3.1. Applications of DNA-Based ISFET
When DNA strands bind to the gate surface of ISFETs, changes in surface potential occur due to the negative charge of DNA, thereby allowing for excellent performance of in DNA sensing. Through special treatments of the oxide layer of a FET, probe DNA can be immobilized onto the oxide surface in an orientation-controlled manner. As for methods of DNA detection, the most widely used techniques depend on enzymatic, fluorescent, and radiochemical tags. But all these methods, though they show high sensitivity and low detection limits, are insufficient to solve problems such as assay time, cost and complexity. To overcome these drawbacks, a label-free detection of DNA using a FET device with a real-time electrical readout system for rapid, cost-effective, and simple analysis of DNA samples has been proposed [8]. As an example of this, a detection platform based on an amorphous silicon-based (a-Si:H) ISFET for the label-free detection of covalent immobilization of DNA and subsequent hybridization of its complementary DNA was developed by Goncalves et al. [29]. In this study, DNA binding behavior was monitored using an ISFET biosensor, which was observed as changes in the threshold voltage (VTH). Through electric field monitoring, a sensitive response of a-Si:H ISFET to target DNA of different levels of hybridization was observed. Since the theoretical basis for elucidating the electronic data obtained from ISFET measurements is not strong, except for several parameters such as charge effect, capacitance effect, etc., a detailed study about the true behavior of thin-film FET biosensors will help to develop an advanced ISFET device suitable for real sample detection.
Detection of the hybridization of double stranded DNA was carried out using a single crystalline diamond synthesized by plasma-enhanced chemical vapor deposition (PECVD) by Nebel et al. [30]. To immobilize DNA onto the sensing layer of the constructed ISFET, amine linker-molecules were covalently bound onto hydrogen-treated diamond surfaces by photochemical method. Firstly, 3’-thiol-modified single stranded DNA was attached to the gate sensing layer of the diamond, and then the ssDNA-coated gate was hybridized with the complementary DNA. In the study, gate potential shift was determined to be between 30 mV and 100 mV with the reduced DNA surface density using a DNA-ISFET device. In general, the variation in surface conductivity can be explained from the transfer doping model, in which the increase in hole density will cause a decrease of pH value in the surface conductive layer of the diamond.
Estrela et al. employed MOS capacitors consisting of Au/SiO2/Si and Poly-Si TFTs with a gold metal gate as ISFET biosensor for label-free electrical detection of DNA hybridization [31]. When probe DNA bind to its complementary DNA, changes in electric potential in the electric double layer occur, leading to a shift in the C–V (capacitance–voltage) or I–V (current-voltage) characteristics. Their resuts showed that the discrimination of mismatched DNA was detected only 3 mismatched DNA, and no more. The authors proposed that by using this ISFET system with the appropriate DNA probes, it is potentially feasible to detect single-base-pair mismatches, revealing the possibility of the sensitive detection of single nucleotide polymorphisms (SNPs), one of the most frequent genetic alterations in the human population [32]. Since SNPs are commonly believed to be associated with response to drug and disease outcome, one of the most valuable applications of SNPs would be a biomedical application such as disease diagnosis and therapeutics. Along this line, Purushothaman et al. [33] suggested an application of ISFET technology for the detection of SNPs. In that study, the authors developed a useful procedure for sequencing one base via the detection of single-base mismatch in DNA.
Regarding DNA biosensors, many studies on ISFET coupled with electronic aptamer-based (EBA) sensors have been reported [34]. Aptamers are nucleic acids (DNA or RNA [ribonucleic acid)] or peptide that selectively bind to their specific target molecules such as small molecules, nucleic acids, proteins, and even cells [35–37]. An ISFET-based aptamer sensor also uses a label-free electrochemical detection technology, measuring the changes in electrochemical signals generated from the interaction between the target molecules and the aptamers. In this context, Zayats et al.
3.1 การประยุกต์ใช้ ISFET ดีเอ็นเอ
เมื่อสายดีเอ็นเอผูกเข้ากับพื้นผิวประตู ISFETs การเปลี่ยนแปลงในศักยภาพผิวเกิดขึ้นเนื่องจากการประจุลบของดีเอ็นเอจึงอนุญาตให้ประสิทธิภาพที่ดีเยี่ยมในการตรวจจับดีเอ็นเอ ผ่านการรักษาพิเศษชั้นออกไซด์ของ FET การสอบสวนดีเอ็นเอสามารถตรึงลงบนพื้นผิวออกไซด์ในลักษณะการวางแนวทางควบคุม ในฐานะที่เป็นวิธีการของการตรวจสอบดีเอ็นเอเทคนิคการใช้กันอย่างแพร่หลายขึ้นอยู่กับเอนไซม์, Fluorescent และแท็ก radiochemical แต่วิธีการเหล่านี้แม้ว่าพวกเขาจะแสดงความไวสูงและข้อ จำกัด ในการตรวจสอบในระดับต่ำไม่เพียงพอที่จะแก้ปัญหาเช่นเวลาการวิเคราะห์ค่าใช้จ่ายและความซับซ้อน ที่จะเอาชนะอุปสรรคเหล่านี้มีการตรวจสอบฉลากฟรีของดีเอ็นเอโดยใช้อุปกรณ์ FET ที่มีระบบเวลาจริงมิเตอร์ที่อ่านได้อย่างรวดเร็วไฟฟ้าสำหรับค่าใช้จ่ายที่มีประสิทธิภาพและการวิเคราะห์ที่เรียบง่ายของตัวอย่างดีเอ็นเอได้รับการเสนอ [8] ในฐานะที่เป็นเช่นนี้ซึ่งเป็นแพลตฟอร์มการตรวจสอบบนพื้นฐานของซิลิคอน (a-Si: H) สัณฐาน ISFET สำหรับการตรวจสอบฉลากฟรีตรึงโควาเลนต์ของ DNA และการผสมพันธุ์ตามมาของดีเอ็นเอที่สมบูรณ์ของมันได้รับการพัฒนาโดย Goncalves et al, [29] ในการศึกษานี้มีผลผูกพันดีเอ็นเอพฤติกรรมคือการตรวจสอบการใช้ไบโอเซนเซอร์ ISFET ซึ่งได้รับการสังเกตการเปลี่ยนแปลงแรงดันเกณฑ์ (Vth) ผ่านการตรวจสอบสนามไฟฟ้ามีการตอบสนองที่มีความสำคัญของศรี: H ISFET เพื่อกำหนดเป้าหมายดีเอ็นเอของระดับที่แตกต่างกันของการผสมพันธุ์เป็นที่สังเกต ตั้งแต่พื้นฐานทฤษฎีสำหรับแจ่มชัดข้อมูลอิเล็กทรอนิกส์ที่ได้รับจากการวัด ISFET ไม่แข็งแรงยกเว้นสำหรับพารามิเตอร์หลายอย่างเช่นผลกระทบค่าใช้จ่ายผลความจุ ฯลฯ มีการศึกษารายละเอียดเกี่ยวกับพฤติกรรมที่แท้จริงของไบโอเซนเซอร์ FET ฟิล์มบางจะช่วยในการพัฒนา อุปกรณ์ ISFET ขั้นสูงเหมาะสำหรับการตรวจสอบตัวอย่างจริง. การตรวจหาการผสมพันธุ์ของคู่ดีเอ็นเอควั่นได้ดำเนินการโดยใช้เพชรผลึกเดี่ยวสังเคราะห์โดยพลาสม่าเพิ่มไอสารเคมีการสะสม (PECVD) โดย Nebel et al, [30] ที่จะทำให้คลื่อดีเอ็นเอเข้าไปในชั้นการตรวจจับของ ISFET สร้าง amine ลิงเกอร์โมเลกุลโควาเลนต์กำลังมุ่งหน้าไปยังไฮโดรเจนรับการรักษาพื้นผิวเพชรโดยวิธีเคมี ประการแรก 3'-thiol แก้ไขเดียวควั่นดีเอ็นเอถูกแนบมากับชั้นประตูตรวจจับของเพชรและจากนั้นประตู ssDNA เคลือบถูกไฮบริดกับดีเอ็นเอที่สมบูรณ์ ในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงที่อาจเกิดขึ้นประตูมุ่งมั่นจะเป็นระหว่างวันที่ 30 mV และ 100 mV มีความหนาแน่นพื้นผิวดีเอ็นเอลดการใช้อุปกรณ์ดีเอ็นเอ ISFET โดยทั่วไปการเปลี่ยนแปลงในการนำพื้นผิวที่สามารถอธิบายได้จากรูปแบบการถ่ายโอนยาสลบซึ่งในการเพิ่มขึ้นของความหนาแน่นของหลุมจะทำให้เกิดการลดลงของค่าพีเอชในชั้นเป็นสื่อกระแสไฟฟ้าบนพื้นผิวของเพชร. Estrela et al, ตัวเก็บประจุ MOS ลูกจ้างประกอบด้วย Au / SiO2 / ศรีและโพลีศรี TFTs กับประตูโลหะทองเป็น ISFET ไบโอเซนเซอร์สำหรับการตรวจสอบฉลากไฟฟ้าฟรีของดีเอ็นเอ [31] เมื่อผูกสอบสวนดีเอ็นเอดีเอ็นเอที่สมบูรณ์ของการเปลี่ยนแปลงในศักย์ไฟฟ้าในสองชั้นไฟฟ้าเกิดขึ้นนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงใน C-V (ความจุแรงดัน) หรือ I-V (ปัจจุบันแรงดัน) ลักษณะ resuts ของพวกเขาแสดงให้เห็นว่าการเลือกปฏิบัติที่ไม่ตรงกันของดีเอ็นเอที่ถูกตรวจพบเพียง 3 ดีเอ็นเอที่ไม่ตรงกันและไม่มาก ผู้เขียนเสนอว่าด้วยการใช้ระบบ ISFET นี้ด้วยดีเอ็นเอโพรบที่เหมาะสมก็อาจเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบไม่ตรงกันฐานเดียวคู่เผยให้เห็นความเป็นไปได้ของการตรวจสอบที่มีความสำคัญของความหลากหลายเบื่อหน่ายเดียว (SNPs) ซึ่งเป็นหนึ่งในการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมที่พบบ่อยที่สุด ในประชากรมนุษย์ [32] ตั้งแต่ SNPs ที่เชื่อกันโดยทั่วไปจะเกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อยาเสพติดและโรคผลหนึ่งในโปรแกรมที่มีค่าที่สุดของ SNPs จะเป็นแอปพลิเคชีวการแพทย์เช่นการวินิจฉัยโรคและการบำบัดรักษาโรค ตามแนวนี้พู et al, [33] แนะนำการประยุกต์ใช้เทคโนโลยี ISFET สำหรับการตรวจหา SNPs ๆ ในการศึกษาที่ผู้เขียนได้พัฒนาเป็นขั้นตอนที่มีประโยชน์สำหรับลำดับฐานหนึ่งผ่านการตรวจสอบจากฐานเดียวที่ไม่ตรงกันใน DNA. เกี่ยวกับไบโอเซนเซอร์ดีเอ็นเอการศึกษาจำนวนมากใน ISFET คู่กับ (EBA) เซ็นเซอร์อิเล็กทรอนิกส์ aptamer ตามที่ได้รับรายงาน [34] Aptamers กรดนิวคลีอิก (DNA หรือ RNA [กรด ribonucleic)] หรือเปปไทด์ที่คัดเลือกผูกกับโมเลกุลเป้าหมายที่เฉพาะเจาะจงของพวกเขาเช่นโมเลกุลขนาดเล็ก, กรดนิวคลีอิกโปรตีนและแม้กระทั่งเซลล์ [35-37] เซ็นเซอร์ aptamer ISFET ที่ใช้ยังใช้ฉลากฟรีเทคโนโลยีการตรวจสอบไฟฟ้า, การวัดการเปลี่ยนแปลงในการส่งสัญญาณไฟฟ้าที่สร้างขึ้นจากการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างโมเลกุลเป้าหมายและ aptamers ที่ ในบริบทนี้ Zayats et al,
การแปล กรุณารอสักครู่..

3.1 . การใช้ isfet ดีเอ็นเอเมื่อเส้นดีเอ็นเอมัดประตู isfets พื้นผิวของพื้นผิว การเปลี่ยนแปลงอาจเกิดขึ้นเนื่องจากการประจุลบของดีเอ็นเอจึงช่วยให้ประสิทธิภาพที่ยอดเยี่ยมในดีเอ็นเอตรวจจับ . ผ่านการรักษาพิเศษของชั้นออกไซด์ของเฟต โพรบดีเอ็นเอสามารถตรึงลงบนพื้นผิวของออกไซด์ในลักษณะควบคุมการปฐมนิเทศ เป็นวิธีการตรวจหา ดีเอ็นเอ ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายเทคนิคขึ้นอยู่กับเอนไซม์ , เรืองแสง , และแท็ก radiochemical . แต่วิธีการเหล่านี้ แต่พวกเขาแสดงความไวสูงและจำกัดการค้นหาต่ำ ไม่เพียงพอที่จะแก้ไขปัญหา เช่น เวลาวิเคราะห์ต้นทุนและความซับซ้อน เพื่อเอาชนะอุปสรรคเหล่านี้ ป้ายชื่อฟรีการตรวจหาดีเอ็นเอโดยใช้อุปกรณ์เฟตด้วยระบบไฟฟ้าบนเรียลไทม์สำหรับอย่างรวดเร็ว ประหยัดต้นทุน และการวิเคราะห์ง่ายของดีเอ็นเอตัวอย่างได้รับการเสนอ [ 8 ] เป็นตัวอย่างของการตรวจสอบนี้ ขึ้นอยู่กับการใช้ซิลิคอนอสัณฐาน ( แพลตฟอร์มที่ไม่แน่นอน : H ) isfet สำหรับป้ายชื่อฟรีการตรวจหา DNA hybridization และไม่มีการตามมาของดีเอ็นเอซึ่งถูกพัฒนาโดย goncalves et al . [ 29 ] การศึกษาพฤติกรรมการใช้ดีเอ็นเอตรวจสอบ isfet ไบโอเซนเซอร์ ซึ่งพบว่า การเปลี่ยนแปลงในระดับแรงดัน ( vth ) ผ่านสนามไฟฟ้าการตอบสนองความไวของอะมอร์ฟัสซิลิคอน H isfet ดีเอ็นเอเป้าหมายของระดับที่แตกต่างกันของ hybridization พบว่า . ตั้งแต่ทฤษฎีพื้นฐานสำหรับการศึกษาอิเล็กทรอนิกส์ ข้อมูลที่ได้จากการวัด isfet ไม่แข็งแรง ยกเว้นหลายพารามิเตอร์เช่น ค่าใช้จ่าย ผล ความจุผล ฯลฯ ศึกษารายละเอียดเกี่ยวกับพฤติกรรมที่แท้จริงของฟิล์มเฟตตามจะช่วยพัฒนาอุปกรณ์ isfet ขั้นสูงเหมาะสำหรับการตรวจหาตัวอย่างจริงการตรวจสอบของ hybridization ของคู่เกลียวดีเอ็นเอ พบการใช้ชนิดผลึกเดี่ยวเพชรสังเคราะห์โดยพลาสมาเพิ่มขึ้น chemical vapor deposition ( pecvd ) โดย เนเบิล et al . [ 30 ] ดีเอ็นเอบนตัวเร่งปฏิกิริยาการสร้างชั้นของ isfet ละลายโมเลกุลถูกผูกไว้ covalently โปรแกรมเชื่อมโยงไฮโดรเจนรักษาพื้นผิวเพชรโดยวิธีเคมี . ประการแรก , 3 " - ขนาดแก้ไขเดียวเกลียวดีเอ็นเอแนบกับประตูตรวจจับชั้นของเพชรแล้ว ssdna เคลือบประตูคือดีเอ็นเอกับดีเอ็นเอที่สมบูรณ์แบบ ในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงที่อาจเกิดขึ้น ประตู ตัดสินใจอยู่ระหว่าง 30 และ 100 MV MV กับดีเอ็นเอของผิวลดการใช้อุปกรณ์ dna-isfet . โดยทั่วไปการเปลี่ยนแปลงในการนำพื้นผิวสามารถอธิบายได้จากการโอนการเป็นรูปแบบ ซึ่งการเพิ่มความหนาแน่นของหลุมจะทำให้การลดลงของค่า pH ในผิวชั้น conductive ของเพชรเ เตรลา et al . ใช้ตัวเก็บประจุ MOS ประกอบด้วย AU / SiO2 และโพลี / ศรีศรี tfts ด้วยโลหะทองประตูเป็น isfet ไบโอเซนเซอร์สำหรับตรวจจับดีเอ็นเอ hybridization ฟรีป้ายไฟฟ้า [ 31 ] เมื่อดีเอ็นเอมัดดีเอ็นเอประกอบ , การเปลี่ยนแปลงศักย์ไฟฟ้าในสองชั้นไฟฟ้าเกิดขึ้น นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงใน C - V ( ความจุ ( แรงดัน ) หรือผม ( V ( แรงดันปัจจุบัน ) ลักษณะ พวกเขาออกมา พบว่า การเลือกปฏิบัติไม่ตรงกัน ดีเอ็นเอตรวจ DNA ไม่ตรงกัน 3 เท่านั้น และไม่มี ผู้เขียนได้เสนอว่า ด้วยการใช้ระบบ isfet กับฟิวส์ดีเอ็นเอที่เหมาะสม มันอาจเป็นไปได้ที่จะตรวจสอบความไม่คู่ฐานเดียว แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการตรวจสอบความไวของความหลากหลายยีนเดี่ยว ( snps ) , หนึ่งของการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่พบบ่อยที่สุดในประชากรมนุษย์ [ 32 ] ตั้งแต่ snps มักเชื่อว่าจะเกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อผลของยา และโรค หนึ่งของงานที่มีคุณค่ามากที่สุดของ snps จะเป็นโปรแกรมทางการแพทย์ เช่น การวินิจฉัยและการรักษาโรค ตามบรรทัดนี้ purushothaman et al . [ 33 ] แนะนำการประยุกต์ใช้ isfet เทคโนโลยีการตรวจหา snps . ในการศึกษาที่ผู้เขียนพัฒนากระบวนการที่มีประโยชน์สำหรับการติดตามฐานผ่านการตรวจหาไม่ตรงกันในฐานเดียว DNAเกี่ยวกับดีเอ็นเอไบโอเซนเซอร์หลายการศึกษา isfet คู่กับ aptamer อิเล็กทรอนิกส์ตาม ( EBA ) เซ็นเซอร์ได้รับรายงาน [ 34 ] แอปตาเมอร์เป็นกรดนิวคลีอิก ( DNA หรือ RNA [ สาธารณรัฐสังคมนิยมประชาธิปไตยศรีลังกา ) ] หรือเปปไทด์ที่เลือกผูกกับโมเลกุลเป้าหมายเฉพาะของตน เช่น โมเลกุลเล็ก , กรดนิวคลีอิก , โปรตีน , และแม้กระทั่งเซลล์ [ 35 - 37 ] การ isfet aptamer เซ็นเซอร์ที่ใช้ยังใช้ฟรีป้ายไฟฟ้าตรวจจับเทคโนโลยีวัดการเปลี่ยนแปลงทางไฟฟ้าเคมีของสัญญาณที่เกิดจากปฏิสัมพันธ์ระหว่างโมเลกุลเป้าหมายและแอปตาเมอร์ . ในบริบทนี้ zayats et al .
การแปล กรุณารอสักครู่..
