To assess the nanofibre equilibrium

To assess the nanofibre equilibrium binding capacity the mats were cut into 25-mm discs. Discs were incubated in 0.0–2.0 mg/mL model protein solutions and UV absorbance readings at 280 nm (Jasco V-630, Essex, UK) were taken at each step of before binding, after binding (16 h), wash (1 h) and elution (1 h). For testing the DEAE cellulose nanofibre, BSA was used as the model protein in 10 mM Tris buffer at pH 8.0. For the COO-cellulose binding study, lysozyme was used in 20 mM sodium acetate buffer at pH 5.5. The elution buffers used were the same as the respective binding buffer and containing 0.5 M NaCl. After elution, the nanofibres were regenerated in 0.1 M aqueous NaOH for repeat testing. Three tests were performed and the adsorbed equilibrium protein concentrations (Q) and liquid phase equilibrium concentrations (C) were averaged. The Langmuir adsorption isotherm Q = QmaxKdC/Kd + C was used, where Qmax is the maximum capacity of protein bound, and Kd is the equilibrium dissociation constant. The linearised form of Langmuir isotherm was plotted and from a line of best fit the Qmax and Kd values were estimated. The wet bed height was measured with a digital micrometer (Mitutoyo, Kawasaki, Japan; 0.001 mm resolution) to calculate the volume. The experiment was performed three times. Elution performance was calculated as a ratio of the protein concentration after elution and the adsorbed equilibrium protein concentration. The recovered protein concentration was 75% for DEAE and 90% for COO adsorbents.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การประเมิน nanofibre สมดุลรวมกำลังการผลิต เสื่อถูกตัดเป็นแผ่นดิสก์ 25 มม. ดิสก์ถูก incubated ใน 0.0-2.0 mg/mL รุ่นโซลูชั่นโปรตีนและ UV อ่าน absorbance ที่ 280 nm (Jasco V-630 เอสเซ็กซ์ สหราชอาณาจักร) ที่ถ่ายในแต่ละขั้นตอนของก่อนผูก หลังจากผูก (16 h), (1 h) ล้าง และ elution (1 h) สำหรับการทดสอบ nanofibre เซลลูโลส DEAE มีใช้บีเอสเอเป็นโปรตีนรูปแบบใน 10 มม.ทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์ที่ pH 8.0 ศึกษารวมบิลล์เซลลูโลส lysozyme ถูกใช้ในบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม 20 มม.ที่ pH 5.5 บัฟเฟอร์ elution ใช้ได้เหมือนกับการเกี่ยวข้องผูกบัฟเฟอร์และประกอบด้วย 0.5 M NaCl หลังจาก elution, nanofibres ได้จัดสร้างใน 0.1 M NaOH อควีสำหรับการทดสอบซ้ำ ดำเนินการทดสอบสาม และ averaged adsorbed สมดุลความเข้มข้นโปรตีน (Q) และเฟสของเหลวสมดุลความเข้มข้น (C) Isotherm ดูดซับของ Langmuir Q = QmaxKdC/Kd + C ใช้ ที่ Qmax กำลังการผลิตสูงสุดของโปรตีนที่ผูก และ Kd คง dissociation สมดุล แบบ linearised ของ Langmuir isotherm ถูกพล็อต และต้นส่วน Qmax พอดี และได้ประเมินมูลค่า Kd ความสูงเตียงเปียกถูกวัด ด้วยไมโครมิเตอร์ดิจิตอล (Mitutoyo คาวาซากิ ญี่ปุ่น ความละเอียด 0.001 mm) เพื่อคำนวณปริมาณ ทดลองทำสามครั้ง Elution ประสิทธิภาพถูกคำนวณเป็นอัตราส่วนของความเข้มข้นโปรตีนจาก elution และความเข้มข้นโปรตีนสมดุล adsorbed ความเข้มข้นโปรตีนกู้ได้ 90% สำหรับ adsorbents บิลล์และ 75% สำหรับ DEAE

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อประเมินความสมดุล nanofibre กำลังการผลิตที่มีผลผูกพันเสื่อที่ถูกตัดเป็นแผ่น 25 มม แผ่นถูกบ่มใน 0.0-2.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรโซลูชั่นโปรตีนและการอ่านรูปแบบการดูดกลืนรังสียูวีที่ 280 นาโนเมตร (Jasco V-630, Essex, UK) ได้รับการดำเนินการในแต่ละขั้นตอนของก่อนที่จะมีผลผูกพันหลังจากที่มีผลผูกพัน (16 ชั่วโมง) ล้าง (1 ชั่วโมง ) และชะ (1 ชั่วโมง) สำหรับการทดสอบ nanofibre เซลลูโลสดีอีเออีบีเอสเอถูกใช้เป็นโปรตีนในรูปแบบบัฟเฟอร์ 10 มิลลิทริสที่ pH 8.0 สำหรับซีโอโอเซลลูโลสศึกษาผูกพันไลโซไซม์ที่ใช้ในโซเดียม 20 มมอะซิเตตบัฟเฟอร์ที่ pH 5.5 บัฟเฟอร์ชะใช้อยู่เช่นเดียวกับกันชนที่มีผลผูกพันตามลำดับและมี 0.5 M NaCl หลังจากชะ, เส้นใยนาโนที่ถูกสร้างใหม่ใน 0.1 M NaOH น้ำสำหรับการทดสอบซ้ำ สามการทดสอบได้ดำเนินการและความเข้มข้นของโปรตีนสมดุลดูดซับ (Q) และความเข้มข้นสมดุลของเหลว (C) ได้รับการเฉลี่ย ดูดซับ Langmuir isotherm Q = QmaxKdC / Kd + C ถูกนำมาใช้ที่คิวแม็กซ์เป็นความจุสูงสุดของโปรตีนที่ถูกผูกไว้และ Kd คือการแยกตัวออกคงที่สมดุล รูปแบบเชิงเส้นของ Langmuir isotherm ถูกพล็อตและจากสายของดีที่สุดเหมาะสมกับค่าคิวแม็กซ์และถูก Kd ประมาณ ความสูงเตียงเปียกวัดด้วยไมโครมิเตอร์แบบดิจิตอล (Mitutoyo, คาวาซากิประเทศญี่ปุ่น 0.001 มมความละเอียด) ในการคำนวณปริมาณ การทดลองที่ได้ดำเนินการสามครั้ง ประสิทธิภาพ elution ที่คำนวณเป็นอัตราส่วนของความเข้มข้นของโปรตีนหลังจากชะและความเข้มข้นของโปรตีนสมดุลดูดซับ ความเข้มข้นของโปรตีนกู้คืนเป็น 75% สำหรับ DEAE และ 90% สำหรับดูดซับซีโอโอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อประเมิน nanofibre สมดุลผูกพันความจุเสื่อมาตัดเป็นแผ่น 25 mm ดิสก์ถูกบ่มใน 0.0 – 2.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและค่าการดูดกลืนแสงยูวีแบบโปรตีนโซลูชั่นการอ่านที่ 280 nm ( jasco v-630 , Essex , อังกฤษ ) ถ่ายในแต่ละขั้นตอน ก่อนผูกหลังผูก ( 16 ชั่วโมง ) ล้าง ( 1 ) H ( 1 ชั่วโมง ) ทดสอบ nanofibre DEAE เซลลูโลส ,บีเอสเอถูกใช้เป็นรูปแบบโปรตีนใน 10 มม. นอกจากนี้ บัฟเฟอร์ pH 8.0 . สำหรับขันเซลลูโลสข้อผูกพันการศึกษาไลโซไซม์ที่ใช้ใน 20 มิลลิเมตรโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.5 . การใช้บัฟเฟอร์ที่ใช้เป็นเหมือนตามข้อผูกพันและบัฟเฟอร์ที่มี 0.5 โมลาร์ . หลังจากใช้ , nanofibres ได้ในสารละลาย 0.1 M NaOH และการทดสอบซ้ำสามการทดสอบการดูดซับโปรตีนความเข้มข้นสมดุล ( Q ) และเฟสของเหลวและสมดุลความเข้มข้น ( C ) โดยเฉลี่ย ที่แลงเมอร์ไอโซเทอมการดูดซับ qmaxkdc KD C / Q = ใช้ที่คิวแมกซ์คือความจุสูงสุดของโปรตีนผูกพันและ KD คือการสมดุลการ linearised รูปแบบของแลงเมอร์ไอโซเทอมถูกวางแผนและจากเส้นและที่ดีที่สุดให้พอดีกับคิวแมกซ์ KD มีค่าประมาณ เตียงเปียกความสูงวัดด้วยไมโครมิเตอร์ดิจิตอล ( มิตูโตโย , คาวาซากิ , ญี่ปุ่น ; 0.001 มม. ความละเอียด ) คำนวณหาปริมาตร ทดสอบ 3 ครั้งประสิทธิภาพได้มาคำนวณเป็น อัตราส่วนของโปรตีนหลังจากใช้ดูดซับสมดุลโปรตีนเข้มข้น การกู้คืนสำหรับการทำโปรตีนความเข้มข้น 75% และ 90% สำหรับขันดูดซับ