Animals Ten clinically healthy young adult cynomolgus monkeys, each weighing 1.5–6.0 kg, were provided for use in this study by the Non-Human Primates Breeding Service Centre (CECAL) of the Oswaldo Cruz Foundation (Fiocruz), Rio de Janeiro, Brazil. The study protocol was approved (L-0033/07) by the Ethics Committee for Animal Use (CEUA), Fiocruz, and was conducted in strict accordance with the recommendations from the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals of the Brazilian Society of Science in Laboratory Animals (SBCAL) and the National Council for Control of Animal Experimentation (CONCEA, Brazil). The animals that were selected for the study were free of simian immunodeficiency virus (SIV) and simian type D retrovirus (SRV/D). They were also negative for anti-HEV IgG in their sera and had no inflammatory changes in their pre-study liver biopsies. During the study and quarantine periods, the monkeys were maintained at Animal Biosafety Level 2 in CECAL, Fiocruz, and were kept individually in stainless steel squeeze-back cages in a climate-controlled room (temperature of 22 ± 1°C and humidity 55 ± 5%) with a 12 h light/dark cycle.
Inocula The Brazilian swine HEV (Br-swine) genotype 3b (GenBank EF591853.1) strain was isolated from a faecal suspension that was obtained from a naturally infected pig from a commercial farm in Rio de Janeiro state [12]. The Dutch swine HEV (D-swine) genotype 3 (GenBank DQ996399) strain, which was kindly supplied by the Central Veterinary Institute of Wageningen University and Research Centre, the Netherlands, was obtained from an experimentally infected pig [23].
The Brazilian human HEV (Br-human) genotype 3b (GenBank GQ421465) strain was isolated from a 1-ml serum sample that was obtained from a 30-year-old male with acute hepatitis E [26]. The Argentinean human HEV (Ar-human) sample was kindly provided by the Dr. Carlos Malbran Institute, Buenos Aires, and was prepared from a pool of 1 ml of serum and the faeces of a 3-month-old female with fulminant acute hepatic failure (Table 1). This study was approved by the institutional review boards (CEP-Fiocruz No. 22/03), and a signed informed consent form was obtained from each participant.
สัตว์สิบสุขภาพทางการแพทย์หนุ่มลิงผู้ใหญ่ cynomolgus แต่ละชั่งน้ำหนัก 1.5-6.0 กิโลกรัมมีให้สำหรับใช้ในการศึกษาครั้งนี้โดยบิชอพไม่ใช่มนุษย์พันธุ์ศูนย์บริการ (cecal) ของ Oswaldo cruz รากฐาน (fiocruz), Rio de Janeiro, บราซิล โปรโตคอลการศึกษาได้รับการอนุมัติ (l-0033/07) โดยคณะกรรมการจริยธรรมสำหรับการใช้สัตว์ (ceua) fiocruz,และได้ดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำจากคู่มือสำหรับการดูแลและการใช้สัตว์ทดลองของสังคมบราซิลของวิทยาศาสตร์ในสัตว์ทดลอง (sbcal) และสภาแห่งชาติในการควบคุมของการทดลองสัตว์ (concea, บราซิล)สัตว์ที่ถูกเลือกสำหรับการศึกษามีอิสระของไวรัสโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องเหมือนลิง (SIV) และชนิดเหมือนลิงง retrovirus (srv / วัน) พวกเขาก็ยังมีเชิงลบสำหรับป้องกัน HEV-IgG ในซีรั่มของพวกเขาและไม่มีการเปลี่ยนแปลงการอักเสบใน biopsies ตับก่อนการศึกษาของพวกเขา ในระหว่างการศึกษาและระยะเวลาการกักกันลิงถูกคงอยู่ในระดับความปลอดภัยทางชีวภาพของสัตว์ที่ 2 ใน cecal, fiocruz,และถูกเก็บไว้เป็นรายบุคคลในสแตนเลสกรงบีบกลับอยู่ในห้องที่มีการควบคุมสภาพภูมิอากาศ (อุณหภูมิ 22 ± 1 องศาเซลเซียสและความชื้น 55 ± 5%) ที่มีแสง 12 ชั่วโมง / รอบมืด.
เชื้อตั้งต้น HEV หมูบราซิล (BR- หมู) จีโนไทป์ 3b (genbank ef591853.1) สายพันธุ์ที่แยกได้จากอุจจาระระงับที่ได้รับจากการติดเชื้อตามธรรมชาติหมูจากฟาร์มเชิงพาณิชย์ในรัฐริโอเดจาเนโร [12]HEV หมูดัตช์ (ง-หมู) จีโนไทป์ 3 (dq996399 genbank) สายพันธุ์ซึ่งได้รับการจัดจำหน่ายโดยละม่อมสถาบันสัตวแพทย์กลางของมหาวิทยาลัย Wageningen และศูนย์การวิจัยที่เนเธอร์แลนด์ได้จากหมูที่ติดเชื้อทดลอง [23].
HEV มนุษย์บราซิล (BR มนุษย์) 3b จีโนไทป์ (genbank gq421465) สายพันธุ์ที่แยกได้จากตัวอย่างซีรั่ม 1 มล. ที่ได้รับมาจากชาย 30 ปีด้วยโรคไวรัสตับอักเสบอีเฉียบพลัน [26] HEV มนุษย์อาร์เจนตินา (ar มนุษย์) กลุ่มตัวอย่างถูกจัดให้กรุณาโดยดร carlos สถาบัน malbran บัวโนสไอเรสและได้รับการจัดทำขึ้นจากสระว่ายน้ำ 1 มิลลิลิตรของเลือดและอุจจาระของเพศหญิง 3 เดือนความเก่าแก่กับความล้มเหลวตับวายเฉียบพลันรุนแรง (ตารางที่ 1) การศึกษาครั้งนี้ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการทบทวนสถาบัน (CEP-fiocruz ไม่. 22/03) และรูปแบบที่ได้รับความยินยอมลงนามที่ได้รับแจ้งจากผู้เข้าร่วมแต่ละ.
การแปล กรุณารอสักครู่..
