2.4. Antibacterial assays
The antibacterial assay of compounds 1–16 except 8 was evaluated
against Staphylococcus aureus ATCC 25922, Klepsiella pneumoniae ATCC
13883, Enterococcus faecalis ATCC 10541, Escherichia coli ATCC 11775
and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. All the bacteria were obtained
from the American Type Culture Collection (Rockville, USA). The
antibacterial assay was carried out as described in the literature elsewhere
[16]. The preparation of bacterial inocula was done by using
18 h old overnight bacterial cultures prepared in Nutrient Agar. A few
colonies of bacteria were collected aseptically with a sterile loop and
introduced into 10 ml of sterile 0.90% saline solution. The concentration
of the suspensionwas then standardized by adjusting the optical density
to 0.10 at 630 nm, corresponding to bacterial cell suspension of 108
colony-forming units/mL (CFU/mL) [17]. This cell suspension was diluted
100 times to obtain 106 CFU/mL before use. The compounds were
dissolved in DMSO and then added to bacteria suspension to obtain the
final concentration of 5% (v/v) DMSO or less. Serial twofold dilutions
from 200 μg/mL of the compounds were performed in 96-well microtiter
plates. Each well contained 100 μL of sample of each concentration.
Into each well was then introduced 100 μL of the bacterial suspension.
The final concentration range of the test compounds was 100–0.781
μg/mL, and the plates were incubated at 37 °C for 24 h. After incubation,
the wells were examined for growth of microorganisms by measuring
optical density (OD) value of the wells. Each experiment was repeated
three times and Norfloxacin, bacteria suspension of 5% (v/v) DMSO
were used as a positive control and a blank control, respectively. By comparing
to OD values, we can point out MIC values of these compounds
among the selected concentration range and MIC N 100 μg/mL was
considered to be inactive.
2.4. ยาปฏิชีวนะ assaysมีประเมินทดสอบต้านเชื้อแบคทีเรียสาร 1 – 16 ยกเว้น 8กับหมอเทศข้างลาย Staphylococcus ATCC 25922, Klepsiella pneumoniae ATCC13883, enterococcus faecalis ATCC 10541, Escherichia coli ATCC 11775และ Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 แบคทีเรียทั้งหมดได้รับจากชนิดอเมริกันวัฒนธรรมชุด (ร็อควิลล์ สหรัฐอเมริกา) ที่ต้านเชื้อแบคทีเรียทดสอบได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในวรรณคดีอื่น ๆ[16] ทำการเตรียมเชื้อแบคทีเรีย inocula โดยอายุ 18 h นอนวัฒนธรรมแบคทีเรียที่เตรียมใน Agar อาหาร นิดเดียวอาณานิคมของแบคทีเรียถูกเก็บรวบรวม aseptically คล้องใส่ และนำเข้าสู่ 10 ml ของกอซ 0.90% น้ำเกลือ ความเข้มข้นของ suspensionwas จากนั้น มาตรฐาน โดยการปรับความหนาแน่นออปติคอลการ 0.10 ที่ 630 nm ที่สอดคล้องกับเซลล์แบคทีเรียระงับของ 108รูปฝูงหน่วย/มล. (CFU/mL) [17] ระงับเซลล์นี้ถูกทำให้เจือจางครั้ง 100 รับ 106 CFU/mL ก่อนการใช้ สารประกอบได้ละลายใน DMSO และเพิ่มเข้าไประงับแบคทีเรียจะได้รับการสุดท้ายความเข้มข้น 5% (v/v) DMSO หรือน้อยกว่านั้น Dilutions ประจำอยู่สองประการจาก μg 200 mL ของสารประกอบดำเนินใน microtiter 96-ดีแผ่น ดีละประกอบด้วย μL ของตัวอย่างของแต่ละความเข้มข้น 100ในแต่ละดีถูกแล้วนำ μL 100 การระงับเชื้อแบคทีเรียช่วงเข้มข้นสุดท้ายของสารทดสอบ 100 – 0.781Μg/mL และแผ่นก็ incubated ที่ 37 ° C ใน 24 ชม หลังจากคณะทันตแพทยศาสตร์the wells were examined for growth of microorganisms by measuringoptical density (OD) value of the wells. Each experiment was repeatedthree times and Norfloxacin, bacteria suspension of 5% (v/v) DMSOwere used as a positive control and a blank control, respectively. By comparingto OD values, we can point out MIC values of these compoundsamong the selected concentration range and MIC N 100 μg/mL wasconsidered to be inactive.
การแปล กรุณารอสักครู่..
