fixed overnight in Bouin’s fixative

fixed overnight in Bouin’s fixative, at 4 ◦C. They
were then washed with 70% ethanol and dehydrated through a
series of ethanol, transferred into toluene, infiltrated with melted
paraffin, and embedded in paraffin blocks. Serial sections of 5m
thick weremadeat the mid-region of the AGs, using a LeicaRM2235
microtome, and then placed on silane coated-slides and air dried
overnight. The paraffin sections were deparaffinized with xylene,
then rehydrated through a series of ethyl alcohol, stained with Harris’s
hematoxylin for 1min and counterstained with eosin for 2min.
They were then dehydrated with a series of ethyl alcohol, cleared
with xylene, and mounted in Permount (Bio-Optica, Milan, Italy).
Sections were examined using a Nikon eclipse E600 microscope
and photographed with a Nikon digital camera DXM1200.
The numbers of cell types present in the AGs were
quantified from uniform cross-sections, using ImageJ software
(http://rsbweb.nih.gov/ij/index.html), then recorded as percentages
of the total cells. In the BrdU assay groups (see Section 2.5),
the numbers of dividing cells per mm2 area were counted by the
same method

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ค้างคืนที่ถาวรในการตรึงของสแตด ที่ 4 ◦C พวกเขาจากนั้นล้าง ด้วย 70% เอทานอล และอบแห้งผ่านการเตรียมชุดของเอทานอล โอนเข้าโทลูอีน แทรกซึมด้วยพาราฟิน และฝังตัวในพาราฟินบล็อก ส่วนอนุกรม 5 เมตรหนา weremadeat ภูมิภาคกลางของ AGs ใช้เป็น LeicaRM2235microtome และจากนั้น วางบนภาพไซเลนเคลือบนิ่งและอากาศแห้งพักค้างคืน พาราฟินถูก deparaffinized กับพาราแล้ว rehydrated ผ่านชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ ย้อม ด้วยของแฮริสhematoxylin 1 นาที และ counterstained กับ eosin สำหรับ 2 นาทีพวกเขาถูกแล้วอบแห้ง ด้วยชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ ล้างไซลีน และเมาท์ใน Permount (Bio Optica มิลาน อิตาลี)ส่วนที่ถูกตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ Nikon คราส E600และถ่ายภาพ ด้วยกล้องดิจิตอล Nikon DXM1200หมายเลขชนิดเซลล์ใน AGsวัดจากส่วนข้ามที่สม่ำเสมอ ใช้ ImageJ ซอฟต์แวร์(http://rsbweb.nih.gov/ij/index.html), แล้วบันทึกไว้เป็นเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ทั้งหมด ใน BrdU ทดสอบกลุ่ม (ดูส่วน 2.5),หมายเลขของการแบ่งเซลล์ต่อพื้นที่ mm2 นับได้โดยการวิธีเดียวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

คงค้างคืนในตรึง Bouin ของวันที่ 4 ◦C พวกเขา
ถูกล้างแล้วกับเอทานอล 70% และแห้งผ่าน
ชุดของเอทานอลย้ายไปโทลูอีนที่มีแทรกซึมเข้าไปละลาย
พาราฟินและฝังตัวอยู่ในบล็อกพาราฟิน ส่วนอนุกรม 5? m
หนา weremadeat กลางพื้นที่ของกลุ่มโฆษณาโดยใช้ LeicaRM2235
microtome แล้ววางไว้บนไซเลนเคลือบภาพนิ่งและอากาศแห้ง
ในชั่วข้ามคืน ส่วนพาราฟินถูก deparaffinized กับไซลีน,
แล้ว rehydrated ผ่านชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ย้อมด้วยสีของแฮร์ริ
hematoxylin สำหรับ 1min และ counterstained กับ Eosin สำหรับ 2min.
พวกเขาแล้วแห้งด้วยชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ที่เคลียร์
กับไซลีนและติดตั้งใน Permount ( . Bio-Optica, มิลาน, อิตาลี)
ส่วนมีการตรวจสอบโดยใช้กล้อง Nikon คราส E600 กล้องจุลทรรศน์
. และถ่ายภาพกับ DXM1200 กล้องดิจิตอล Nikon
ตัวเลขของเซลล์ชนิดอยู่ในกลุ่มโฆษณาที่ถูก
วัดจากเครื่องแบบส่วนข้ามโดยใช้ซอฟแวร์ ImageJ
(http: //rsbweb.nih.gov/ij/index.html) แล้วบันทึกเป็นเปอร์เซ็นต์
ของเซลล์ทั้งหมด ในกลุ่ม BrdU ทดสอบ (ดูมาตรา 2.5)
ตัวเลขของการแบ่งเซลล์ต่อพื้นที่ mm2 ถูกนับโดย
วิธีการเดียวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คงค้างคืน Bouin เป็นฟิกเซทีฟที่ 4 ◦พวกเขาแล้วล้างด้วยแอลกอฮอล์ 70 % และน้ำผ่านชุดของเอทานอล โอนเข้ามาแทรกซึมกับละลายโทลูอีนพาราฟิน พาราฟิน และฝังตัวอยู่ในบล็อก ส่วน 5 อนุกรมหนา weremadeat ภูมิภาคกลางของ leicarm2235 AGS , ใช้เครื่องตัดชิ้นเนื้อ แล้ววางไว้บนเลนเคลือบภาพนิ่งและอากาศแห้งเพียงชั่วข้ามคืน ส่วนที่เป็น deparaffinized กับไซลีนพาราฟิน ,จากนั้นได้ทำการ รีไฮเดรทมผ่านชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ เปื้อนของแฮร์ริสย้อมให้เสีย counterstained กับ eosin และสำหรับ 2min .จากนั้นอบแห้งกับชุดของเอทิลแอลกอฮอล์ เคลียร์กับ ไซลีน และติดตั้งใน permount ( ไบออฟติคัล , มิลาน , อิตาลี )ส่วนที่ถูกตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ Nikon e600 คราสและถ่ายภาพด้วยกล้องดิจิตอล dxm1200 .ตัวเลขชนิดเซลล์ที่มีอยู่ในรุ่นคือวัดจากการใช้โปรแกรม ImageJ และเครื่องแบบ( http : / / html rsbweb . NIH . gov / IJ / index ) แล้วบันทึกค่าของเซลล์ทั้งหมด ใน brdu รายกลุ่ม ( ดูส่วน 2.5 )ตัวเลขของการแบ่งเซลล์ต่อพื้นที่แน่นถูกนับโดยวิธีเดียวกัน