2. Material and methods2.1. Bacteri

2. Material and methods
2.1. Bacterial strains and propagation
Commercial freeze-dried mesophilic lactic culture Choozit™
MA 16 LYO 25 DCU from Danisco (kindly provided by Larbus S.A.,
Madrid, Spain), with no gas production, and consisting of limited
Lactococcus lactis subsp. lactis and cremoris strains, was used in
cheese-making. The packet of MA 16 was resuspended in reconstituted
skim milk to achieve a lactococci concentration of
4 109 cfu/mL, aliquoted and frozen at 40 C until use. The day
before cheese-making, one aliquot was thawed and used to inoculate
at 0.1% reconstituted skim milk and incubated at 30 C for
18 h.
C. tyrobutyricum INIA 68, C. beijerinckii INIA 63 and C. sporogenes
INIA 71 were isolated from Manchego cheeses with pronounced
late blowing defect (Garde, Arias, et al., 2011, Garde, Avila, et al.,
2012; Garde, Gaya, Arias, & Nu~nez, 2012). These strains were
selected on the basis that they were some of the best candidates to
reproduce LBD in trial cheeses because they presented different
pulsotypes represented by several isolates which produced high
amounts of gas and butyric acid in milk and in Bryant and Burkey
broth (containing sodium lactate). C. tyrobutyricum CECT 4011 and
C. butyricum CECT 361 were obtained from the Spanish Type
Culture Collection (Coleccion Espa~nola de Cultivos Tipo, CECT,
Valencia, Spain). Given the ability of C. tyrobutyricum CECT 4011 to
cause LBD in a similar type of cheese (Gomez-Torres, Avila, Gaya, &
Garde, 2014) we included this strain as a positive control of
development of LBD. All Clostridium strains were maintained
at 80 C in Reinforced Clostridial Medium (RCM, Difco, Detroit,
USA) with 5% glycerol and subcultured in RCM and incubated at
37 C for 48 h in anaerobic jars with an H2 plus CO2 generating kit
(AnaeroGen, Oxoid, Basingstoke, UK) before spore preparation.
2.2. Spore preparation
Spores of all Clostridium strains were obtained after incubation
at 37 C for 3 days under anaerobic conditions. Spores of
C. tyrobutyricum CECT 4011 and INIA 68, and C. sporogenes INIA 71
were prepared by inoculation in modified RCM (without agar and
sodium acetate), and spores of C. beijerinckii INIA 63 and
C. butyricum CECT 361 were obtained by inoculation in Bryant and
Burkey broth (Merck, Darmstadt, Germany) and in BHI (Biolife,
Milano, Italy), respectively. After centrifugation (5000 g, 15 min,
20 C), the pellets were washed twice with sterile distilled water
and resuspended in reconstituted skimmed milk. Spore suspensions
were maintained at 40 C until their use in cheese manufacture.
The spore concentrations in the suspensions were
determined, after heat treatment (80 C, 20 min), on RCM agar
(1.5%, w/v) after anaerobic incubation at 37 C for 3 days. Concentration
of spore suspensions ranged from 107 to 109 spores/mL.
2.3. Cheese manufacture
Cheeses were manufactured from pasteurized (72 C for 15 s)
ewe milk from the Manchega breed in duplicate experiments,
carried out on different days. The Manchega herd was fed with
home-made feed and vetch hay, and no silage was included in the
diet. Milk samples showed mean values of 8.34% total fat, 6.34%
total protein, 20.21% dry matter (DM), 5.40 104 total bacteria cfu/
mL and 1.85 102 coliforms cfu/mL. Each experiment consisted of
six vats, each containing 1.2 L of milk, which was heated at 32 C.
Calcium chloride and commercial starter MA 16 cultured in skimmed
milk were added at 0.01% and 1% (approximately 107 cfu/mL),
respectively, to all vats. Vats 2-6 were deliberately contaminated
with approximately 104 spores/mL of C. tyrobutyricum CECT 4011
and INIA 68, C. butyricum CECT 361, C. beijerinckii INIA 63 and
C. sporogenes INIA 71, respectively. Faultless control cheese from vat
1 was not contaminated with any clostridia. Powdered calf rennet
(0.025 g/L milk, 1:150,000 strength, chymosin 94%, bovine pepsin
6%; Laboratorios Arroyo, Santander, Spain) was added to all vats
20 min later. After 40 min, the curds were cut into 6e8 mm cubes
and scalded at 38 C for 15 min. Whey was drained off through a
colander with a cheesecloth, followed by a light hand pressure, and
each curd was distributed into one cylindrical mold with holes. The
cheeses were pressed overnight at 20 C and 0.015 kg/cm2 pressure
to drain excess of whey out the holes of the molds. One cheese, of
approximately 200 g in weight, was obtained from each vat. After
pressing, cheeses were vacuum packed in two multilayer plastic
barrier bags of 42 mm (Cryovac HT3050; 200 300 mm; permeability
to oxygen ¼ 15 cm3 m2 day1 bar1 at 23 C and 0%
RH, Cryovac Sealed Air Corporation, Milano, Italy) and ripened at
14 C for 60 d.

2. Material and methods
2.1. Bacterial strains and propagation
Commercial freeze-dried mesophilic lactic culture Choozit™
MA 16 LYO 25 DCU from Danisco (kindly provided by Larbus S.A.,
Madrid, Spain), with no gas production, and consisting of limited
Lactococcus lactis subsp. lactis and cremoris strains, was used in
cheese-making. The packet of MA 16 was resuspended in reconstituted
skim milk to achieve a lactococci concentration of
4  109 cfu/mL, aliquoted and frozen at 40 C until use. The day
before cheese-making, one aliquot was thawed and used to inoculate
at 0.1% reconstituted skim milk and incubated at 30 C for
18 h.
C. tyrobutyricum INIA 68, C. beijerinckii INIA 63 and C. sporogenes
INIA 71 were isolated from Manchego cheeses with pronounced
late blowing defect (Garde, Arias, et al., 2011, Garde, Avila, et al.,
2012; Garde, Gaya, Arias, & Nu~nez, 2012). These strains were
selected on the basis that they were some of the best candidates to
reproduce LBD in trial cheeses because they presented different
pulsotypes represented by several isolates which produced high
amounts of gas and butyric acid in milk and in Bryant and Burkey
broth (containing sodium lactate). C. tyrobutyricum CECT 4011 and
C. butyricum CECT 361 were obtained from the Spanish Type
Culture Collection (Coleccion Espa~nola de Cultivos Tipo, CECT,
Valencia, Spain). Given the ability of C. tyrobutyricum CECT 4011 to
cause LBD in a similar type of cheese (Gomez-Torres, Avila, Gaya, &
Garde, 2014) we included this strain as a positive control of
development of LBD. All Clostridium strains were maintained
at 80 C in Reinforced Clostridial Medium (RCM, Difco, Detroit,
USA) with 5% glycerol and subcultured in RCM and incubated at
37 C for 48 h in anaerobic jars with an H2 plus CO2 generating kit
(AnaeroGen, Oxoid, Basingstoke, UK) before spore preparation.
2.2. Spore preparation
Spores of all Clostridium strains were obtained after incubation
at 37 C for 3 days under anaerobic conditions. Spores of
C. tyrobutyricum CECT 4011 and INIA 68, and C. sporogenes INIA 71
were prepared by inoculation in modified RCM (without agar and
sodium acetate), and spores of C. beijerinckii INIA 63 and
C. butyricum CECT 361 were obtained by inoculation in Bryant and
Burkey broth (Merck, Darmstadt, Germany) and in BHI (Biolife,
Milano, Italy), respectively. After centrifugation (5000 g, 15 min,
20 C), the pellets were washed twice with sterile distilled water
and resuspended in reconstituted skimmed milk. Spore suspensions
were maintained at 40 C until their use in cheese manufacture.
The spore concentrations in the suspensions were
determined, after heat treatment (80 C, 20 min), on RCM agar
(1.5%, w/v) after anaerobic incubation at 37 C for 3 days. Concentration
of spore suspensions ranged from 107 to 109 spores/mL.
2.3. Cheese manufacture
Cheeses were manufactured from pasteurized (72 C for 15 s)
ewe milk from the Manchega breed in duplicate experiments,
carried out on different days. The Manchega herd was fed with
home-made feed and vetch hay, and no silage was included in the
diet. Milk samples showed mean values of 8.34% total fat, 6.34%
total protein, 20.21% dry matter (DM), 5.40  104 total bacteria cfu/
mL and 1.85  102 coliforms cfu/mL. Each experiment consisted of
six vats, each containing 1.2 L of milk, which was heated at 32 C.
Calcium chloride and commercial starter MA 16 cultured in skimmed
milk were added at 0.01% and 1% (approximately 107 cfu/mL),
respectively, to all vats. Vats 2-6 were deliberately contaminated
with approximately 104 spores/mL of C. tyrobutyricum CECT 4011
and INIA 68, C. butyricum CECT 361, C. beijerinckii INIA 63 and
C. sporogenes INIA 71, respectively. Faultless control cheese from vat
1 was not contaminated with any clostridia. Powdered calf rennet
(0.025 g/L milk, 1:150,000 strength, chymosin 94%, bovine pepsin
6%; Laboratorios Arroyo, Santander, Spain) was added to all vats
20 min later. After 40 min, the curds were cut into 6e8 mm cubes
and scalded at 38 C for 15 min. Whey was drained off through a
colander with a cheesecloth, followed by a light hand pressure, and
each curd was distributed into one cylindrical mold with holes. The
cheeses were pressed overnight at 20 C and 0.015 kg/cm2 pressure
to drain excess of whey out the holes of the molds. One cheese, of
approximately 200 g in weight, was obtained from each vat. After
pressing, cheeses were vacuum packed in two multilayer plastic
barrier bags of 42 mm (Cryovac HT3050; 200  300 mm; permeability
to oxygen ¼ 15 cm3  m2  day1  bar1 at 23 C and 0%
RH, Cryovac Sealed Air Corporation, Milano, Italy) and ripened at
14 C for 60 d.

0/5000

จาก: -

เป็น: -

ผลลัพธ์ (ไทย) 1: [สำเนา]

คัดลอก!

2. วัสดุและวิธีการ2.1. แบคทีเรียสายพันธุ์และเผยแพร่กรอบ mesophilic พาณิชย์วัฒนธรรมแล็กติก Choozit ™MA 16 DCU LYO 25 จาก Danisco (กรุณาโดย Larbus S.A.มาดริด สเปน), มีการผลิตก๊าซไม่ จำกัด(มหาชน)ประกอบด้วยLactococcus lactis ถั่ว lactis และ cremoris สายพันธุ์ ถูกใช้ในชีทำ ห่อ MA 16 ถูก resuspended ใน reconstitutedskim นมเพื่อให้ได้ความเข้มข้น lactococci ของ4 109 cfu/mL, aliquoted และน้ำแข็งที่ 40 C จนกว่าจะใช้ วันก่อนที่จะทำชีส ส่วนลงตัวหนึ่ง thawed และใช้ฉีดที่ 0.1% reconstituted skim นม และ incubated ที่ C 30 สำหรับ18 hC. tyrobutyricum INIA 68, beijerinckii C. INIA 63 และ C. sporogenesINIA 71 ถูกแยกต่างหากจากเนยแข็ง Manchego กับออกเสียงสายเป่าความบกพร่อง (Garde, Arias, et al. 2011 Garde หมู่ et al.,2012 Garde กาย่า Arias และ Nu ~ nez, 2012) สายพันธุ์เหล่านี้ได้เลือกตามที่อยู่ของผู้สมัครที่ดีที่สุดเพื่อสร้าง LBD ในเนยแข็งที่ทดลองใช้เนื่องจากพวกเขานำเสนอแตกต่างกันpulsotypes แทน ด้วยหลายแยกการผลิตสูงก๊าซและกรด butyric ในนม และไบรอันท์และ Burkeyซุป (ประกอบด้วยโซเดียม lactate) C. tyrobutyricum CECT 4011 และC. butyricum CECT 361 ได้รับมาจากชนิดของสเปนวัฒนธรรมชุด (Colecci บน Espa ~ เด nola Cultivos Tipo, CECTValencia สเปน) กำหนดความสามารถของ C. tyrobutyricum CECT 4011 การทำ LBD เป็นชนิดที่คล้ายกันของชี (G omez-ทอร์เรส หมู่ กาย่า &Garde, 2014) เรารวมนี้ต้องใช้เป็นตัวควบคุมค่าบวกของพัฒนา LBD มีการเก็บรักษาสายพันธุ์เชื้อ Clostridium ทั้งหมดที่ 80 C ในเสริม Clostridial (RCM, Difco ดี ทรอยต์สหรัฐอเมริกา) กับ 5% กลีเซอร subcultured ใน RCM และ incubated ที่C 37 สำหรับ h 48 ในขวดที่ไม่ใช้ออกซิเจนมีชุดสร้าง CO2 และ H2(AnaeroGen, Oxoid, Basingstoke, UK) ก่อนเตรียมสปอร์2.2 เตรียมสปอร์เพาะเฟิร์นของสายพันธุ์เชื้อ Clostridium ทั้งหมดได้รับหลังจากบ่มที่ 37 C 3 วันภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน เพาะเฟิร์นของC. tyrobutyricum CECT 4011 และ INIA 68 และ C. sporogenes INIA 71ถูกเตรียม โดย inoculation ใน RCM แก้ไข (โดย agar และโซเดียม acetate), และเพาะเฟิร์นของ C. beijerinckii INIA 63 และC. butyricum CECT 361 ได้รับ โดย inoculation ในไบรอันท์ และซุป burkey (เมอร์ค ดาร์มส เยอรมนี) และ ใน BHI (Biolifeมิลาโน อิตาลี), ตามลำดับ หลังจาก centrifugation (5000 g, 15 นาที20 C), ขี้ถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อสองและ resuspended ในนมขาดมันเนย reconstituted บริการสปอร์มีรักษาที่ 40 C จนกว่าผลิตใช้ในชีมีความเข้มข้นของสปอร์ในพักกำหนด หลังจากความร้อนบำบัด (80 C, 20 นาที), RCM agar(1.5%, w/v) หลังจากไม่ใช้บ่มที่ 37 C 3 วัน ความเข้มข้นของบริการสปอร์ที่อยู่ในช่วงจาก 107 การเพาะเฟิร์น 109 mL2.3. ชีสผลิตเนยแข็งที่ผลิตจาก pasteurized (C 72 15 s)นม ewe จากสายพันธุ์ Manchega ในการทดลองซ้ำดำเนินในวันต่าง ๆ ฝูง Manchega ถูกเลี้ยงด้วยอาหารที่ทำที่บ้าน และเฮย์ vetch และไซเลจต่อไม่รวมอยู่ในการอาหาร นมตัวอย่างพบว่าค่าเฉลี่ยของไขมันทั้งหมด 8.34%, 6.34%โปรตีนรวม 20.21% แห้งราคาเรื่อง (DM) 5.40 104 รวมแบคทีเรีย cfu /มล.และกำจัด 1.85 102 cfu/mL แต่ละการทดลองประกอบด้วยหก vats นม ซึ่งถูกความร้อนที่ 32 C. L 1.2 แต่ละที่มีแคลเซียมคลอไรด์และ starter พาณิชย์ 16 MA ในอ่างเอาเพิ่มน้ำนมที่ 0.01% และ 1% (ประมาณ 107 cfu/mL),ตามลำดับ เพื่อ vats ทั้งหมด Vats 2-6 ถูกปนเปื้อนโดยเจตนามีเพาะเฟิร์นประมาณ 104 mL ของ C. tyrobutyricum CECT 4011และ INIA 68, butyricum C. CECT 361, beijerinckii C. INIA 63 และC. sporogenes INIA 71 ตามลำดับ ชี faultless ควบคุมจาก vat1 ไม่ปนเปื้อนกับ clostridia ใด ๆ ผงลูก rennet(นม 0.025 g/L ความแรงของ 1:150,000, chymosin 94% เพพซินวัว6% Laboratorios อาร์โรโย่ แซนแทนเดอร์ สเปน) ถูกเพิ่มเข้าไปทั้งหมด vats20 นาทีต่อมา หลังจาก 40 นาที curds ถูกตัดเป็น 6e8 ลูกบาศก์มิลลิเมตรและลวกที่ 38 C สำหรับ 15 นาที เวย์ได้ระบายออกปิดผ่านการลัง มีการ cheesecloth ตาม ด้วยความเบามือดัน และซีอิ้วแต่ละมีการกระจายเข้าไปในแม่พิมพ์ทรงกระบอกหนึ่งกับหลุม ที่เนยแข็งมีกดค้างคืนที่ 20 C และ 0.015 ความดัน kg/cm2เพื่อระบายน้ำส่วนที่เกินของเวย์ออกหลุมของแม่พิมพ์ ชีหนึ่ง ของประมาณ 200 กรัมในน้ำหนัก ได้รับจาก vat แต่ละ หลังจากกด เนยแข็งมีสุญญากาศบรรจุในพลาสติกหลายชั้นที่สองอุปสรรคถุง 42 มม. (Cryovac HT3050; 200 300 มม. permeabilityให้ออกซิเจน¼ 15 cm3 m 2 วัน 1 บาร์ 1 23 C และ 0%RH, Cryovac ปิดผนึกอากาศคอร์ปอเรชั่น มิลาโน อิตาลี) และสุกที่C 14 สำหรับ 60 d

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:[สำเนา]

คัดลอก!

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียและการขยายพันธุ์พาณิชย์แห้งวัฒนธรรมแลคติก mesophilic Choozit ™ MA 16 LYO 25 DCU จาก Danisco (ให้ความกรุณาโดย Larbus SA, มาดริด, สเปน) กับการผลิตก๊าซไม่และประกอบด้วย จำกัดLactococcus lactis subsp lactis และสายพันธุ์ cremoris ถูกนำมาใช้ในการทำชีส แพ็คเก็ตของ MA 16 ที่ได้รับการสร้างขึ้นใน resuspended นมพร่องมันเนยที่จะบรรลุความเข้มข้นของ lactococci 4? 109 โคโลนี / มิลลิลิตร aliquoted และแช่แข็งที่ 40 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน วันก่อนที่จะทำชีสหนึ่ง aliquot ถูกละลายและใช้ในการฉีดวัคซีนที่ 0.1% นมพร่องมันเนยละลายและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา18 ชั่วโมง. ซี tyrobutyricum Inia 68, ซี beijerinckii Inia 63 และ C sporogenes Inia 71 แยกได้จากชีส Manchego เด่นชัดกับข้อบกพร่องเป่าปลาย(จี๊ด, เรียส, et al 2011, จี๊ด, Avila, et al.?. 2012; Garde, Gaya , เรียสและ Nu ~ หนีบ 2012) สายพันธุ์เหล่านี้ถูกเลือกบนพื้นฐานที่ว่าพวกเขาบางส่วนของผู้สมัครที่ดีที่สุดที่จะทำซ้ำLBD ในชีสทดลองเพราะพวกเขานำเสนอที่แตกต่างกันสายพันธุ์ที่แสดงโดยไอโซเลทหลายซึ่งผลิตสูงปริมาณของก๊าซและกรดบิวทิริกในนมและไบรอันท์และBurkey น้ำซุป (ที่มีโซเดียม แลคเตท) ซี tyrobutyricum CECT 4011 และซี butyricum CECT 361 ที่ได้รับจากประเภทสเปนวัฒนธรรมสะสม(Colecci? ใน Espa ~ Nola เด Cultivos Tipo, CECT, วาเลนเซีย, สเปน) ได้รับความสามารถของซี tyrobutyricum CECT 4011 ที่จะทำให้เกิดLBD ในประเภทที่คล้ายกันของชีส (G? omez-เรส? วีลายาและจี๊ด2014) เรารวมถึงสายพันธุ์นี้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกของการพัฒนาของLBD สายพันธุ์เชื้อ Clostridium ทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ที่? 80? C ในเสริม Clostridial กลาง (RCM, Difco, ดีทรอยต์สหรัฐอเมริกา) กับกลีเซอรีน 5% และเลี้ยงใน RCM และบ่มที่37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในขวดเพาะกายที่มี H2 บวก CO2 ชุดที่ก่อให้เกิด(AnaeroGen, Oxoid เบซิงสหราชอาณาจักร) ก่อนที่จะเตรียมความพร้อมสปอร์. 2.2 การจัดทำสปอร์สปอร์ของเชื้อ Clostridium สายพันธุ์ที่ได้รับหลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วันภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจน สปอร์ของซี tyrobutyricum CECT 4011 และ Inia 68, และ C sporogenes Inia 71 ถูกจัดทำขึ้นโดยการฉีดวัคซีนในการแก้ไข RCM (ไม่รวมอาหารเลี้ยงเชื้อและacetate โซเดียม) และสปอร์ซี beijerinckii Inia 63 และซี butyricum CECT 361 ที่ได้รับการฉีดวัคซีนโดยในไบรอันท์และน้ำซุปBurkey (เมอร์ค, Darmstadt, Germany) และ BHI (BioLife, Milano, อิตาลี) ตามลำดับ หลังจากการหมุนเหวี่ยง (5000? กรัม, 15 นาที, 20? C), เม็ดละสองครั้งถูกล้างด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและresuspended ในนมพร่องมันเนยละลาย สารแขวนลอยสปอร์ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 40 องศาเซลเซียสจนการใช้งานของพวกเขาในการผลิตชีส. ความเข้มข้นของสปอร์ในสารแขวนลอยที่ถูกกำหนดหลังจากการรักษาความร้อน (80 องศาเซลเซียส 20 นาที) ในอาหารเลี้ยงเชื้อ RCM (1.5% w / v) หลังจากที่ไม่ใช้ออกซิเจน บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วัน ความเข้มข้นของสารแขวนลอยสปอร์อยู่ในช่วง 107-109 สปอร์ / มล. 2.3 การผลิตชีสชีสที่ผลิตจากพาสเจอร์ไรส์ (72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 s) นมแกะจากสายพันธุ์ Manchega ในการทดลองที่ซ้ำกันดำเนินการในวันที่แตกต่างกัน ฝูง Manchega ถูกเลี้ยงด้วยอาหารทำที่บ้านและหญ้าแห้งพืชเถาและหมักไม่ถูกรวมอยู่ในอาหาร ตัวอย่างนมมีค่าเฉลี่ย 8.34% ไขมันทั้งหมด 6.34% โปรตีนรวม 20.21% วัตถุแห้ง (DM) 5.40? แบคทีเรียทั้งหมด 104 โคโลนี / มิลลิลิตรและ 1.85? โคลิฟอร์ม 102 โคโลนี / มิลลิลิตร แต่ละการทดลองประกอบด้วยหกถังแต่ละที่มี 1.2 ลิตรนมซึ่งถูกความร้อนที่ 32 องศาเซลเซียส. แคลเซียมคลอไรด์และเริ่มต้นการค้า MA 16 เพาะเลี้ยงในไขมันต่ำนมมีการเพิ่มที่0.01% และ 1% (ประมาณ 107 โคโลนี / มิลลิลิตร), ตามลำดับ เพื่อถังทั้งหมด ถัง 2-6 จงใจปนเปื้อนที่มีประมาณ104 สปอร์ / มลซี tyrobutyricum CECT 4011 และ Inia 68, ซี butyricum CECT 361 ซี beijerinckii Inia 63 และซี sporogenes Inia 71 ตามลำดับ ชีสควบคุมไม่ผิดจากถัง1 ไม่ได้ถูกปนเปื้อนด้วย clostridia ใด ๆ ผงวัวลูกวัว(0.025 กรัม / นม L 1: 150,000 แข็งแรง chymosin 94% น้ำย่อยวัว6%; Laboratorios อาร์โรโย Santander, สเปน) ถูกบันทึกอยู่ในถังทุก20 นาทีต่อมา หลังจาก 40 นาที, เต้าหู้ที่ถูกตัดเป็นก้อน 6e8 มิลลิเมตรและไฟลวกที่38 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที เวย์ได้ถูกระบายออกผ่านกระชอนด้วยผ้าตามด้วยความดันมือของแสงและนมเปรี้ยวแต่ละคนถูกกระจายเป็นหนึ่งในแม่พิมพ์รูปทรงกระบอกที่มีรู ชีสถูกกดค้างคืนที่ 20 องศาเซลเซียสและ 0.015 กิโลกรัม / cm2 ดันเพื่อระบายน้ำส่วนที่เกินจากเวย์ออกจากหลุมของแม่พิมพ์ที่ ชีสหนึ่งของประมาณ 200 กรัมในน้ำหนักที่ได้รับจากแต่ละถัง หลังจากกดชีสเป็นสูญญากาศบรรจุในสองพลาสติกหลายถุงอุปสรรคจาก42 มิลลิเมตร (Cryovac HT3050 200 300 มม? ซึมผ่าน????? ออกซิเจน¼ 15 cm3 เมตร 2 วัน 1 บาร์ 1 ณ วันที่ 23 C และ 0% RH, Cryovac ปิดผนึกอากาศคอร์ปอเรชั่น Milano, อิตาลี) และสุกที่14 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 วัน

การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:[สำเนา]

คัดลอก!

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สายพันธุ์แบคทีเรียแลคติกและการพาณิชย์ และมีวัฒนธรรม choozit แห้ง

มา™ 16 ไลโอ 25 DCU จาก danisco ( กรุณาให้ larbus SA ,
มาดริด , สเปน ) , ไม่มีก๊าซที่ผลิตและประกอบด้วยจำกัด
แลคโตค คัส lactis subsp . และ cremoris lactis สายพันธุ์ที่ใช้ใน
การทำชีส แพ็คเก็ตมา 16 คือ resuspended
ในธรรมชาตินมไขมันต่ำ เพื่อให้เกิดความเข้มข้นของแลกโตค ไค
4 109 CFU / ml aliquoted และแช่แข็งที่ 40 C จนใช้ วัน
ก่อนการทำชีส หนึ่งส่วนลงตัวถูกละลายและใช้เพื่อปลูกฝี
ที่ 0.1% สร้างหางนมผงและบ่มที่อุณหภูมิ 30 C

C 18 ชั่วโมง tyrobutyricum inia 68 , C . beijerinckii inia 63 . sporogenes
inia 71 ที่แยกได้จาก แมนเชโก้ชีส กับออกเสียง
สายเป่าข้อบกพร่อง ( Garde Arias , et al . , 2011 , Garde Avila , et al . ,
2012 ; เปรี้ยวจี๊ด กายา Arias & Nu ~ เนซ , 2012 ) สายพันธุ์เหล่านี้
เลือกบนพื้นฐานที่พวกเขามีบางส่วนของผู้สมัครที่ดีที่สุดในการทำซ้ำ lbd น่ะ

เพราะพวกเขานำเสนอที่แตกต่างกัน
pulsotypes แสดงโดยหลายสายพันธุ์ที่ผลิตปริมาณมาก
แก๊สและกรด butyric ในนม และใน ไบรอัน และ burkey
น้ำซุป ( ที่ประกอบด้วยโซเดียมแลคเตท ) C . tyrobutyricum CECT 4011 และ
C butyricum CECT คุณได้มาจากสเปนประเภท
วัฒนธรรมของสะสม ( colecci เอสปาโนล่า เดอ cultivos ประเภทที่ ~ , CECT
วาเลนเซีย , สเปน ) ได้รับความสามารถของ tyrobutyricum CECT 4011

เพราะ lbd ในประเภทที่คล้ายกันของชีส ( G omez ทอร์เรส Avila กายา &
การ์ 2014 ) เรารวมสายพันธุ์นี้เป็นตัวควบคุมบวก
การพัฒนา lbd . เชื้อ Clostridium ทั้งหมดยังคง
ที่ 80 C ในโครงสร้าง clostridial ขนาดกลาง ( จำนวน difco , ดีทรอยต์ ,
, USA ) กับกลีเซอรอล 5% และในจำนวน subcultured บ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง
ถังไหกับ H2 บวก CO2 สร้างชุด
( anaerogen oxoid Basingstoke , สหราชอาณาจักร , , ) ก่อน การเตรียมการสร้างสปอร์
2.2 .
เตรียมสปอร์สปอร์ของเชื้อ Clostridium ทั้งหมดได้หลังจากบ่มที่ 37
C เป็นเวลา 3 วัน ภายใต้เงื่อนไขแบบไม่ใช้ออกซิเจน สปอร์
C และ tyrobutyricum CECT 4011 inia 68 , และ C sporogenes inia 71
เตรียมการในการแก้ไขจำนวน ( ไม่มีวุ้นและ
โซเดียมอะซิเตต ) และสปอร์ของ beijerinckii inia 63 และ
C butyricum CECT คุณได้รับจากการฉีดวัคซีนใน Bryant และ
burkey broth ( Merck ,ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) และใน BHI ( biolife
, มิลาน , อิตาลี ) , ตามลำดับ หลังการปั่นเหวี่ยง ( 5000 G , 15 นาที , 20
c ) , อัตราการล้างด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ 2 ครั้ง
resuspended ในธรรมชาติและนม . สปอร์แขวนลอย
ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 40 C จนใช้ในชีสผลิต ความเข้มข้นสารแขวนลอยสปอร์

ตั้งใจคือ หลังจากการรักษาความร้อน ( 80 C20 นาที ) , จำนวนวุ้น
( 1.5 % w / v ) หลังจากถังบ่มที่ 37 C เป็นเวลา 3 วัน ความเข้มข้นของสปอร์แขวนลอยมีค่า

ถึง 109 สปอร์ / มิลลิลิตร 2.3 ชีสเนยแข็งที่ผลิตจากผู้ผลิต
พาสเจอไรซ์ ( 72 C 15 s )
นมแกะจาก manchega พันธุ์ในการทดลองซ้ำ ,
ดำเนินการในวันที่แตกต่างกัน ที่ถูกเลี้ยงด้วยอาหาร manchega ฝูง
ทําที่บ้านและเวชฟางและไม่รวมอยู่ในอาหารหมัก
. ตัวอย่างนม พบว่าค่าเฉลี่ย 8.34 % ไขมันทั้งหมด 6.34 %
% รวมโปรตีน 20.21 วัตถุแห้ง ( DM ) , 5.40 104 CFU / ml และจำนวนแบคทีเรียโคลิฟอร์ม
1.85 102 CFU / มล. ในแต่ละการทดลองประกอบด้วย
6 ถังแต่ละที่มี 1.2 ลิตรของน้ำนมที่อุณหภูมิ 32 C แคลเซียม คลอไรด์ และพาณิชย์ มาเริ่มต้น

นมไขมันต่ำ 16 เพาะเลี้ยงเพิ่มที่ 001 ( 1 % ( ประมาณ 107 CFU / ml )
) ทุกถัง . ถัง 2 ได้จงใจปนเปื้อน
ที่มีประมาณ 104 สปอร์ / มิลลิลิตร และ C . tyrobutyricum CECT 4011
inia 68 , C . butyricum CECT 361 , C . beijerinckii inia 63 และ
C sporogenes inia 71 ตามลำดับ ไม่มีชีสควบคุมจากภาษีมูลค่าเพิ่ม
1 ไม่ปนเปื้อนกับ Clostridia . ผงน่องเรนเนท
( 0.025 กรัมต่อลิตร 1:150 นม ,000 แรง , เศรษฐศาสตร์วิศวกรรม 94 โคเปบซิน
6 % ; บริการ Arroyo Valencia , สเปน ) คือเพิ่มทุก 20 นาที
VATS ในภายหลัง หลังจาก 40 นาที จะถูกตัดเป็น 6e8 มม. ก้อนเต้าหู้ และลวกที่ 38
c นาน 15 นาที เวย์ ก็ระบายออกผ่าน
กระชอนด้วยผ้า ตามด้วยดันมือไฟ , และ
เต้าหู้กระจายไปแต่ละหนึ่งแม่พิมพ์ทรงกระบอกที่มีรู
ชีสถูกกดค้างที่ 20 C และ 3 kg / cm2 แรงดัน
ระบายส่วนเกินของเวย์ออกรูของแม่พิมพ์ หนึ่งชีสของ
ประมาณ 200 กรัมในน้ำหนัก ที่ได้รับจากแต่ละภาษีมูลค่าเพิ่ม หลังจาก
กดชีสเป็นสุญญากาศบรรจุในถุงพลาสติก 2 ชั้น กั้น
42 มม. ( cryovac ht3050 ; 200 300 มม. ; การซึมผ่านของออกซิเจน¼
15 cm3 M 2 วัน 1 บาร์ 1 ใน 23 C และความชื้นสัมพัทธ์ 0 %
,cryovac ปิดผนึกอากาศ Corporation , มิลาน , อิตาลี ) และเป็นเวลา
14 C 60 D

การแปล กรุณารอสักครู่..

ภาษาอื่น ๆ

การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.