Encapsulation of biomolecules can revolutionize various technological advances such as drug delivery (Johnston et al., 2006, Labouta and Schneider, 2010 and Schneider et al., 2009) and signal amplification (Balabushevich et al., 2005, Caruso et al., 1998, Keighron and Keating, 2010, Labouta and Schneider, 2010, Schüler and Caruso, 2000, Tiourina et al., 2001 and Trau and Renneberg, 2003) because most of the active ingredients were securely protected inside the capsule. Accordingly, the fabrication of micro- or nanocapsules has been of great interest since the pioneering work from Donath et al. (1998) in the late twentieth century. A variety of nanomaterials, such as melamine–formaldehyde resin, silica nanoparticles, latex particles and gold nanoparticles, have been employed as templates for a wide range of capsule formulations (Balabushevich et al., 2005, Caruso et al., 1998, Donath et al., 1998, Peyratout and Dähne, 2004, Schärtl, 2000, Schneider and Decher, 2004 and Schneider and Decher, 2008). Typically, the capsule is produced by layer-by-layer (LBL) deposition of polyelectrolyte polymers around the surface of micro or nano-sized particle templates where the thickness of the shell is dependent on the number of layer deposited. The inner particle core is then dissolved by exposure to acid or solvent, forming a hollow structure (Balabushevich et al., 2005, Caruso, 2001, Johnston et al., 2006, Schärtl, 2000, Schneider and Decher, 2004, Schneider and Decher, 2008 and Schönhoff, 2003).
Gold nanoparticles (AuNPs), a versatile nanomaterial, have been intensively used in a variety of research areas including nucleic acid, protein and metal ions detection (Liu et al., 2009, Thaxton et al., 2006 and Wang and Ma, 2009). The popularity of AuNP is because (a) the particle size is controllable by a straightforward and well established synthesis protocol, (b) the surface charge allows further manipulation through charge–charge interaction, (c) AuNPs are compatible with most biomolecules and (d) it is easy to monitor particle aggregation by the naked eye through the color change due to the shift in the surface plasmon absorption band. Numerous attempts to use AuNPs as carrier sphere have been proposed by encapsulating the AuNP inside polyelectrolyte polymer layers (Gittins and Caruso, 2000, Gittins and Caruso, 2001, Keighron and Keating, 2010, Mayya et al., 2003, Peyratout and Dähne, 2004, Schneider and Decher, 2004, Schneider and Decher, 2008, Schneider et al., 2006 and Schneider et al., 2009). Previous work carried out by Gittins and Caruso (2001) showed the possibility of encapsulating AuNPs with oppositely charged polyelectrolytes using LBL deposition technique, although the AuNPs must be first functionalized with a thiol derivative to prevent particle aggregation. However, later work conducted by Schneider and Decher showed that it was possible to construct a nanocapsule from a single AuNP without further functionalization but with high stability using the same LBL principle (Schneider and Decher, 2004).
Listeria monocytogenes is considered to be one of the most harmful food-borne pathogenic bacteria apart from Salmonella spp. and Escherichia coli ( Lazcka et al., 2007). Acute infection of L. monocytogenes can lead to meningitis, encephalitis and pneumonia and eventually death ( Okutani et al., 2004). A fast and sensitive detection of this pathogen would be instrumental for early prevention of disease spreading. Although early detection of bacterial contamination using the classical technique enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) is available, the sensitivity of this technique is limited. Accordingly, amplifying the signal to improve the detection limit and accelerate the assay performance is an important analytical goal.
Instead of constructing a hollow capsule as in the early methods of making nanocapsules, we have developed a simpler method of encapsulation which does not require multi-layer polyelectrolyte deposition, core dissolution, or pH manipulation to achieve capsule loading. Here, we employed this LBL technique to stepwise encapsulate AuNPs and horseradish peroxidase (HRP) together within a single polyelectrolyte layer to provide signal amplification. The as-prepared nanocapsules were tested for ability to retain HRP in a real application for ELISA using L. monocytogenes as a model analyte. To make use of this nanocapsule as a signal carrier for the ELISA application, the antibody was adsorbed at the polymer layer of nanocapsule through electrostatic adsorption ( Caruso et al., 1997). The efficiency of the nanocapsules to enhance the detection signal was compared with a conventional ELISA using regular HRP labelled antibody.
Encapsulation ชื่อโมเลกุลชีวภาพสามารถ revolutionize ความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีต่าง ๆ เช่นการส่งยาเสพติด (จอห์นสตันและ al., 2006, Labouta และชไน เดอร์ 2010 และชไนเดอร์ et al., 2009) และขยายสัญญาณ (Balabushevich et al. ปี 2005 คารุสโซ่และ al., 1998, Keighron และคีทติง 2010, Labouta และชไนเดอร์ 2010, Schüler และคารุสโซ่ 2000, Tiourina และ al., 2001 และ Trau และ Renneberg, 2003) เนื่องจากส่วนใหญ่ของส่วนผสมใช้งานอยู่ได้อย่างปลอดภัยป้องกันภายในแคปซูลได้ ตาม ประดิษฐ์ไมโครหรือ nanocapsules แล้วน่าสนใจมากเนื่องจากการทำงานจาก Donath et al. (1998) ในปลายศตวรรษที่ยี่สิบ ของ nanomaterials เมลามีนฟอร์มาลดีไฮด์เรซิน ซิลิก้าเก็บกัก อนุภาคยาง และเก็บ กักทอง ได้รับจ้างเป็นแม่แบบสำหรับหลากหลายของแคปซูลสูตร (Balabushevich et al. ปี 2005 คารุสโซ่และ al., 1998, Donath และ al., 1998, Peyratout และ Dähne, 2004, Schärtl, 2000 ชไนเดอร์ และ Decher, 2004 และชไนเดอร์ และ Decher, 2008) โดยปกติ แคปซูลที่ผลิต โดยสะสม (LBL) เลเยอร์โดยเลเยอร์ของโพลิเมอร์ polyelectrolyte ทั่วพื้นผิวของอนุภาคขนาดเล็ก หรือ ขนาดนาโนแบบที่ความหนาของเปลือกจะขึ้นอยู่กับจำนวนชั้นของฝาก หลักภายในอนุภาคเป็นส่วนยุบแล้วจากการสัมผัสกับกรดหรือตัวทำละลาย การขึ้นรูปโครงสร้างกลวง (Balabushevich et al. ปี 2005 คารุสโซ่ 2001 จอห์นสตันและ al., 2006, Schärtl, 2000 ชไนเดอร์และ Decher, 2004 ชไนเดอร์ และ Decher, 2008 และ Schönhoff, 2003)ทองเก็บกัก (AuNPs), nanomaterial อเนกประสงค์ intensively ใช้หลายงานวิจัยรวมทั้งตรวจหาประจุของกรดนิวคลีอิก โปรตีน และโลหะ (หลิว et al., 2009, Thaxton และ al., 2006 และวัง และ Ma, 2009) นิยม AuNP ได้เนื่องจากขนาดอนุภาค (ก)ถูกควบคุม โดยโพรโทคอลที่สังเคราะห์ตรงไปตรงมา และดีขึ้น, (b) ประจุพื้นผิวให้จัดการต่อไปผ่านค่าธรรมเนียมค่าโต้ตอบ, (c) AuNPs กันชื่อโมเลกุลชีวภาพมากที่สุด และ (d) ซึ่งง่ายต่อการตรวจสอบรวมอนุภาค ด้วยตาเปล่าผ่านการเปลี่ยนแปลงสีจากกะในวง plasmon ผิวดูดซึม พยายามมากมายเพื่อใช้ AuNPs เป็นทรงกลมผู้ขนส่งได้รับการเสนอ โดย encapsulating AuNP ภายในชั้นของพอลิเมอร์ polyelectrolyte (Gittins และคารุ สโซ่ 2000, Gittins และคารุ สโซ่ 2001, Keighron และคีทติง 2010, Mayya et al., 2003, Peyratout และ Dähne, 2004 ชไนเดอร์และ Decher, 2004 ชไนเดอร์และ Decher, 2008 ชไนเดอร์และ al., 2006 และชไนเดอร์ et al., 2009) ก่อนหน้างาน Gittins และคารุสโซ่ (2001) แสดงให้เห็นว่าเป็นไปได้ของ encapsulating AuNPs กับ polyelectrolytes oppositely คิดค่าธรรมเนียมการใช้ LBL สะสมเทคนิค แม้ว่า AuNPs จะต้องถูกแรก functionalized กับอนุพันธ์ thiol เพื่อป้องกันอนุภาครวม อย่างไรก็ตาม ทำงานหลังจากชไนเดอร์และ Decher พบว่า เป็นไปได้ที่จะสร้าง nanocapsule จาก AuNP เดียว โดยไม่มี functionalization เพิ่มเติม แต่ มีเสถียรภาพสูงโดยใช้หลัก LBL เดียว (ชไนเดอร์และ Decher, 2004)ออลิ monocytogenes ถือเป็นหนึ่งอันตรายมากที่สุดเชื่อว่าอาหารอุบัติแบคทีเรียจากโอซัลและ Escherichia coli (Lazcka et al., 2007) ติดเชื้อเฉียบพลันของ L. monocytogenes สามารถทำให้เยื่อหุ้มสมองอักเสบ สมองอักเสบ และปอดบวม และตาย (Okutani et al., 2004) ตรวจสอบที่รวดเร็ว และมีความสำคัญของการศึกษานี้จะบรรเลงก่อนป้องกันการแพร่กระจายโรค แม้ว่าการตรวจหาการปนเปื้อนแบคทีเรียที่ใช้ทดสอบเอนไซม์ immunosorbent เชื่อมโยงเทคนิคคลาสสิก (ELISA) จะพร้อมใช้งาน ระดับความสำคัญของเทคนิคนี้คือจำกัด มือสัญญาณเพื่อเพิ่มขีดจำกัดการตรวจสอบ และเร่งประสิทธิภาพการทำงานวิเคราะห์ตาม มีเป้าหมายวิเคราะห์เป็นสำคัญแทนที่จะสร้างแคปซูลกลวงในวิธีแรกของการทำ nanocapsules เราได้พัฒนาวิธีง่ายกว่าการ encapsulation ซึ่งต้องสะสม polyelectrolyte หลายชั้น หลักยุบ หรือจัดการค่า pH เพื่อให้การโหลดแคปซูล ที่นี่ เราทำงานเทคนิคนี้ LBL การ stepwise ซ่อน AuNPs และ horseradish peroxidase (HRP) ร่วมกันภายในชั้นเดียว polyelectrolyte ให้ขยายสัญญาณ Nanocapsules เตรียมเป็นได้ทดสอบความสามารถในการเก็บ HRP ในใบสมัครจริง ELISA โดยใช้ L. monocytogenes analyte รุ่น ต้องใช้ของ nanocapsule นี้เป็นผู้ขนส่งสัญญาณสำหรับใช้ ELISA แอนติบอดีที่ถูก adsorbed ที่ชั้นพอลิเมอร์ของ nanocapsule ผ่านการดูดซับไฟฟ้าสถิต (คารุสโซ่และ al., 1997) ประสิทธิภาพของ nanocapsules ในการเพิ่มสัญญาณการตรวจจับถูกเปรียบเทียบกับ ELISA ธรรมดาที่ใช้ปกติ HRP มันแอนติบอดี
การแปล กรุณารอสักครู่..

encapsulation ของชีวโมเลกุลสามารถปฏิวัติความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีต่าง ๆ เช่น ยา ( Johnston et al . , 2006 และ 2010 และชไนเดอร์ชไนเดอร์ labouta , et al . , 2009 ) และขยายสัญญาณ ( balabushevich et al . , 2005 คารูโซ et al . , 1998 , และ keighron Keating , 2010 , labouta และ Schneider , 2010 , Sch และคณะ : คารูโซ , 2000 , tiourina et al . , 2001 และความชอกช้ำ และ renneberg ,2003 ) เพราะส่วนใหญ่ของส่วนผสมยังปลอดภัยป้องกันภายในแคปซูล ดังนั้นการประดิษฐ์ไมโคร หรือ นาโนแคปซูลที่ได้รับความสนใจอย่างมากเนื่องจากงานบุกเบิกจาก donath et al . ( 1998 ) ในศตวรรษที่ยี่สิบสาย ความหลากหลายของ nanomaterials เช่นเมลามีนฟอร์มาลดีไฮด์เรซิน และ อนุภาคนาโนซิลิกา , อนุภาคยางและอนุภาคนาโนทองคำได้ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับช่วงกว้างของแคปซูลสูตร ( balabushevich et al . , 2005 คารูโซ et al . , 1998 , donath et al . , 1998 , และ D และ peyratout hne , 2004 , Sch และ RTL , 2000 และ 2004 และ decher ชไนเดอร์ชไนเดอร์ และ decher , 2551 ) โดยทั่วไปแล้วแคปซูลผลิตโดยชั้นโดยชั้น ( lbl ) การสะสมของพอลิอิเล็กโทรไลต์พอลิเมอร์ทั่วพื้นผิวของอนุภาคนาโนขนาดจิ๋ว หรือแม่แบบที่ความหนาของเปลือกจะขึ้นอยู่กับจำนวนชั้นฝาก หลักของอนุภาคภายในแล้วละลายด้วยตัวทำละลายกรดหรือการสร้างโครงสร้างกลวง ( balabushevich et al . , 2005 , ซามูเอล , 2001 , Johnston et al . , 2006ขอราคาและ RTL , 2000 , และชไนเดอร์ชไนเดอร์ decher 2004 และ 2008 และ decher Sch ö nhoff , 2003 ) ของอนุภาคนาโนของทอง
( aunps ) , วัสดุนาโนเอนกประสงค์ที่ได้รับและใช้ในความหลากหลายของพื้นที่วิจัย ได้แก่ กรดนิวคลีอิกและโปรตีนไอออนโลหะตรวจจับ ( Liu et al . , 2009 thaxton et al . , 2006 และวังและ MA , 2009 )ความนิยมของ aunp เพราะ ( ก ) ขนาดของอนุภาคสามารถควบคุมได้โดยตรงไปตรงมาและจัดตั้งขึ้นรวมทั้งการสังเคราะห์ของโปรโตคอล ( B ) ประจุพื้นผิวช่วยให้การจัดการค่าใช้จ่ายและค่าใช้จ่ายเพิ่มเติมผ่านการโต้ตอบ( C ) aunps เข้ากันได้กับสารชีวโมเลกุล ที่สุด และ ( ง ) มันเป็นเรื่องง่ายที่จะตรวจสอบการรวมอนุภาคด้วยตาเปล่าผ่านเปลี่ยนสีเนื่องจากการเปลี่ยนแปลงในพื้นผิว PLASMON การดูดซึมวง พยายามมากมายที่จะใช้ aunps เป็นผู้ให้บริการที่ได้รับการเสนอโดยทรงกลมห่อหุ้มที่ aunp ข้างในชนิดพอลิเมอร์ ( จิตทินส์ และชั้นคารูโซ , 2000 , 2001 , จิตทินส์ และ คารูโซและ keighron Keating , 2010 , mayya et al . , 2003 , และ D และ peyratout hne 2004 และ decher ชไนเดอร์ชไนเดอร์ decher 2004 และ 2008 , ชไนเดอร์ et al . , 2006 และชไนเดอร์ et al . , 2009 ) ผลงานที่ผ่านมาที่ดำเนินการโดยจิตทินส์ และ คารูโซ ( 2001 ) แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของ aunps ห่อหุ้มด้วย polyelectrolytes โดยใช้เทคนิคการเคลือบ lbl ในทางตรงข้ามกันเสีย ,แม้ว่า aunps ต้องแรกกับอนุพันธ์ที่มีขนาดเพื่อป้องกันการรวมตัวของอนุภาค อย่างไรก็ตาม ภายหลังงาน จัดโดย ชไนเดอร์ decher และพบว่ามันเป็นไปได้ที่จะสร้างนาโนแคปซูลจาก aunp เดียวโดยไม่ functionalization เพิ่มเติม แต่ที่มีความมั่นคงสูง โดยใช้หลักการเดียวกัน ( และ lbl ชไนเดอร์ decher , 2004 ) .
วงแหวนแวนอัลเลนจะถือว่าเป็นหนึ่งในอาหารที่เป็นอันตรายมากที่สุดรับเชื้อโรคแบคทีเรียนอกเหนือจากซัลโมเนลลาและ Escherichia coli ( lazcka et al . , 2007 ) การติดเชื้อเฉียบพลันของ L . monocytogenes อาจทำให้เยื่อหุ้มสมองอักเสบ สมองอักเสบ และปอดบวม และตายในที่สุด ( okutani et al . , 2004 )การตรวจสอบที่รวดเร็วและความไวของเชื้อนี้จะบรรเลง เพื่อป้องกันต้นของโรคแพร่กระจาย แม้ว่าการตรวจหาการปนเปื้อนของแบคทีเรียโดยใช้เทคนิคเอนไซม์ลิงค์คลาสสิก immunosorbent assay ( ELISA ) ก่อนมี ความไวของเทคนิคนี้มีจำกัด ตามขยายสัญญาณเพื่อเพิ่มขีดจำกัด และเร่งประสิทธิภาพในการเป็นเป้าหมายสำคัญ
แทนการสร้างแคปซูลกลวงในวิธีการแรกของการนาโนแคปซูล เราได้พัฒนาวิธีที่ง่ายกว่าของ encapsulation ซึ่งไม่ต้องใช้วิธีการตกตะกอนสะสม , แกนยุบ หรือค่าจัดการเพื่อให้บรรลุบรรจุแคปซูล ที่นี่เราใช้เทคนิคนี้เพื่อ lbl แบบแค็ปซูลมะรุมและ aunps peroxidase ( HRP ) ด้วยกันภายในชั้นชนิดเดียวที่จะให้ขยายสัญญาณ นาโนแคปซูลที่เตรียมทดสอบความสามารถในการรักษา HRP ในการประยุกต์ใช้จริง C + + ใช้ L . monocytogenes เป็นครูต้นแบบ การใช้ประโยชน์ของนาโนแคปซูลนี้เป็นสัญญาณพาหะสำหรับการประยุกต์ใช้ Elisa ,แอนติบอดีที่ดูดซับในชั้นของการดูดซับด้วยพอลิเมอร์นาโนแคปซูลไฟฟ้าสถิต ( คารูโซ et al . , 1997 ) ประสิทธิภาพของนาโนแคปซูลเพื่อเพิ่มสัญญาณตรวจจับเมื่อเทียบกับแบบ ELISA โดยใช้ HRP ปกติที่มีแอนติบอดี
การแปล กรุณารอสักครู่..
