- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
ResultsA tandem FYVE construct reco
Results
A tandem FYVE construct recognizes plant
endosomes
In both yeast and mammals, the phosphoinositide
PI(3)P accumulates preferentially in endosomal membranes (Gillooly et al., 2000), and binding of FYVEdomain proteins to PI(3)P is sufficient to target
endosomal proteins to these subcellular compartments.
ForA. thalianait is known that the classical FYVE
domain binds specifically to PI(3)P in vitro (Jensen et
al., 2001). Therefore, we were interested to know if the
tandem FYVE domain would be sufficient for targeting
to endocytic compartments in plants. To this end, the
FYVE domain from the mouse Hrs protein was
tandemly fused (Gillooly et al., 2000) to the C-terminus
of GFP or DsRedT4, respectively. Particle bombardment was employed to transiently express the fusion
proteins (GFP-FYVE; DsRed-FYVE) in onion epidermal bulb scale cells. Confocal imaging revealed fluorescently labeled motile organelles, which were positive also
for the endosome-specific plant Rab GTPases Ara6 and
RabF2a, when pDsRed-FYVE and Ara6-GFP or YFPRabF2a were transiently coexpressed. In the case of
Ara6 and FYVE, the merged images showed a colocalization between the two fusion proteins in small
and punctate, motile organelles (Fig. 1, yellow arrowheads in c), but not in larger static organelles, which
were binding the GFP-FYVE reporter exclusively
(Fig. 1c, red arrowheads). Coexpression of pDsRedFYVE and pYFP-RabF2a also showed complete colocalization within small motile organelles (Fig. 1d–f;
see also Movie 1; all 24 movies are part of the
supplementary material).
Previously, Ara6-labeled compartments have been
shown to accumulate newly endocytosed FM4-64 (Ueda
et al., 2001). To determine, whether FYVE-labeled
compartments have endosomal identity, we performed
double labeling by treating the stably transformed
M. truncatulaexpressing GFP-FYVE with the red fluorescent styryl dye FM4-64. This endocytic tracer binds
to the plasma membrane and becomes rapidly incorporated into the cell through bulk-flow endocytosis (Ueda
et al., 2001). Upon the exposure of root hairs to FM4-64
for 5 min, a fluorescent signal was observed on all
FYVE-labeled endosomes (Fig. 1g–i; Movie 2). The
GFP-FYVE-labeled endosomes were located in the
A tandem FYVE construct recognizes plant
endosomes
In both yeast and mammals, the phosphoinositide
PI(3)P accumulates preferentially in endosomal membranes (Gillooly et al., 2000), and binding of FYVEdomain proteins to PI(3)P is sufficient to target
endosomal proteins to these subcellular compartments.
ForA. thalianait is known that the classical FYVE
domain binds specifically to PI(3)P in vitro (Jensen et
al., 2001). Therefore, we were interested to know if the
tandem FYVE domain would be sufficient for targeting
to endocytic compartments in plants. To this end, the
FYVE domain from the mouse Hrs protein was
tandemly fused (Gillooly et al., 2000) to the C-terminus
of GFP or DsRedT4, respectively. Particle bombardment was employed to transiently express the fusion
proteins (GFP-FYVE; DsRed-FYVE) in onion epidermal bulb scale cells. Confocal imaging revealed fluorescently labeled motile organelles, which were positive also
for the endosome-specific plant Rab GTPases Ara6 and
RabF2a, when pDsRed-FYVE and Ara6-GFP or YFPRabF2a were transiently coexpressed. In the case of
Ara6 and FYVE, the merged images showed a colocalization between the two fusion proteins in small
and punctate, motile organelles (Fig. 1, yellow arrowheads in c), but not in larger static organelles, which
were binding the GFP-FYVE reporter exclusively
(Fig. 1c, red arrowheads). Coexpression of pDsRedFYVE and pYFP-RabF2a also showed complete colocalization within small motile organelles (Fig. 1d–f;
see also Movie 1; all 24 movies are part of the
supplementary material).
Previously, Ara6-labeled compartments have been
shown to accumulate newly endocytosed FM4-64 (Ueda
et al., 2001). To determine, whether FYVE-labeled
compartments have endosomal identity, we performed
double labeling by treating the stably transformed
M. truncatulaexpressing GFP-FYVE with the red fluorescent styryl dye FM4-64. This endocytic tracer binds
to the plasma membrane and becomes rapidly incorporated into the cell through bulk-flow endocytosis (Ueda
et al., 2001). Upon the exposure of root hairs to FM4-64
for 5 min, a fluorescent signal was observed on all
FYVE-labeled endosomes (Fig. 1g–i; Movie 2). The
GFP-FYVE-labeled endosomes were located in the
0/5000
ResultsA tandem FYVE construct recognizes plantendosomesIn both yeast and mammals, the phosphoinositidePI(3)P accumulates preferentially in endosomal membranes (Gillooly et al., 2000), and binding of FYVEdomain proteins to PI(3)P is sufficient to targetendosomal proteins to these subcellular compartments.ForA. thalianait is known that the classical FYVEdomain binds specifically to PI(3)P in vitro (Jensen etal., 2001). Therefore, we were interested to know if thetandem FYVE domain would be sufficient for targetingto endocytic compartments in plants. To this end, theFYVE domain from the mouse Hrs protein wastandemly fused (Gillooly et al., 2000) to the C-terminusof GFP or DsRedT4, respectively. Particle bombardment was employed to transiently express the fusionproteins (GFP-FYVE; DsRed-FYVE) in onion epidermal bulb scale cells. Confocal imaging revealed fluorescently labeled motile organelles, which were positive alsofor the endosome-specific plant Rab GTPases Ara6 andRabF2a, when pDsRed-FYVE and Ara6-GFP or YFPRabF2a were transiently coexpressed. In the case ofAra6 and FYVE, the merged images showed a colocalization between the two fusion proteins in smalland punctate, motile organelles (Fig. 1, yellow arrowheads in c), but not in larger static organelles, whichwere binding the GFP-FYVE reporter exclusively(Fig. 1c, red arrowheads). Coexpression of pDsRedFYVE and pYFP-RabF2a also showed complete colocalization within small motile organelles (Fig. 1d–f;see also Movie 1; all 24 movies are part of thesupplementary material).Previously, Ara6-labeled compartments have beenshown to accumulate newly endocytosed FM4-64 (Uedaet al., 2001). To determine, whether FYVE-labeledcompartments have endosomal identity, we performeddouble labeling by treating the stably transformedM. truncatulaexpressing GFP-FYVE with the red fluorescent styryl dye FM4-64. This endocytic tracer bindsto the plasma membrane and becomes rapidly incorporated into the cell through bulk-flow endocytosis (Uedaet al., 2001). Upon the exposure of root hairs to FM4-64for 5 min, a fluorescent signal was observed on allFYVE-labeled endosomes (Fig. 1g–i; Movie 2). TheGFP-FYVE-labeled endosomes were located in the
การแปล กรุณารอสักครู่..
Results
A tandem FYVE construct recognizes plant
endosomes
In both yeast and mammals, the phosphoinositide
PI(3)P accumulates preferentially in endosomal membranes (Gillooly et al., 2000), and binding of FYVEdomain proteins to PI(3)P is sufficient to target
endosomal proteins to these subcellular compartments.
ForA. thalianait is known that the classical FYVE
domain binds specifically to PI(3)P in vitro (Jensen et
al., 2001). Therefore, we were interested to know if the
tandem FYVE domain would be sufficient for targeting
to endocytic compartments in plants. To this end, the
FYVE domain from the mouse Hrs protein was
tandemly fused (Gillooly et al., 2000) to the C-terminus
of GFP or DsRedT4, respectively. Particle bombardment was employed to transiently express the fusion
proteins (GFP-FYVE; DsRed-FYVE) in onion epidermal bulb scale cells. Confocal imaging revealed fluorescently labeled motile organelles, which were positive also
for the endosome-specific plant Rab GTPases Ara6 and
RabF2a, when pDsRed-FYVE and Ara6-GFP or YFPRabF2a were transiently coexpressed. In the case of
Ara6 and FYVE, the merged images showed a colocalization between the two fusion proteins in small
and punctate, motile organelles (Fig. 1, yellow arrowheads in c), but not in larger static organelles, which
were binding the GFP-FYVE reporter exclusively
(Fig. 1c, red arrowheads). Coexpression of pDsRedFYVE and pYFP-RabF2a also showed complete colocalization within small motile organelles (Fig. 1d–f;
see also Movie 1; all 24 movies are part of the
supplementary material).
Previously, Ara6-labeled compartments have been
shown to accumulate newly endocytosed FM4-64 (Ueda
et al., 2001). To determine, whether FYVE-labeled
compartments have endosomal identity, we performed
double labeling by treating the stably transformed
M. truncatulaexpressing GFP-FYVE with the red fluorescent styryl dye FM4-64. This endocytic tracer binds
to the plasma membrane and becomes rapidly incorporated into the cell through bulk-flow endocytosis (Ueda
et al., 2001). Upon the exposure of root hairs to FM4-64
for 5 min, a fluorescent signal was observed on all
FYVE-labeled endosomes (Fig. 1g–i; Movie 2). The
GFP-FYVE-labeled endosomes were located in the
A tandem FYVE construct recognizes plant
endosomes
In both yeast and mammals, the phosphoinositide
PI(3)P accumulates preferentially in endosomal membranes (Gillooly et al., 2000), and binding of FYVEdomain proteins to PI(3)P is sufficient to target
endosomal proteins to these subcellular compartments.
ForA. thalianait is known that the classical FYVE
domain binds specifically to PI(3)P in vitro (Jensen et
al., 2001). Therefore, we were interested to know if the
tandem FYVE domain would be sufficient for targeting
to endocytic compartments in plants. To this end, the
FYVE domain from the mouse Hrs protein was
tandemly fused (Gillooly et al., 2000) to the C-terminus
of GFP or DsRedT4, respectively. Particle bombardment was employed to transiently express the fusion
proteins (GFP-FYVE; DsRed-FYVE) in onion epidermal bulb scale cells. Confocal imaging revealed fluorescently labeled motile organelles, which were positive also
for the endosome-specific plant Rab GTPases Ara6 and
RabF2a, when pDsRed-FYVE and Ara6-GFP or YFPRabF2a were transiently coexpressed. In the case of
Ara6 and FYVE, the merged images showed a colocalization between the two fusion proteins in small
and punctate, motile organelles (Fig. 1, yellow arrowheads in c), but not in larger static organelles, which
were binding the GFP-FYVE reporter exclusively
(Fig. 1c, red arrowheads). Coexpression of pDsRedFYVE and pYFP-RabF2a also showed complete colocalization within small motile organelles (Fig. 1d–f;
see also Movie 1; all 24 movies are part of the
supplementary material).
Previously, Ara6-labeled compartments have been
shown to accumulate newly endocytosed FM4-64 (Ueda
et al., 2001). To determine, whether FYVE-labeled
compartments have endosomal identity, we performed
double labeling by treating the stably transformed
M. truncatulaexpressing GFP-FYVE with the red fluorescent styryl dye FM4-64. This endocytic tracer binds
to the plasma membrane and becomes rapidly incorporated into the cell through bulk-flow endocytosis (Ueda
et al., 2001). Upon the exposure of root hairs to FM4-64
for 5 min, a fluorescent signal was observed on all
FYVE-labeled endosomes (Fig. 1g–i; Movie 2). The
GFP-FYVE-labeled endosomes were located in the
การแปล กรุณารอสักครู่..
ผลการ fyve สร้างรู้จักพืชควบคู่ทั้งใน endosomes
ยีสต์และสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม , phosphoinositide
pi ( 3 ) P ที่สะสมใน endosomal preferentially เมมเบรน ( gillooly et al . , 2000 ) และการจับของโปรตีน fyvedomain กับพาย ( 3 ) P เป็นเพียงพอที่จะให้ช่อง endosomal ตําแหน่งภายในเซลล์โปรตีนเป้าหมาย
ไทยเหล่านี้ . thalianait เป็นที่รู้จักกันว่า
fyve คลาสสิกโดเมนก็เฉพาะเพื่อพาย ( 3 ) P ในหลอดทดลอง ( เจนเซ่น et
al . , 2001 ) ดังนั้นเราจึงมีความสนใจที่จะทราบว่าถ้า
ควบคู่ fyve โดเมนจะเพียงพอสำหรับเป้าหมาย
เพื่อ endocytic ช่องในพืช จุดนี้
fyve โดเมนจากชั่วโมงเมาส์โปรตีน
tandemly ผสม ( gillooly et al . , 2000 ) เพื่อ c-terminus
ของ GFP หรือ dsredt4 ตามลำดับเครื่องยิงโดยบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวด่วนฟิวชั่น
โปรตีน ( gfp-fyve ; dsred fyve ) ต้นหอม epidermal หลอดไฟขนาดเซลล์ การถ่ายภาพด้วย fluorescently ป้ายเคลื่อนที่พบออร์แกเนลล์ซึ่งเป็นบวกยัง
สำหรับโครโมโซมเฉพาะโรงงานรับ gtpases ara6 และ
rabf2a เมื่อ pdsred fyve ara6 GFP และหรือ yfprabf2a เป็นบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราว coexpressed . ในกรณีของ
ara6 fyve และ ,รวมภาพแสดง colocalization ระหว่างสองผสมโปรตีนในเล็ก ๆและอวัยวะ punctate
, มือถือ ( รูปที่ 1 , หัวลูกศรสีเหลืองใน C ) , แต่ไม่ใช่ในแบบของขนาดใหญ่ที่ถูกผูก gfp-fyve นักข่าวโดยเฉพาะ
( ภาพที่ 1c หัวลูกศร , สีแดง ) coexpression ของ pdsredfyve pyfp-rabf2a และยังพบ colocalization เสร็จภายในอวัยวะเคลื่อนที่ขนาดเล็ก ( ภาพ 1D - F ;
ดูหนัง 1 ; ทั้งหมด 24 ภาพยนตร์เป็นส่วนหนึ่งของวัสดุเสริม )
.
ก่อนหน้านี้ ara6 ติดป้ายช่องได้รับ
แสดงสะสมใหม่ endocytosed fm4-64 ( อุเอดะ
et al . , 2001 ) เพื่อตรวจสอบว่า fyve ป้าย
ช่องมีตัวตน endosomal เราปฏิบัติ
คู่ฉลากโดยการเปลี่ยน
เสถียรม.truncatulaexpressing gfp-fyve กับสีแดงเรืองแสง styryl ย้อม fm4-64 . ติดตาม endocytic นี้ผูก
กับเยื่อหุ้มเซลล์ และกลายเป็นที่จัดตั้งขึ้นอย่างรวดเร็วในเซลล์ผ่านการไหลของกลุ่มเอนโดไซโทซิส ( อุเอดะ
et al . , 2001 ) เมื่อแสงของรากขน เพื่อ fm4-64
5 นาที สัญญาณฟลูออเรสเซนต์ พบทั้งหมด
fyve ป้าย endosomes ( รูปที่ 1 ) I ; ภาพยนตร์ 2 )
fyve GFP ที่มีข้อความอยู่ใน endosomes
ยีสต์และสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม , phosphoinositide
pi ( 3 ) P ที่สะสมใน endosomal preferentially เมมเบรน ( gillooly et al . , 2000 ) และการจับของโปรตีน fyvedomain กับพาย ( 3 ) P เป็นเพียงพอที่จะให้ช่อง endosomal ตําแหน่งภายในเซลล์โปรตีนเป้าหมาย
ไทยเหล่านี้ . thalianait เป็นที่รู้จักกันว่า
fyve คลาสสิกโดเมนก็เฉพาะเพื่อพาย ( 3 ) P ในหลอดทดลอง ( เจนเซ่น et
al . , 2001 ) ดังนั้นเราจึงมีความสนใจที่จะทราบว่าถ้า
ควบคู่ fyve โดเมนจะเพียงพอสำหรับเป้าหมาย
เพื่อ endocytic ช่องในพืช จุดนี้
fyve โดเมนจากชั่วโมงเมาส์โปรตีน
tandemly ผสม ( gillooly et al . , 2000 ) เพื่อ c-terminus
ของ GFP หรือ dsredt4 ตามลำดับเครื่องยิงโดยบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวด่วนฟิวชั่น
โปรตีน ( gfp-fyve ; dsred fyve ) ต้นหอม epidermal หลอดไฟขนาดเซลล์ การถ่ายภาพด้วย fluorescently ป้ายเคลื่อนที่พบออร์แกเนลล์ซึ่งเป็นบวกยัง
สำหรับโครโมโซมเฉพาะโรงงานรับ gtpases ara6 และ
rabf2a เมื่อ pdsred fyve ara6 GFP และหรือ yfprabf2a เป็นบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราว coexpressed . ในกรณีของ
ara6 fyve และ ,รวมภาพแสดง colocalization ระหว่างสองผสมโปรตีนในเล็ก ๆและอวัยวะ punctate
, มือถือ ( รูปที่ 1 , หัวลูกศรสีเหลืองใน C ) , แต่ไม่ใช่ในแบบของขนาดใหญ่ที่ถูกผูก gfp-fyve นักข่าวโดยเฉพาะ
( ภาพที่ 1c หัวลูกศร , สีแดง ) coexpression ของ pdsredfyve pyfp-rabf2a และยังพบ colocalization เสร็จภายในอวัยวะเคลื่อนที่ขนาดเล็ก ( ภาพ 1D - F ;
ดูหนัง 1 ; ทั้งหมด 24 ภาพยนตร์เป็นส่วนหนึ่งของวัสดุเสริม )
.
ก่อนหน้านี้ ara6 ติดป้ายช่องได้รับ
แสดงสะสมใหม่ endocytosed fm4-64 ( อุเอดะ
et al . , 2001 ) เพื่อตรวจสอบว่า fyve ป้าย
ช่องมีตัวตน endosomal เราปฏิบัติ
คู่ฉลากโดยการเปลี่ยน
เสถียรม.truncatulaexpressing gfp-fyve กับสีแดงเรืองแสง styryl ย้อม fm4-64 . ติดตาม endocytic นี้ผูก
กับเยื่อหุ้มเซลล์ และกลายเป็นที่จัดตั้งขึ้นอย่างรวดเร็วในเซลล์ผ่านการไหลของกลุ่มเอนโดไซโทซิส ( อุเอดะ
et al . , 2001 ) เมื่อแสงของรากขน เพื่อ fm4-64
5 นาที สัญญาณฟลูออเรสเซนต์ พบทั้งหมด
fyve ป้าย endosomes ( รูปที่ 1 ) I ; ภาพยนตร์ 2 )
fyve GFP ที่มีข้อความอยู่ใน endosomes
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ฉันไปกับเพื่อน
- พวกเขากำลังทำอะไรอยู่
- คำเปรียบเปรย
- หางานที่ดีๆทำ
- It will get better
- Cool
- Machined and fabricated aluminium plate
- ชั้นเคยผิดหวังเรื่องความรัก
- 2.) Do you think the US dollar will rema
- will you learn economics ?
- เขาบอกให้ฉันเชื่อเขา เขากำลังย้ายมาอยู่ท
- price range
- Tired
- รูปภาพของคุณจะสวยที่สุดในอัลบัม
- pathogenic bacteria
- vendor the wheels
- rest time huh ? lucky to you..ล
- ที่พัก
- But I was going to graduate from the Uni
- ฉันไม่อยากเจอเขา บางครั้งฉันก็คิดว่าฉันไ
- Our study suggested in advance that thes
- ฉันจะพยายามเข้าใจ
- ทุกวันนี้ภาพยนตร์ เป็นสิ่งที่ทำเงินได้มา
- tip for reading comprehension test
