Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis
(SDS-PAGE)
SDS-PAGE was performed using a 10% polyacrylamide
gel containing 30% acrylamide solution, 1.5 M Tris-HCl
(pH 8.8), 0.5 M Tris-HCl (pH 6.8), 10% ammonium
persulfate, and TEMED. The extracted protein solution was
mixed with the same volume of 2 sample buffer composed
of 125 mM Tris-HCl (pH 6.8), 20% glycerol, 2% SDS, 2%
mercaptoethanol, and 0.02% bromophenol blue, and heated
at 95C on a heating block for 2 min. Pre-stained protein
markers (9 to 198 kDa) were used as molecular markers.
Electrophoretic separation was performed with the pageRun
system (AE-6531 mPAGE, ATTO Co., Tokyo, Japan) by
applying 40 mA for 40 min. The running buffer was
composed of 25 mM Tris, 0.1% SDS, and 192 mM glycine.
Proteins in the gels were stained with Coomassie Brilliant
โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต polyacrylamide gel electrophoresis
(SDS-PAGE)
ระบบ SDS-PAGE ถูกดำเนินการโดยใช้อะคริเลต 10%
เจลที่มีวิธีการแก้ปัญหาริลาไมด์ 30%, 1.5 M Tris-HCl
(pH 8.8), 0.5 M Tris-HCl (pH 6.8), 10 % แอมโมเนียม
เพอร์ซัลเฟตและ TEMED วิธีการแก้ปัญหาของโปรตีนที่สกัดได้เมื่อ
ผสมกับปริมาณเดียวกันของบัฟเฟอร์2ตัวอย่างประกอบด้วย
125 มิลลิ Tris-HCl (pH 6.8), กลีเซอรีน 20%, 2% SDS, 2%
mercaptoethanol และ 0.02% bromophenol สีฟ้าและน้ำอุ่น
ที่95 C บนบล็อกความร้อนเป็นเวลา 2 นาที Pre-เปื้อนโปรตีน
เครื่องหมาย (9-198 กิโลดาลตัน) ถูกนำมาใช้เป็นเครื่องหมายโมเลกุล.
แยกอิได้รับการดำเนินการกับ pageRun
ระบบ (AE-6531 mpage, ATTO Co. , กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) โดย
ใช้ 40 mA สำหรับ 40 นาที บัฟเฟอร์ทำงานถูก
ประกอบด้วย 25 มม Tris, 0.1% SDS และ 192 มิลลิ glycine.
โปรตีนในเจลที่ถูกย้อมด้วยสีสดใส Coomassie
การแปล กรุณารอสักครู่..

โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตโพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟเรซีส( การศึกษา )การศึกษาการใช้ 10% polyacrylamideเจลอะคริลาไมด์ที่มีโซลูชั่น 30% , 1.5 M หรือกรดเกลือ( พีเอช 8.8 ) , 0.5 M HCl ( บริษัทพีเอช 6.8 ) 10% , แอมโมเนียเปอร์ซัลเฟต และ temed . สารละลายสกัดโปรตีนผสมกับปริมาณของจำนวน 2 บัฟเฟอร์HCl หรือ 125 mm ( พีเอช 6.8 ) 20 % กลีเซอรอล 2% SDS , 2%mercaptoethanol และ 0.02 % โบรโมฟีนอลบลู และอุ่น95 C ป้องกันความร้อน 2 นาทีก่อนย้อมโปรตีนเครื่องหมาย ( 9 ถึง 198 กิโลดาลตัน ) ที่ใช้โมเลกุลเครื่องหมายรูปแบบการกระทำด้วย pagerunระบบ ( ae-6531 mpage อัตโต , บริษัท โตเกียว ประเทศญี่ปุ่น โดยใช้มา 40 40 นาที วิ่งบัฟเฟอร์ประกอบด้วยบริษัท 25 มม. , 0.1% SDS และไกลซีน 192 มิลลิเมตรโปรตีนในเจลถูกย้อมด้วยสีเหล่านี้น่าจะเป็นที่ยอดเยี่ยม
การแปล กรุณารอสักครู่..
