Cheese samples and their water soluble extracts (WSN) were analyzed in duplicate by urea-PAGE, using the method of Andrews (1983) with direct staining using Coomassie Brilliant Blue G-250 (Blakesley & Boezi, 1977). Electrophoresis was carried out on a vertical slab unit (LKB vertical electrophoresis unit 2001, Bromma, Sweden) in slabs 140160 mm with thickness 1.5 mm. After destaining with water, gel slabs were digitized by a scanner (Hewlett Packard, ScanJet 4c/T) linked to an image processing system (GelCompar v. 4.0, Applied Maths, Belgium). A suspension of 240 mg cheese in 10 ml stacking gel buer, containing 6 M urea, 0.1 M - mercaptoethanol and 0.4 ml tracking dye solution, was kept at 40C for 15 min, and then centrifuged at 3000 g for 15 min at 4C. The solidi®ed fat layer was discarded and 10 ml of the supernatant were used for electrophor- esis. Equal volumes of WSN fraction and stacking gel buer, containing 9 M urea, 0.1 M -mercaptoethanol and tracking dye, were mixed and 50 ml of this sample were used for electrophoresis.
ตัวอย่างชีสละลายน้ำและสารสกัดของพวกเขา ( WSN ) วิเคราะห์ซ้ำโดยยูเรียหน้าโดยใช้วิธีของ แอนดรู ( 1983 ) ด้วยการใช้เหล่านี้น่าจะเป็น g-250 สีฟ้าสดใสโดยตรง ( blakesley & boezi , 1977 ) วิธีดำเนินการในหน่วยพื้นในแนวตั้ง ( lkb แนวตั้ง electrophoresis หน่วย 2001 bromma , สวีเดน ) ในแผ่น 140160 มิลลิเมตร ความหนา 1.5 mm . หลังจาก destaining ด้วยน้ำ , แผ่นเจลเป็นดิจิทัลด้วยเครื่องสแกนเนอร์ ( Hewlett Packard , ใจ 4C / T ) เชื่อมโยงกับระบบการประมวลผลภาพ ( gelcompar V . 4.0 ใช้คณิตศาสตร์ , เบลเยียม ) ระงับ 240 mg 10 ml ชีสซ้อนบูเจลเอ้อ ประกอบด้วย 6 M ยูเรียความเข้มข้น 0.1 M - mercaptoethanol และ 0.4 มิลลิลิตร สารละลายสีติดตามถูกเก็บไว้ที่ 4 องศา เป็นเวลา 15 นาที และระดับที่ 3 , 000 กรัม สำหรับ 15 นาทีที่ 4C . solidi ®เอ็ดชั้นไขมันที่ถูกทิ้งและ 10 ml ของ ที่นำใช้สำหรับ electrophor - esis . ปริมาณเท่ากันของเศษส่วน WSN และการซ้อนบูเจล ER ที่มียูเรียม 9 , 0.1 M - mercaptoethanol และติดตามสีผสม 50 มิลลิลิตร ตัวอย่างนี้ใช้สำหรับเรส
การแปล กรุณารอสักครู่..
