1. IntroductionAeromonas hydrophila

1. Introduction
Aeromonas hydrophila is an important fish pathogen in aquaculture
systems, and millions of dollars are estimated to be lost
per annum due to the diseases caused by this bacterium [1]. The
pathogen is responsible for causing a number of different diseases
including motile Aeromonas septicaemia [2]. The symptoms of A.
hydrophila infections include swelling of tissues, dropsy, red sores,
necrosis, ulceration and haemorrhagic septicaemia [3,4], and the
pathogen can affect a variety of fish species including common carp
[3], cat fish [5], tilapia [6], eel [7] and goldfish [8].
The use of vaccines in the aquaculture industry has been important
in reducing economic losses which occur as a result of disease
[9,10] and in the reduction in use of antibiotics [11].Anumberof different
types of vaccines have been developed against A. hydrophila
for use in fish, such as whole cell (WC) [12,13], outer membrane
protein (OMP) [14], extracellular products (ECPs), lipopolysaccharide
(LPS) preparations [15] and also biofilms [16]. Although these
different preparations have provided varying degrees of protection in fish, there is still no commercial vaccine available for A.hydrophila [1]. This could be due to an inability of these vaccines
to cross-protect against different isolates of A. hydrophila. This bacterium
is very heterogeneous in nature (both biochemically and
serologically), and this has been one of the greatest obstacles in
developing an effective vaccine against A. hydrophila [17]. It might
be possible to overcome this problem if a common antigen(s) could
be identified among different isolates of A. hydrophila that could
serve as a vaccine candidate(s) [13].
Proteomics combined with Western blotting (i.e. immunoproteomics)
is a useful tool for identifying proteins of interest for
vaccine development [18]. Separation and characterisation of complex
mixtures of proteins by two-dimensional sodium dodecyl
sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (2D SDS-PAGE) provides
information about the expression of proteins by bacterial
pathogens [19]. Further analysis by Western blotting using serum
from infected fish, or from fish which have recovered from the disease,
allows identification of antigens recognised by the immune
system of the infected host [19]. Together, these two techniques can
help identify potential candidates for vaccine development [20].
Although it is possible to identify a variety of immunogenic antigens
on the bacterium using this method, the antigen must also be
protective against a wide range of A. hydrophila isolates in order to be considered as a suitable vaccine candidate [21]. It is possible
to evaluate the level of protection elicited by a target antigen by
vaccinating the fish with the antigen and then subsequently experimentally
infecting the fish with live pathogen and establishing the
level of survival in vaccinated fish [22].
Another important factor in vaccine development is the ability
to produce sufficient quantities of the protective proteins
for commercialisation of the vaccine. Researchers are now using
recombinant DNA technology to develop protein vaccines because
it provides a means of economically producing sufficient quantities
of the immunoprotective antigen [23,24]. Such vaccines have
enormous potential in the aquaculture industry as they provide
an alternative approach to traditional formalin-killedWCvaccines,
which are not always efficacious, and they are safe compared to
live attenuated bacteria used in vaccines which can possibly revert
to becoming pathogenic [25]. Recombinant protein vaccines have
been reported to confer protection against a variety of human and
animal pathogens (Yersinia pestis [26], rabies virus [27], Plasmodium
falciparum [28]) including fish (Ichthyophthirius multifiliis [29],
Piscirickettsia salmonis [23]).
We previously examined the differential expression of cellular
proteins (WC and OMP) and ECPs of six isolates (four virulent and
two avirulent) of A. hydrophila, cultured either in vitro in tryptone
soy broth or in vivo in dialysis tubing implanted within the peritoneal
cavity of common carp [30]. Using 1D SDS-PAGE of WC,
OMP and ECP preparations and 2D SDS-PAGE of the WC preparation,
unique and up-regulated proteins were observed in bacteria
grown in vivo. In a subsequent study, common carp were infected
with thesamesix isolates of A. hydrophila in order to obtain antibodies
elicited by the fish against proteins of various bacterial isolates
expressed in vivo during infection [31]. The immune-recognition
pattern of these antibodies against WC, OMP and ECP preparations
of the six isolates grown either in vitro or in vivo was compared
by the Western blot analysis. A common antigen found on all the
isolates at around 50 kDa, was identified as an S-layer protein by
MALDI TOF mass spectrometry. The aim of the present study was to
produce the S-layer protein of A. hydrophila by recombinant technology
to ensure sufficient quantity of the protein for a vaccination
trial to assess the level of protection elicited by the recombinant
protein, and to verify if this recombinant protein was capable of
cross-protecting against different isolates of A. hydrophila.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. บทนำAeromonas hydrophila เป็นการศึกษาปลาที่สำคัญในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำระบบ และล้านดอลลาร์ไว้สูญหายต่อปีเนื่องจากโรคที่เกิดจากแบคทีเรียนี้ [1] ที่การศึกษารับผิดชอบทำให้จำนวนของโรคแตกต่างกันรวม motile Aeromonas septicaemia [2] อาการของติดเชื้อ hydrophila รวมบวมของเนื้อเยื่อ dropsy แสบแดงการตายเฉพาะส่วน ulceration และ septicaemia haemorrhagic [3, 4], และการศึกษาสามารถส่งผลกระทบต่อความหลากหลายของพันธุ์ปลารวมทั้งปลาไน[3], ปลาแมว [5], [6] ปลานิล ปลา [7] และปลาทอง [8]ใช้ค่าวัคซีนในอุตสาหกรรมเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำได้รับความสำคัญในการลดการสูญเสียทางเศรษฐกิจที่เกิดขึ้นจากโรค[9,10] และ ในการลดการใช้ปฏิชีวนะ [11] Anumberof แตกต่างกันชนิดของค่าวัคซีนที่ได้รับการพัฒนาต่อ A. hydrophilaสำหรับใช้ในปลา เซลล์ทั้งหมด (สุขา) [12,13], เมมเบรนนอกโปรตีน (OMP) [14] lipopolysaccharide, extracellular ผลิตภัณฑ์ (ECPs)เตรียม (LPS) [15] และ biofilms [16] แม้ว่าเหล่านี้เตรียมการต่าง ๆ ให้ภาป้องกันในปลา ยังมีวัคซีนไม่ค้าหา A.hydrophila [1] อาจเป็น เพราะความไม่รู้เหล่านี้การข้ามป้องกันการแตกแยกของ A. hydrophila แบคทีเรียนี้จะแตกต่างกันมากในธรรมชาติ (ทั้ง biochemically และserologically), และนี้ได้รับหนึ่งในอุปสรรคที่ยิ่งใหญ่ที่สุดในการพัฒนาวัคซีนมีประสิทธิภาพต่อ A. hydrophila [17] มันอาจสามารถเอาชนะปัญหานี้ถ้า antigen(s) ทั่วไปสามารถสามารถระบุแยกของ A. hydrophila ที่อาจแตกต่างกันทำหน้าที่เป็น candidate(s) วัคซีน [13]โปรตีโอมิกส์ร่วมกับเวสเทิร์น blotting วิธี (เช่น immunoproteomics)เป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์สำหรับการระบุโปรตีนของดอกเบี้ยพัฒนาวัคซีน [18] คัดแยกและตรวจลักษณะเฉพาะของของคอมเพล็กซ์ส่วนผสมของโปรตีนโดย dodecyl โซเดียมสองมีซัลเฟต polyacrylamide เจ electrophoresis (2D SDS-หน้า)ข้อมูลเกี่ยวกับค่าของโปรตีนโดยแบคทีเรียโรค [19] วิเคราะห์เพิ่มเติม โดยตะวันตก blotting วิธีใช้เซรั่มจากปลาที่ติดเชื้อ หรือปลาซึ่งได้รับการกู้คืนจากโรครหัส antigens ยัง โดยภูมิคุ้มกันช่วยให้ระบบโฮสต์ติดไวรัส [19] ร่วมกัน เทคนิคสองเหล่านี้สามารถช่วยระบุผู้ที่มีศักยภาพสำหรับการพัฒนาวัคซีน [20]แม้ว่าการระบุหลากหลาย immunogenic antigensในแบคทีเรียโดยใช้วิธีการนี้ การตรวจหายังต้องป้องกันจากความกว้างช่วงของ A. hydrophila ที่แยกได้เพื่อพิจารณาเป็นตัวเลือกวัคซีนที่เหมาะสม [21] เป็นไปได้การประเมินระดับการป้องกัน elicited โดยการตรวจหาเป้าหมายโดยvaccinating ปลากับการตรวจหาและ experimentally ในเวลาต่อมาติดปลา มีชีวิตการศึกษา และสร้างการระดับของการอยู่รอดในปลาฉีด [22]อีกหนึ่งปัจจัยสำคัญในการพัฒนาวัคซีนคือการผลิตปริมาณที่เพียงพอของโปรตีนป้องกันสำหรับ commercialisation ของวัคซีน ตอนนี้ใช้นักวิจัยวททชดีเอ็นเอเทคโนโลยีพัฒนารู้โปรตีนเนื่องจากมีวิธีการผลิตปริมาณที่เพียงพอสะอาดของการ immunoprotective ตรวจหา [23,24] รู้ดังกล่าวได้ขนาดใหญ่มีศักยภาพในอุตสาหกรรมสัตว์น้ำ ตามที่พวกเขาให้วิธีการสำรองการ formalin ดั้งเดิม-killedWCvaccinesซึ่งมักไม่บ็อช และพวกเขาจะปลอดภัยเมื่อเทียบกับสดใช้ในการรู้ซึ่งอาจแปลงกลับแบคทีเรียไฟฟ้าเคร...จะกลายเป็น pathogenic [25] ค่าวัคซีน recombinant โปรตีนได้การรายงานประสาทป้องกันความหลากหลายของบุคคล และโรคสัตว์ (Yersinia pestis [26], โรคไวรัส [27], พลาสโมเดียม[28] falciparum) รวมทั้งปลา (Ichthyophthirius multifiliis [29],Piscirickettsia salmonis [23])เราเคยตรวจสอบนิพจน์ส่วนของมือถือโปรตีน (สุขาและ OMP) และ ECPs ของแยก 6 (virulent 4 และสอง avirulent) ของ A. hydrophila, cultured ในหลอดใน tryptoneซุปถั่วเหลือง หรือในสัตว์ทดลองในท่อหน่วย implanted ภายใน peritonealช่องของไน [30] ใช้สุขา SDS 1D หน้าเตรียม OMP และ ECP และ SDS 2D หน้าจัดเตรียมสุขาสุภัคเอกลักษณ์ และ ควบคุมค่าโปรตีนในแบคทีเรียการเติบโตในสัตว์ทดลอง ในการศึกษาต่อ ไนได้ติดเชื้อมี thesamesix แยกของ A. hydrophila เพื่อรับแอนตี้elicited โดยปลากับโปรตีนของแยกแบคทีเรียต่าง ๆแสดงในสัตว์ทดลองในระหว่างการติดเชื้อ [31] รู้ภูมิคุ้มกันรูปแบบของแอนตี้เหล่านี้กับเตรียมสุขา OMP และ ECPของการหกแยกปลูกเพาะเลี้ยง หรือในสัตว์ทดลองเปรียบเทียบโดยตะวันตกทำลายวิเคราะห์ ตรวจหาทั่วไปที่พบในทุกแยกที่ประมาณ 50 kDa ระบุเป็นเป็นโปรตีนชั้น S โดยMALDI TOF รเมท จุดมุ่งหมายของการศึกษาปัจจุบันได้ผลิตโปรตีนชั้น S ของ A. hydrophila recombinant เทคโนโลยีเพื่อให้ปริมาณเพียงพอของโปรตีนสำหรับการฉีดวัคซีนทดลองใช้เพื่อประเมินระดับการป้องกัน elicited โดยวททชโปรตีน และ การตรวจสอบถ้า โปรตีน recombinant นี้มีความสามารถในการขนป้องกันแยกต่าง ๆ ของ A. hydrophila

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1. บทนำ
Aeromonas hydrophila
เป็นเชื้อโรคปลาที่สำคัญในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำระบบและล้านดอลลาร์คาดว่าจะได้รับการสูญเสียต่อปีเนื่องจากโรคที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรียนี้
[1]
เชื้อโรคเป็นผู้รับผิดชอบในการก่อให้เกิดจำนวนของโรคที่แตกต่างกันรวมทั้งภาวะโลหิตเป็นพิษเคลื่อนที่ Aeromonas [2]
อาการของเอติดเชื้อ hydrophila รวมถึงอาการบวมของเนื้อเยื่อท้องมานแผลแดงเนื้อร้ายเป็นแผลและติดเชื้อตกเลือด[3,4] และเชื้อโรคที่สามารถส่งผลกระทบต่อความหลากหลายของพันธุ์ปลารวมทั้งปลาคาร์พที่พบบ่อย[3] ปลาแมว [5 ], ปลานิล [6] ปลาไหล [7] และปลาทอง [8]. การใช้วัคซีนในอุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำได้รับความสำคัญในการลดความสูญเสียทางเศรษฐกิจที่เกิดขึ้นเป็นผลมาจากโรค[9,10] และลดลงในการใช้งาน ยาปฏิชีวนะ [11] .Anumberof ที่แตกต่างกันชนิดของวัคซีนได้รับการพัฒนากับA. hydrophila สำหรับการใช้งานในปลาเช่นเซลล์ทั้งหมด (ห้องสุขา) [12,13] เยื่อหุ้มชั้นนอกโปรตีน(OMP) [14], ผลิตภัณฑ์สาร (ECPs ) lipopolysaccharide (LPS) เตรียม [15] และไบโอฟิล์ม [16] ถึงแม้ว่าเหล่านี้การเตรียมการที่แตกต่างกันได้ให้องศาที่แตกต่างของการป้องกันในปลายังคงไม่มีการฉีดวัคซีนในเชิงพาณิชย์สามารถใช้ได้สำหรับ A.hydrophila [1] ซึ่งอาจเป็นเพราะไม่สามารถวัคซีนเหล่านี้ข้ามป้องกันสายพันธุ์ที่แตกต่างกันของ A. hydrophila แบคทีเรียนี้เป็นที่แตกต่างกันมากในธรรมชาติ(ทั้งทางชีวเคมีและทางน้ำเหลือง) และนี่เป็นหนึ่งในอุปสรรคที่ยิ่งใหญ่ที่สุดในการพัฒนาวัคซีนที่มีประสิทธิภาพต่อ hydrophila เอ [17] มันอาจจะเป็นไปได้ที่จะเอาชนะปัญหานี้หากแอนติเจนที่พบบ่อย (s) อาจจะมีการระบุสายพันธุ์ที่แตกต่างกันในหมู่ของA. hydrophila ที่สามารถทำหน้าที่เป็นวัคซีน(s) [13]. เซ็กเมนต์รวมกับเวสเทิร์ blotting (เช่น immunoproteomics) เป็น เครื่องมือที่มีประโยชน์สำหรับการระบุโปรตีนที่น่าสนใจสำหรับการพัฒนาวัคซีน[18] การแยกและลักษณะที่ซับซ้อนผสมของโปรตีนสองมิติโซเดียมโดเดซิลอิเลคเจลซัลเฟตอะคริเลต(2D SDS-PAGE) ให้ข้อมูลเกี่ยวกับการแสดงออกของโปรตีนโดยแบคทีเรียเชื้อโรค[19] การวิเคราะห์ต่อไปโดยวิธี western blotting โดยใช้ซีรั่มจากปลาที่ติดเชื้อหรือจากปลาที่ได้หายจากโรคที่ช่วยให้บัตรประจำตัวของแอนติเจนรับการยอมรับจากภูมิคุ้มกันของระบบการทำงานของโฮสต์ที่ติดเชื้อ[19] ร่วมกันทั้งสองเทคนิคสามารถช่วยในการระบุผู้ที่มีศักยภาพสำหรับการพัฒนาวัคซีน [20]. แม้ว่ามันจะเป็นไปได้ที่จะระบุความหลากหลายของแอนติเจนภูมิคุ้มกันในแบคทีเรียใช้วิธีนี้แอนติเจนยังต้องป้องกันความหลากหลายของสายพันธุ์A. hydrophila เพื่อที่จะได้รับการพิจารณาเป็นวัคซีนที่เหมาะสม [21] มันเป็นไปได้ในการประเมินระดับของการป้องกันออกมาโดยแอนติเจนเป้าหมายโดยการฉีดวัคซีนปลาที่มีแอนติเจนและจากนั้นต่อมาทดลองติดไวรัสปลาที่มีเชื้อโรคมีชีวิตอยู่และสร้างระดับของการอยู่รอดในปลาฉีดวัคซีน[22]. อีกหนึ่งปัจจัยสำคัญในการพัฒนาวัคซีน คือความสามารถในการผลิตปริมาณที่เพียงพอของโปรตีนป้องกันสำหรับการค้าของวัคซีน นักวิจัยกำลังใช้เทคโนโลยีดีเอ็นเอในการพัฒนาวัคซีนโปรตีนเพราะมันให้ความหมายของเศรษฐกิจการผลิตปริมาณที่เพียงพอของแอนติเจนimmunoprotective [23,24] วัคซีนดังกล่าวมีศักยภาพมหาศาลในอุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำที่พวกเขาให้วิธีการทางเลือกที่จะฟอร์มาลินkilledWCvaccines แบบดั้งเดิมที่ไม่เคยมีประสิทธิภาพและมีความปลอดภัยเมื่อเทียบกับการอาศัยอยู่แบคทีเรียเชื้อที่ใช้ในการฉีดวัคซีนซึ่งอาจจะสามารถกลับจะกลายเป็นที่ทำให้เกิดโรค[25] วัคซีนโปรตีนได้รับการรายงานเพื่อให้คำปรึกษาการป้องกันความหลากหลายของมนุษย์และเชื้อโรคจากสัตว์(Yersinia pestis [26] ไวรัสโรคพิษสุนัขบ้า [27], Plasmodium falciparum [28]) รวมทั้งปลา (multifiliis Ichthyophthirius [29], Piscirickettsia salmonis [23] ). ก่อนหน้านี้เราตรวจสอบการแสดงออกที่แตกต่างกันของโทรศัพท์มือถือโปรตีน (ห้องสุขาและ OMP) และ ECPs หกไอโซเลท (สี่รุนแรงและสองavirulent) ของ A. hydrophila, เลี้ยงทั้งในหลอดทดลองใน tryptone น้ำซุปถั่วเหลืองหรือในร่างกายในการฟอกไตท่อฝังอยู่ภายใน ทางช่องท้องโพรงของปลาคาร์พที่พบบ่อย[30] การใช้ 1D SDS-PAGE ของสุขาOMP และการเตรียมการ ECP และ 2D SDS-PAGE ของการจัดทำสุขาที่ไม่ซ้ำกันและโปรตีนขึ้นควบคุมพบในแบคทีเรียที่เจริญเติบโตในร่างกาย ในการศึกษาต่อมาปลาคาร์พที่พบมีการติดเชื้อที่มีสายพันธุ์ thesamesix ของ A. hydrophila เพื่อให้ได้แอนติบอดี้ที่เกิดจากปลากับโปรตีนของเชื้อแบคทีเรียต่างๆแสดงในร่างกายระหว่างการติดเชื้อ[31] ภูมิคุ้มกันการรับรู้รูปแบบของแอนติบอดีเหล่านี้กับสุขา OMP และการเตรียมการ ECP ในหกสายพันธุ์ที่ปลูกได้ทั้งในหลอดทดลองหรือในร่างกายเมื่อเทียบจากการวิเคราะห์ดวงตะวัน แอนติเจนที่พบในทุกสายพันธุ์ที่ประมาณ 50 กิโลดาลตันได้รับการระบุว่าเป็นโปรตีน S-ชั้นโดย MALDI TOF มวลสาร จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการผลิตโปรตีน S-ชั้นของ A. hydrophila โดยเทคโนโลยี recombinant เพื่อให้แน่ใจว่าปริมาณที่เพียงพอของโปรตีนสำหรับการฉีดวัคซีนทดลองใช้ในการประเมินระดับของการป้องกันออกมาจาก recombinant โปรตีนและเพื่อตรวจสอบว่า recombinant นี้ โปรตีนเป็นความสามารถในการข้ามสายพันธุ์ป้องกันการแตกต่างกันของA. hydrophila

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 บทนำ
hydrophila เป็นเชื้อโรคที่สำคัญปลาในระบบการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ
และล้านดอลลาร์ คาดว่าจะสูญเสีย
ต่อปีเนื่องจากโรคที่เกิดจากเชื้อนี้ [ 1 ]
เชื้อโรครับผิดชอบในการก่อให้เกิดจำนวนของโรคที่แตกต่างกันรวมทั้งเชื้อ
เคลื่อนที่ภาวะเลือดเป็นพิษ [ 2 ] อาการของการติดเชื้อ ได้แก่ อาการบวมของ A .
ในเนื้อเยื่อ ท้องมาน ,แดงแผลเนื้อตายและแผลเปื่อยตกเลือด
, ภาวะเลือดเป็นพิษ [ 3 , 4 ] และ
เชื้อโรคสามารถส่งผลกระทบต่อความหลากหลายของชนิดปลาที่พบได้แก่ ปลาคาร์พ ปลา แมว
[ 3 ] [ 5 ] [ 6 ] , ปลานิล , ปลาไหล [ 7 ] และปลาทอง [ 8 ] .
การใช้วัคซีนในอุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำได้ สำคัญในการลดความเสียหายทางเศรษฐกิจ
ซึ่งเกิดขึ้นเป็นผลจากโรค
[ 9,10 ] และในการลดการใช้ยาปฏิชีวนะ [ 11 ]anumberof แตกต่างกัน
ประเภทวัคซีนได้รับการพัฒนากับ A . hydrophila
สำหรับใช้ในปลาเช่นทั้งเซลล์ ( WC ) [ 12 , 13 ‘โปรตีนเมมเบรนชั้นนอก ] ,
( OMP ) [ 14 ] ผลิตภัณฑ์ภายนอก ( ecps ) สีดำเข้ม
( หล่อลื่น ) การเตรียม [ 15 ] และไบโอฟิล์ม [ 16 ] แม้ว่าเหล่านี้
การเตรียมแตกต่างกันมีองศาที่แตกต่างของความคุ้มครองในปลายังไม่มีวัคซีนใช้ในเชิงพาณิชย์สำหรับ a.hydrophila [ 1 ] นี้อาจจะเนื่องจากการไร้ความสามารถของวัคซีน
เหล่านี้ข้ามป้องกันเชื้อ A . hydrophila ที่แตกต่างกัน . นี้ สำหรับข้อมูล
มากในธรรมชาติ ( ทั้ง biochemically และ
คนที่ ) , และนี้ได้รับหนึ่งในอุปสรรคที่ยิ่งใหญ่ที่สุดในการพัฒนาวัคซีนที่มีประสิทธิภาพ
A . hydrophila [ 17 ] มันอาจ
เป็นไปได้ที่จะเอาชนะปัญหานี้ ถ้าเป็นแอนติเจนที่พบ ( s ) จะถูกระบุในสายพันธุ์ที่แตกต่างกัน

. hydrophila ที่ใช้เป็นวัคซีน candidate ( S ) [ 13 ] .
แสดงร่วมกับ Western blotting ( เช่น immunoproteomics )
เป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์สำหรับการระบุโปรตีนที่น่าสนใจสำหรับการพัฒนาวัคซีน [ 18 ] การแยกเซลล์และซับซ้อน
ส่วนผสมของโปรตีนโดยโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต 2
polyacrylamide gel electrophoresis ( SDS-PAGE
2 ) ให้ข้อมูลเกี่ยวกับการแสดงออกของโปรตีนจากแบคทีเรีย
เชื้อโรค [ 19 ] การวิเคราะห์เพิ่มเติมโดย Western blotting ใช้เซรั่ม
จากปลาที่ติดเชื้อ หรือปลา ซึ่งได้หายจากโรค การได้รับการยอมรับโดยให้ต่อ

ภูมิคุ้มกันของระบบที่ติดเชื้อโฮสต์ [ 19 ] ด้วยกัน ซึ่งทั้งสองเทคนิคนี้สามารถ
ช่วยระบุผู้สมัครศักยภาพในการพัฒนาวัคซีน [ 20 ] .
ถึงแม้ว่ามันเป็นไปได้ที่จะระบุความหลากหลายของแอนติเจนบน
immunogenic สามารถใช้วิธีการนี้ แอนติเจนยังต้อง
ป้องกันหลากหลายของ A . hydrophila สายพันธุ์เพื่อที่จะเป็นผู้สมัครที่เหมาะสม [ วัคซีน 21 ]มันเป็นไปได้
เพื่อประเมินระดับของการป้องกันโดยใช้แอนติเจนเป้าหมายโดย
วัคซีนปลากับแอนติเจนและจากนั้นต่อมาการทดลอง
ติดปลาอยู่กับเชื้อโรค และสร้างระดับของการอยู่รอดในปลาที่ได้รับวัคซีน
[ 22 ] .
อีกหนึ่งปัจจัยสำคัญในการพัฒนาวัคซีน คือ ความสามารถที่จะผลิตในปริมาณที่เพียงพอของ
โปรตีนป้องกัน
เพื่อการพาณิชย์ของวัคซีน นักวิจัยได้ใช้เทคโนโลยีดีเอ็นเอเพื่อพัฒนาวัคซีน

โปรตีนเพราะมันมีวิธีการในการผลิตปริมาณของเพียงพอ
[ แอนติเจน immunoprotective 23,24 ] วัคซีนดังกล่าวมีศักยภาพมหาศาลในอุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ

ตามที่พวกเขาให้วิธีการ killedwcvaccines
ฟอร์มาลินดั้งเดิมซึ่งจะไม่เสมอได้ และพวกเขาจะปลอดภัยเมื่อเทียบกับการใช้วัคซีนแบคทีเรีย
อยู่ซึ่งอาจจะสามารถแปลงให้กลายเป็นเชื้อโรค
[ 25 ] วัคซีนโปรตีนรีคอมบิแนนท์ได้
รายงานหารือป้องกันความหลากหลายของมนุษย์และสัตว์เชื้อโรค ( เยอซิเนีย
pestis [ 26 ] , เชื้อพิษสุนัขบ้า [ 27 ] , พลาสโมเดียมมาลาเรีย
[ 28 ] ) ได้แก่ ปลา ( ichthyophthirius multifiliis
[ 29 ]piscirickettsia salmonis [ 23 ] )
เราเคยตรวจสอบความแตกต่างการแสดงออกของโปรตีนของเซลล์
( ห้องสุขาและ OMP ) และ ecps 6 ไอโซเลต ( สี่รุนแรงและ
2 avirulent ) . การทดสอบในหลอดทดลองเพาะเลี้ยงทั้งในซุปถั่วเหลือง หรือทริพโทน
ในสิ่งมีชีวิตในท่อไตอยู่ภายในโพรงเยื่อบุช่องท้อง
ของปลาไน [ 30 ] ใช้ 1D
การแก้ปัญหาของสุขาOMP และการเตรียมการ ECP และ 2D ของห้องสุขาการเตรียมเอนไซม์ , โปรตีนที่ไม่ซ้ำกันและสามารถพบ

โตแบคทีเรียในร่างกาย ในการศึกษาต่อมาพบปลาคาร์พติดเชื้อด้วยเชื้อ A . hydrophila thesamesix

เพื่อให้ได้ภูมิคุ้มกันโดยใช้ปลากับโปรตีนต่างๆของแบคทีเรียที่คัดเลือก
แสดงฤทธิ์ในในระหว่างการติดเชื้อ [ 31 ] การรับรู้ของ
รูปแบบของแอนติบอดีเหล่านี้กับห้องสุขา OMP และ ECP การเตรียม
ของหกสายพันธุ์ปลูกในหลอดทดลองหรือในร่างกายเทียบ
โดยการวิเคราะห์ Western blot . แอนติเจนที่พบทั่วไปในทุก
ไอโซเลทที่ประมาณ 50 กิโล ถูกระบุว่าเป็นการ s-layer โปรตีนโดย
มา ดิ tof แมสสเปกโทรเมตรี จุดมุ่งหมายของการศึกษาคือ เพื่อผลิตโปรตีนเอ

s-layer การให้เทคโนโลยีรีคอมบิแนนท์เพื่อให้แน่ใจว่าปริมาณที่เพียงพอของโปรตีนสำหรับวัคซีน
ทดลองเพื่อประเมินระดับของการป้องกันโดยใช้โปรตีนรีคอมบิแนนท์
และเพื่อตรวจสอบว่าโปรตีนรีคอมบิแนนท์นี้มีความสามารถในการป้องกันที่แตกต่างกัน
ข้ามแยกเชื้อ A . hydrophila .