 กับ HCl 0.1 เมตร คอลัมน์ SPE ถูกปรับอากาศโดยผ่าน
5 เมทานอลมิลลิลิตรตามด้วยเมทานอล 5 มล. น้ำ (75:25, v / v)
Extract (20 มิลลิลิตร) ก็ผ่านไปผ่านคอลัมน์ในอัตราการไหลของ 1
ลดลงต่อวินาที คอลัมน์ถูกล้างด้วย 5 มลเมทานอล: น้ำ
(75:25, v / v) ตามด้วยเมทานอลขนาด 5 ml FBs ถูกชะด้วย
10 มลเมทานอล: กรดอะซิติก (99: 1, v / v) สารสกัดระเหยที่
60 C ภายใต้สุญญากาศ?.
ทำความสะอาดของตัวอย่างอาหารตัง: Fumoniprep®immunoaffinity
คอลัมน์โครมาโต (IAC) สำหรับการทำความสะอาดขึ้นของกลุ่มตัวอย่าง gluten อาหาร
ที่ได้รับจาก R-BiopharmAG (Darmstadt, เยอรมนี) กรอง
สารสกัด (5 มิลลิลิตร) ผสมกับวิธีการแก้ปัญหา 20 มลพีบีเอส ค่า pH ของเจือจาง
สารสกัดปรับ 7.0 ด้วยสารละลาย NaOH อิ่มตัวและ
10 มิลลิลิตรเจือจางนี้ถูกส่งผ่าน IAC ที่อัตราการไหล
1 หยดต่อวินาที IAC ถูกล้างด้วย 10 มลพีบีเอสและ FBs ถูก
ชะมี 2 มลเมทานอล สารสกัดระเหยที่ 60 องศาเซลเซียสภายใต้
สูญญากาศ
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3.2 . การสกัดและทำความสะอาดการวิเคราะห์ของข้าวโพดและอาหารตัง ทำ ตามวิธีการอย่างเป็นทางการและไม่ 995.15 2001.04 ตามลำดับ ( องศา เซลเซียสนานาชาติ , 2005 ) มีการปรับเปลี่ยนและตัวอย่างอาหารตังข้าวโพด ( 25 กรัม ) ถูกสกัดด้วย100 ml เมทานอล : น้ำ ( 5 V / V ) ผสมผสมสำหรับ3 นาทีที่ความเร็วสูงสุด ( 10 รอบ osterizer ผสมผสานชีพจร Matic ,ยอดผลิตภัณฑ์อิงค์ , โบกาเรตัน , ฟลอริด้า , สหรัฐอเมริกา ) และกรอง หลังจากนั้น( whatman N 4 ไส้กรอง )ทำความสะอาดตัวอย่างข้าวโพด : puritox ® tc-f120 ฟูโมนิซินแข็งการสกัดด้วยเฟส ( SPE ) แข็งแรงแลกเปลี่ยนไอออนคอลัมน์สำหรับทำความสะอาดตัวอย่างข้าวโพดที่ได้จากห้องปฏิบัติการวิเคราะห์ตอนจบ( Washington , โม , USA ) pH ของสารสกัดกรองเชื่อมต่อ5.8e6.0 กับกรดไฮโดรคลอริก 0.1 เมตร สารปรับอากาศโดยผ่านคอลัมน์5 ml 5 มิลลิลิตรเมธาตามด้วยเมทานอล : น้ำ ( 5 V / V )สารสกัด ( 20 มล. ) คือผ่านคอลัมน์ที่อัตราการไหล 1ปล่อยต่อวินาที คอลัมน์ที่ถูกล้างด้วยเมทานอล : น้ำ 5 มิลลิลิตร( 5 , v / v ) ตามด้วย 5 มิลลิลิตรเมธานอล FBS มีตัวอย่างด้วย10 ml เมทานอล : กรดน้ำส้ม ( 99:1 , V / V ) ระเหยที่สกัด คือ60 C ภายใต้สุญญากาศทำความสะอาดของตัวอย่างอาหารตัง : fumoniprep ® immunoaffinityคอลัมน์โครมาโตกราฟี ( IAC ) ของตัวอย่างอาหารตังสำหรับทำความสะอาดได้จาก r-biopharmag ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) กรองสารสกัด ( 5 มิลลิลิตร ) ผสมกับ 20 ml PBS โซลูชั่น ด่างเจือจางสารสกัดปรับถึง 7.0 กับอิ่มตัวสารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ และ10 มล. เจือจางนี้ผ่าน IAC ที่อัตราการไหลของ1 หยดต่อวินาที IAC ซัก 10 ช่อง มล. และกลุ่มคือตัวอย่าง 2 มล เมทานอล สารระเหยที่เป็น 60 C ภายใต้สูญญากาศ
การแปล กรุณารอสักครู่..
