Human host cell lines for the produ

Human host cell lines for the production of biopharmaceutical proteins are of interest due to differences in the glycosylation patterns of human and animal cell lines. Specifically, sialylation, which has a major impact on half-life and immunogenicity of recombinant biopharmaceuticals, differs markedly. Here, we established and characterized an immortalized well documented and serum-free host cell line, RS, from primary human renal proximal tubular epithelial cells (RPTEC). In order to test its capacity to produce complex glycosylated proteins, stable recombinant human erythropoietin (rhEpo) producing clones were generated. The clone with highest productivity, RS-1C9 was further characterized and showed stable productivity. Biological activity was observed in in vitro assays and 28% of rhEpo glyco-isoforms produced by RS-1C9 were in range and distribution of the biological reference standard (BRP) isoform, as compared to 11.5% of a CHO based rhEpo. Additionally, cellular α-2,6 sialylation, Galactose-alpha-1,3-galactose (alpha-Gal) and N-glycolylneuraminic acid (NeuGc) patterns compare favourably to CHO cells. While productivity of RS still needs optimization, its amenability to upscaling in bioreactors, its production of glyco-isoforms that will increase yields after down-stream processing of about 2.5 fold, presence of sialylation and lack of Neu5Gc recommend RS as alternative human host cell line for production of biopharmaceuticals. © 2014 Elsevier B.V.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บรรทัดการผลิตโปรตีน biopharmaceutical เซลล์โฮสต์มนุษย์ที่น่าสนใจเนื่องจากความแตกต่างในรูปแบบ glycosylation บรรทัดเซลล์มนุษย์ และสัตว์ โดยเฉพาะ sialylation ซึ่งมีผลกระทบสำคัญใน half-life และ immunogenicity recombinant biopharmaceuticals แตกต่างอย่างเด่นชัด ที่นี่ เราก่อตั้งขึ้น และลักษณะเป็น immortalized ทั้งเอกสาร และซีรั่มฟรีโฮสต์เซลล์บรรทัด RS จากหลักไต proximal ท่อ epithelial เซลล์มนุษย์ (RPTEC) เพื่อทดสอบกำลังของการผลิตโปรตีน glycosylated ซับซ้อน มีสร้างโคลนมีเสถียรภาพ recombinant มนุษย์ erythropoietin (rhEpo) ผลิต โคลน ด้วยประสิทธิภาพสูงสุด RS - 1C 9 มีลักษณะเพิ่มเติม และแสดงให้เห็นว่าผลผลิตที่มีเสถียรภาพ กิจกรรมทางชีวภาพที่พบในใน assays และ 28% ของ rhEpo ผลิตโดย RS - 9 1C isoforms glyco อยู่ในช่วงและการกระจายของการอ้างอิงทางชีวภาพมาตรฐาน (BRP) isoform เมื่อเทียบกับ 11.5% ของช่อที่ใช้ rhEpo นอกจากนี้ α-2,6 มือถือ sialylation กาแล็กโทสอัลฟา-13-กาแล็กโทส (อัลฟ่า-Gal) และรูปแบบ (NeuGc) กรด N-glycolylneuraminic เปรียบเทียบ favourably กับเซลล์ช่อ ในขณะที่ผลผลิตอาร์เอสยังคงต้องปรับให้เหมาะสม ความ amenability การ upscaling ใน bioreactors, glyco isoforms ที่จะเพิ่มการผลิตทำให้หลังจากลงข้อมูลประมวลผลเกี่ยวกับพับ 2.5 ของ sialylation และขาด Neu5Gc แนะนำ RS เป็นบรรทัดผลิต biopharmaceuticals เซลล์โฮสต์คนอื่น © 2014 Elsevier b.v

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มนุษย์สายพันธุ์เซลล์ของโฮสต์สำหรับการผลิตโปรตีนชีวเวชภัณฑ์ที่มีความสนใจเนื่องจากความแตกต่างในรูปแบบ glycosylation ของมนุษย์และสัตว์สายพันธุ์เซลล์ โดยเฉพาะ sialylation ซึ่งมีผลกระทบสำคัญในครึ่งชีวิตและภูมิคุ้มกันยาไบโอ recombinant แตกต่างอย่างเห็นได้ชัด ที่นี่เราเป็นที่ยอมรับและลักษณะตี้เอกสารดีและสายพันธุ์ของเซลล์โฮสต์ซีรั่มฟรี, RS, จากเซลล์ไตของมนุษย์หลักใกล้เคียงท่อเยื่อบุผิว (RPTEC) เพื่อทดสอบความสามารถในการผลิตโปรตีน glycosylated ซับซ้อนมั่นคงของมนุษย์ recombinant erythropoietin (rhEpo) โคลนผลิตถูกสร้างขึ้น โคลนที่มีผลผลิตสูงสุด RS-1C9 ก็มีลักษณะต่อไปและแสดงให้เห็นการผลิตที่มั่นคง กิจกรรมทางชีวภาพได้รับการปฏิบัติในการตรวจในหลอดทดลองและ 28% ของ rhEpo Glyco ไอโซฟอร์มที่ผลิตโดย RS-1C9 อยู่ในช่วงและการกระจายของมาตรฐานอ้างอิงทางชีวภาพ (BRP) ไอโซฟอร์มเมื่อเทียบกับ 11.5% ของ CHO ตาม rhEpo นอกจากนี้โทรศัพท์มือถือที่α-2, 6 sialylation, Galactose-alpha-1 ,3-กาแล็กโต (alpha-Gal) และ N-glycolylneuraminic กรด (NeuGc) รูปแบบการเปรียบเทียบการสนับสนุนให้เซลล์ CHO ในขณะที่ผลผลิตของอาร์เอสยังคงต้องการเพิ่มประสิทธิภาพการรับผิดชอบในการยกระดับสัญญาณใน bioreactors, การผลิตของ Glyco ไอโซฟอร์มที่จะเพิ่มผลผลิตหลังจากการประมวลผลลงกระแสของประมาณ 2.5 เท่าการปรากฏตัวของ sialylation และขาด Neu5Gc แนะนำ RS เป็นสายพันธุ์ของเซลล์โฮสต์ของมนุษย์ทางเลือก สำหรับการผลิตยาไบโอ © 2014 เอลส์ BV

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มนุษย์เซลล์โฮสต์สำหรับสายการผลิตของโปรตีนสูงเป็นที่สนใจเนื่องจากความแตกต่างในรูปแบบของ glycosylation มนุษย์และเซลล์สัตว์สาย โดยเฉพาะ sialylation ซึ่งได้รับผลกระทบอย่างรุนแรงกับครึ่งชีวิตของยีน และสามารถเป็นโครงการ แตกต่างอย่างเห็นได้ชัด ที่นี่เราสร้าง และลักษณะเป็น immortalized เอกสารดี serum-free โฮสต์และสายเซลล์ RS จากหลักของมนุษย์ ความอดทนของท่อเซลล์เยื่อ ( rptec ) เพื่อทดสอบขีดความสามารถในการผลิตที่ซับซ้อนโปรตีน recombinant มนุษย์อื่น มั่นคง รักษา ( rhepo ) ผลิตโคลนขึ้น . โคลนด้วยประสิทธิภาพสูงสุดrs-1c9 ต่อลักษณะและมีการผลิตที่มั่นคง ฤทธิ์ทางชีวภาพที่พบในเลือดและในร่างกาย 28% ของไกลโค rhepo ต่อผลิตโดย rs-1c9 ในช่วงและการกระจายของมาตรฐานอ้างอิงทางชีวภาพ ( brp ) ไอโซฟอร์มเทียบถึง 11.5% ของโช rhepo ตาม นอกจากนี้ 2,6 sialylation galactose-alpha-1 แอลฟาเซลล์ , ,3-galactose ( Alpha กัล ) และกรดของเลคตินศึกษา ( neugc ) รูปแบบดีเมื่อเทียบกับ โช เซลล์ ในขณะที่ผลผลิตของอาร์เอส ยังต้องการเพิ่มประสิทธิภาพของ amenability เพื่อ upscaling ในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ การผลิตของไกลโคไอโซฟอร์มที่จะเพิ่มผลผลิตหลังจากลงกระแสการประมวลผล 2.5 พับการปรากฏตัวของ sialylation และขาด neu5gc แนะนำ RS เป็นทางเลือกของมนุษย์เซลล์โฮสต์สายการผลิตของโครงการ . สงวนลิขสิทธิ์ 2010 สามารถป้องกัน