2.5. Cell culture, viability assay

2.5. Cell culture, viability assay and intervention
The mouse NIT-1 pancreatic β cells were provided by Department
of Immunology, Tongji Medical College, Huazhong University of
Science and Technology. The cells were cultured in RPMI-1640
medium supplemented with 10% FBS, 100 units/ml penicillin and
100 units/ml streptomycin and maintained at 37 1C in a humidified
atmosphere of 5% CO2 and 95% air. Mediums containing different
types of rat serum (10% low dose JLDG serum, 10% intermediate dose
JLDG serum, 10% high dose JLDG serum, 10% PIO serum) were prepared
to identify cytotoxicity by MTT assay.
NIT-1 cells were seeded at 5 103 cells per well in 96 well-culture
plates. After cells have adhered, the medium was replaced by serum
containing different dugs. The cell viability in the serum containing
different concentration of drugs was evaluated by MTT assay according
to manufacturer’s protocol. Under the conditions of this study, 10%
intermediate dose JLDG serum and 10% PIO serum had negligible
effect on cell viability (data not shown).
Approximately, 1 105
/ml cells were transferred into two 6-well
plates and allowed to grow overnight to 70% confluence. Then all
types of culture mediums were respectively replaced according to the
different cell groups as follows. The culture medium in control group
contained 10% FBS. The medium in model group contained PA
(0.25 mmol/l) and 0.5% BSA. The mediums in different treatment
groups as below also contained PA(0.25 mmol/l), respectively. Furthermore,
the medium in JLDG group contained 10% intermediate
dose JLDG serum. The medium in AICAR group contained AICAR
(0.5 mmol/l) and 0.5% BSA. The medium in Compound C group
contained 10% intermediate dose JLDG and Compound C (10 μmol/l).
The medium in PIO group contained 10% PIO serum. For the detection

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. เซลล์ทดสอบชีวิต วัฒนธรรม และการแทรกแซงเซลล์ตับอ่อนβนิด 1 เมาส์ได้จากกรมมหาวิทยาลัยหัวจงภูมิคุ้มกันวิทยา วิทยาลัยการแพทย์ถงจี้ ของวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี เซลล์ถูกล้างใน RPMI 1640สื่อเสริม ด้วย 10% FBS, 100 ยูนิต/มล.ยาเพนนิซิลลิน และstreptomycin 100 หน่วย/มล. และ 1C 37 ในการณอุณหภูมิบรรยากาศอากาศ 95% และ 5% CO2 สื่อที่ประกอบด้วยแตกต่างกันชนิดของหนูซีรั่ม (ซีรั่ม JLDG ขนาดต่ำ 10%, 10% ปริมาณระดับกลางJLDG ซีรั่ม ปริมาณสูง 10% JLDG ซีรั่ม ซีรั่ม 10% PIO) ถูกระบุพิษ โดย MTT assayนิด-1 เซลล์มีฟิตเนสที่เซลล์ 5 103 ต่อใน 96 ดี-วัฒนธรรมแผ่น หลังจากเซลล์ได้ปฏิบัติตาม สื่อถูกแทนที่ ด้วยเซรั่มประกอบด้วย dugs แตกต่างกัน ชีวิตเซลล์ในซีรั่มที่ประกอบด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของยาเสพติดประกอบ ด้วย MTT assay ตามโพรโทคอลของผู้ผลิต ภายใต้เงื่อนไขของการศึกษานี้ 10%เซรั่ม JLDG ปริมาณปานกลางและ 10% ซีรั่ม PIO มีเล็กน้อยผลกระทบในชีวิตเซลล์ (ไม่แสดงข้อมูล)ประมาณ 1 105/ml เซลล์ถูกโอนเข้าสอง 6-ดีแผ่น และอนุญาตให้เติบโต 70% ชุมนุมค้างคืน แล้วทั้งหมดประเภทของสื่อวัฒนธรรมถูกแทนที่ตามลำดับเซลล์ที่แตกต่างกันรวมเป็นดังนี้ สื่อวัฒนธรรมในกลุ่มควบคุมมีอยู่ 10% FBS สื่อในกลุ่มจำลองอยู่ป่า(0.25 มิลลิโมลต่อลิตร) และ 0.5% บีเอสเอ สื่อในการรักษาแตกต่างกันกลุ่มด้านล่างยังประกอบด้วย PA (0.25 mmol/l), ตามลำดับ นอกจากนี้สื่อในกลุ่ม JLDG มีอยู่ 10% ระดับกลางยาเซรั่ม JLDG สื่อในกลุ่ม AICAR อยู่ AICAR(0.5 mmol/l) และ 0.5% บีเอสเอ สื่อในกลุ่มสารประกอบ Cมีอยู่ 10% ปานกลางปริมาณ JLDG และสารประกอบ C (10 ไมโครโมล/ลิตร)สื่อในกลุ่ม PIO อยู่ 10% ซีรั่ม PIO สำหรับการตรวจสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การเพาะเลี้ยงเซลล์, การทดสอบความมีชีวิตและการแทรกแซง
เมาส์จู้จี้จุกจิก-1 เซลล์ตับอ่อนβมีให้โดยกรม
ของภูมิคุ้มกัน Tongji วิทยาลัยแพทย์มหาวิทยาลัย Huazhong
วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี เซลล์เพาะเลี้ยงใน RPMI-1640
ขนาดกลางเสริมด้วย 10% FBS 100 / หน่วย penicillin มล. และ
100 หน่วย / streptomycin มล. และการบำรุงรักษาที่ 37 1C ความชื้นใน
บรรยากาศของ 5% CO2 และอากาศ 95% สื่อที่มีแตกต่างกัน
ประเภทหนูเซรั่ม (10% ขนาดต่ำ JLDG ซีรั่ม 10% ปริมาณกลาง
JLDG ซีรั่ม 10% ปริมาณสูง JLDG ซีรั่ม 10% PIO ซีรั่ม) ได้จัดทำขึ้น
เพื่อแจ้งความเป็นพิษโดย MTT ทดสอบ.
นิตย์-1 เซลล์เมล็ดที่ 5 103 เซลล์ต่อได้ดีใน 96 วัฒนธรรมที่ดี
ของแผ่นเปลือกโลก หลังจากที่ได้ปฏิบัติตามเซลล์กลางก็ถูกแทนที่ด้วยเซรั่ม
ที่มี dugs ที่แตกต่างกัน มีชีวิตเซลล์ในซีรั่มที่มี
ความเข้มข้นแตกต่างกันของยาเสพติดได้รับการประเมินโดยการทดสอบ MTT ตาม
พิธีสารของผู้ผลิต ภายใต้เงื่อนไขของการศึกษาครั้งนี้ 10%
ปริมาณกลาง JLDG ซีรั่มและ 10% PIO ซีรั่มมีเล็กน้อย
ผลกระทบต่อชีวิตของเซลล์ (ไม่ได้แสดงข้อมูล).
ประมาณ 1 105
เซลล์ / มล. ถูกย้ายออกเป็นสอง 6 รวมทั้ง
แผ่นและได้รับอนุญาตที่จะเติบโตในชั่วข้ามคืน ถึง 70% บรรจบกัน แล้วสิ่งที่
ประเภทของสื่อวัฒนธรรมถูกแทนที่ตามลำดับตาม
กลุ่มเซลล์ที่แตกต่างกันดังต่อไปนี้ สื่อวัฒนธรรมในกลุ่มควบคุม
ที่มีอยู่ 10% FBS ขนาดกลางในกลุ่มที่มีรุ่น PA
(0.25 มิลลิโมล / ลิตร) และ 0.5% บีเอสเอ สื่อในการรักษาที่แตกต่างกัน
ในกลุ่มดังต่อไปนี้ยังมี PA (0.25 มิลลิโมล / ลิตร) ตามลำดับ นอกจากนี้
ขนาดกลางในกลุ่ม JLDG ที่มีอยู่ 10% กลาง
ยาเซรั่ม JLDG สื่อในกลุ่ม AICAR มี AICAR
(0.5 มิลลิโมล / ลิตร) และ 0.5% บีเอสเอ สื่อผสมในกลุ่ม C
ที่มีอยู่ 10% ปริมาณกลาง JLDG และสารประกอบ C (10 ไมโครโมล / ลิตร).
ขนาดกลางในกลุ่ม PIO มี 10% PIO ซีรั่ม สำหรับการตรวจสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การเพาะเลี้ยงเซลล์ด้วยวิธีชีวิตและการแทรกแซงเมาส์ nit-1 บีตาเซลล์ตับอ่อนได้รับจากกรมของวิทยาภูมิคุ้มกันวิทยาลัยแพทย์ Tongji Huazhong มหาวิทยาลัย ,วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี เซลล์เพาะเลี้ยงใน rpmi-1640อาหารสูตร MS ที่เสริมด้วย 10% FBS , 100 หน่วยต่อมิลลิลิตร เพนนิซิลิน และ100 หน่วยต่อมิลลิลิตรและ streptomycin ไว้ที่ 37 1C ใน humidifiedบรรยากาศของ CO2 ร้อยละ 5 และร้อยละ 95 อากาศ สื่อที่แตกต่างกันชนิดของหนู ซีรั่ม ( ซีรั่มขนาดต่ำ jldg 10% , 10% ขนาดกลางjldg เซรั่ม , เซรั่ม jldg ปริมาณ 10% , 10% Pio ) เตรียมเซรุ่มเพื่อระบุเซลล์โดย MTT assay พบnit-1 เซลล์ถูก seeded 5 103 เซลล์ต่อได้ดีใน 96 ด้วยวัฒนธรรมแผ่น หลังจากที่เซลล์ได้ปฏิบัติตาม สื่อถูกแทนที่ด้วยเซรั่มดักส์ที่มีแตกต่างกัน ที่เซลล์ในระดับที่มีความเข้มข้นที่แตกต่างกันของยา ที่ประเมินโดย MTT assay ตามขั้นตอนของผู้ผลิต ภายใต้เงื่อนไขของการศึกษานี้ 10%กลางขนาด jldg ซีรั่มซีรั่ม 10% ปิ๋วได้ เล็กน้อยผลต่อเซลล์ ( ข้อมูลไม่แสดง )ประมาณ 1 105เซลล์ / มิลลิลิตร ถูกโอนออกเป็นสอง 6-wellแผ่น และอนุญาตให้ขึ้นข้ามคืนถึง 70% บรรจบกัน แล้วทั้งหมดประเภทของสื่อวัฒนธรรมตามลำดับเปลี่ยนไปตามกลุ่มเซลล์ที่แตกต่างกัน ดังนี้ อาหารเพาะเชื้อในกลุ่มควบคุมที่มีอยู่ 10% FBS สื่อในรูปแบบของกลุ่มที่มีอยู่ ปา( 0.25 มิลลิโมล / ลิตร ) และ 0.5 % BSA . สื่อในการรักษาที่แตกต่างกันกลุ่มด้านล่างยังมี PA ( 0.25 มิลลิโมล / ลิตร ตามลำดับ นอกจากนี้สื่อใน jldg กลุ่มที่มีอยู่ 10% ระดับกลางขนาด jldg ซีรั่ม สื่อในกลุ่มที่มีอยู่ aicar aicar( 0.5 มิลลิโมล / ลิตร ) และ 0.5 % BSA . สื่อในสารประกอบกลุ่มซีที่มีอยู่ 10% กลางขนาด jldg และสารประกอบ C ( 10 μ mol / L )สื่อในกลุ่ม 10% Pio Pio ประกอบด้วย เซรั่ม สำหรับการตรวจสอบ