1.Multiplex PCR is carried out in 20mL of a reaction mixture.
A master mix for all reactions is prepared by adding the volumes
of the required solutions to one tube: 2.0mL 10× PCR buffer
with KCl, 1.2mL MgCl2 (25 mM), 2.0mL dNTPs (2 mM
each), 0.5mL GC1F primer (40 pmol/mL), 0.4mL GC2F
primer (5 pmol/mL), 0.5mL GC3R primer (40 pmol/mL),
0.4mL GC4R primer (5 pmol/mL), 0.5mL TetMF primer
(30 pmol/mL), 0.5mL TetMR primer (30 pmol/mL), 0.25mL
GyrAF primer (10 pmol/mL), 0.25mL GyrAR primer
(10 pmol/mL), 0.2mL GFPuvF primer (10 pmol/mL), 0.2mL
GFPuvR primer (10 pmol/mL), 0.5mL pH6GFPuv template
(2 ng/mL), and 0.3mL Taq polymerase (1 U/mL). Solution is
mixed gently by pipetting up and down
1. multiplex PCR จะดำเนินใน 20mL มีส่วนผสมของปฏิกิริยาผสมหลักสำหรับปฏิกิริยาทั้งหมดจะเตรียม โดยการเพิ่มไดรฟ์ข้อมูลโซลูชั่นต้องการหลอดหนึ่ง: 2.0mL 10 × PCR บัฟเฟอร์มี KCl, 1.2mL MgCl2 (25 mM), 2.0mL dNTPs (2 มม.แต่ละ), 0.5 mL GC1F รองพื้น (40 pmol/มล) 0.4 mL GC2Fสีรองพื้น (5 pmol/มล), 0.5mL รองพื้น GC3R (40 pmol/มล.),0.4mL รองพื้น GC4R (5 pmol/มล), 0.5mL รองพื้น TetMF(30 pmol/มล), 0.5mL รองพื้น TetMR (30 pmol/มล) 0.25mLGyrAF รองพื้น (10 pmol/มล), 0.25mL รองพื้น GyrAR(10 pmol/มล), มล 0.2, 0.2mL รองพื้น GFPuvF (10 pmol/มล.)GFPuvR รองพื้น (10 pmol/มล), แม่ pH6GFPuv 0.5mL(2 ng/mL), และพอลิเมอเรส Taq 0.3mL (1 U/mL) การแก้ไขปัญหาผสมเบา ๆ ด้วย pipetting ขึ้นและลง
การแปล กรุณารอสักครู่..

1.Multiplex PCR จะดำเนินการใน 20 มลของผสมปฏิกิริยา.
ผสมต้นแบบสำหรับปฏิกิริยาทั้งหมดจะถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่มปริมาณ
ของการแก้ปัญหาที่จำเป็นในการอย่างใดอย่างหนึ่งหลอด: 2.0mL 10 ×บัฟเฟอร์ PCR
กับ KCl, 1.2mL MgCl2 (25 มิลลิเมตร) , 2.0mL dNTPs (2 มิลลิ
แต่ละ), ไพรเมอร์ 0.5mL GC1F (40 pmol / มิลลิลิตร), 0.4mL GC2F
ไพรเมอร์ (5 pmol / มิลลิลิตร) ไพรเมอร์ 0.5mL GC3R (40 pmol / มิลลิลิตร),
ไพรเมอร์ 0.4mL GC4R (5 pmol / มิลลิลิตร) ไพรเมอร์ 0.5mL TetMF
(30 pmol / มิลลิลิตร) ไพรเมอร์ 0.5mL TetMR (30 pmol / มิลลิลิตร), 0.25mL
GyrAF ไพรเมอร์ (10 pmol / มิลลิลิตร) ไพรเมอร์ 0.25mL GyrAR
(10 pmol / มิลลิลิตร), 0.2mL ไพรเมอร์ GFPuvF (10 pmol / มิลลิลิตร), 0.2mL
GFPuvR ไพรเมอร์ (10 pmol / มิลลิลิตร), 0.5mL pH6GFPuv แม่แบบ
(2 นาโนกรัม / มิลลิลิตร) และโพลิเมอร์ Taq 0.3mL (1 U / มิลลิลิตร) วิธีการแก้ปัญหาคือการ
ผสมเบา ๆ โดยการปิเปตขึ้นและลง
การแปล กรุณารอสักครู่..
