C. sporogenes strain ATCC15579 was

C. sporogenes strain ATCC15579 was grown anaerobically at
37
C in tryptoneeyeast medium (TY). Spores of C. sporogenes were
prepared in Robertson's cooked meat broth (Southern Group Laboratories)
incubated at 37
C for a period of 10 days. Spores,
vegetative cells and debris, were harvested by filtration (20 mm)
and cleaned using discontinuous density gradient centrifugation
(Plowman and Peck, 2002). The pellets were washed six times in
50 ml chilled sterile water, with centrifugation at 2000  g
(10 min). After each centrifugation step the top layer of the pellet,
consisting predominantly of vegetative cells, was discarded and the
bottom layer resuspended. Pellets were finally resuspended in 2 ml
water, layered onto 10 ml 50% (v/v) aqueous solution of sodium/
meglumine diatrizoate (Urografin 370, Schering, Germany) and
centrifuged (6000  g, 4
C, 40 min). The top layers containing
debris, vegetative cells and germinated spores were removed,
while the pellet, consisting predominately of phase-bright spores,
was resuspended in 50 ml water. Pellets were then washed a
further six times in sterile water (2000  g, 4
C, 10 min), resuspended
in 2 ml water and stored at 2
C. Microscopic examination
confirmed that the suspensions consisted of >99% phase-bright
spores. Two distinct crops of spores were tested and gave identical
results. Prior to use, spore suspensions were enumerated using
a haemocytometer and adjusted to a final concentration of
~1  108 spores/ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ต้องใช้ C. sporogenes ATCC15579 ถูกปลูก anaerobically ที่C 37 ใน tryptoneeyeast (TY) ถูกเพาะเฟิร์นของ C. sporogenesเตรียมในซุปเนื้อสุกของโรเบิร์ตสัน (ห้องทดลองกลุ่มภาคใต้)incubated ที่ 37 C เป็นระยะเวลา 10 วัน เพาะเฟิร์นมีการเก็บเกี่ยวผักเรื้อรังเซลล์และเศษ โดยการกรอง (20 mm)สะดวกใช้ centrifugation ไล่ระดับความหนาแน่นที่ไม่ต่อเนื่อง(Plowman และเป็ก 2002) เกล็ดถูกล้าง 6 ครั้งใน50 ml แช่ฆ่าเชื้อน้ำ centrifugation ที่ 2000 g(10 นาที) หลังจากแต่ละขั้นตอน centrifugation ชั้นบนสุดของเม็ดประกอบด้วยส่วนใหญ่ของเซลล์ผักเรื้อรัง ถูกปฏิเสธและชั้นล่าง resuspended ขี้ไม่สุด resuspended ใน 2 mlน้ำ ชั้นบน 10 ml 50% (v/v) ละลายของโซเดียม /diatrizoate meglumine (Urografin 370 เชริง เยอรมนี) และcentrifuged (6000 กรัม 4 C, 40 นาที) ชั้นบนสุดที่ประกอบด้วยเศษ เซลล์ผักเรื้อรัง และเพาะเฟิร์นเปลือกงอกออกในขณะที่เม็ด ประกอบด้วย predominately ของระยะสว่างเพาะเฟิร์นมี resuspended ในน้ำ 50 มิลลิลิตร แล้วถูกล้างขี้เพิ่มเติม ครั้งที่ 6 ในน้ำใส่ (2000 g, 4 C, 10 นาที), resuspended2 ml น้ำ และเก็บไว้ที่ c 2.ตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์ยืนยันว่า บริการที่ประกอบด้วย > 99% ขั้นตอนสว่างเพาะเฟิร์น พืชสองความแตกต่างของเพาะเฟิร์นทดสอบ และให้เหมือนกันผลลัพธ์ที่ ก่อนใช้ บริการสปอร์ที่ระบุโดยใช้แบบ haemocytometer และปรับความเข้มข้นสุดท้ายของ~ 1 108 เพาะ เฟิร์น/ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ซี sporogenes สายพันธุ์ ATCC15579 ปลูกแบบไม่ใช้อากาศที่
37 องศาเซลเซียสในระยะกลาง tryptoneeyeast (TY) สปอร์ของ sporogenes
ซีถูกจัดทำขึ้นในน้ำซุปเนื้อสัตว์ที่ปรุงสุกของโรเบิร์ต(ภาคใต้กลุ่มห้องปฏิบัติการ)
บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นระยะเวลา 10 วัน สปอร์เซลล์พืชและเศษถูกเก็บเกี่ยวโดยการกรอง (20 มิลลิเมตร) และทำความสะอาดโดยใช้การไล่ระดับความหนาแน่นต่อเนื่องหมุนเหวี่ยง(ชาวนาและ Peck, 2002) เม็ดถูกล้างหกครั้งใน50 มลแช่เย็นน้ำหมันด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 2000? ก. (10 นาที) หลังจากที่แต่ละขั้นตอนการหมุนเหวี่ยงชั้นบนสุดของเม็ดที่ประกอบด้วยส่วนใหญ่ของเซลล์พืชถูกทิ้งและชั้นล่างresuspended เม็ดที่ถูก resuspended ในที่สุด 2 มิลลิลิตรน้ำบนชั้น10 มล. 50% (v / v) สารละลายโซเดียม / meglumine diatrizoate (Urografin 370 Schering, เยอรมนี) และหมุนเหวี่ยง(6000 กรัม 4 องศาเซลเซียส 40 นาที) ชั้นบนสุดที่มีเศษเซลล์พืชและสปอร์งอกถูกถอดออกในขณะที่เม็ดประกอบด้วยส่วนใหญ่ของสปอร์เฟสสดใสถูกresuspended ใน 50 มล. น้ำ เม็ดถูกล้างแล้วอีกหกครั้งในน้ำหมัน (2000? กรัม 4 องศาเซลเซียส 10 นาที), resuspended ใน 2 มิลลิลิตรน้ำและเก็บไว้ที่ 2 องศาเซลเซียส การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ยืนยันว่าสารแขวนลอยประกอบด้วย> 99% เฟสสดใสสปอร์ สองพืชที่แตกต่างของสปอร์ได้รับการทดสอบและให้เหมือนกันผล ก่อนที่จะใช้สารแขวนลอยสปอร์ที่ถูกระบุโดยใช้สไลด์นับเม็ดเลือดและปรับให้มีความเข้มข้นสุดท้ายของ~ 1? 108 สปอร์ / มล.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

C . sporogenes เมื่อย atcc15579 โตพที่
37
C ใน tryptoneeyeast ขนาดกลาง ( ไท ) สปอร์ของ sporogenes ถูก
เตรียมในโรเบิร์ตสันสุกซุปเนื้อ ( กลุ่มห้องปฏิบัติการภาคใต้ )

บ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 วัน สปอร์ ,
เซลล์พืชและ debris ถูกเก็บเกี่ยวโดยการกรอง ( 20 มม. ) และความหนาแน่นของการใช้ความสะอาด
3
( คนที่ไถนา และจิ๊บ2002 ) เม็ดถูกล้าง 6 ครั้ง
50 มล. น้ำเย็นหมันกับปั่นที่ 2000  g
( 10 นาที ) หลังจากแต่ละขั้นตอน 3 ชั้นบนสุดของเม็ด ประกอบด้วยส่วนใหญ่ของพืช

เซลล์ถูกทิ้งและด้านล่างชั้น resuspended . อัตราสุดท้าย resuspended 2 ml
น้ำ ชั้น 10 มิลลิลิตร ลง 50 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) สารละลายของโซเดียม /
meglumine คุณหมอ ( urografin 370 200 , เยอรมนี ) และไฟฟ้า ( 6000  G ,
4
C 40 นาที ) ด้านบนชั้นประกอบด้วย
เศษเซลล์และสปอร์งอกถูกลบออก
ในขณะที่เม็ด ซึ่งเป็นส่วนใหญ่ของระยะสปอร์สดใส
คือ resuspended 50 ml น้ำ ขี้แล้วล้างเป็น
อีกหกครั้งในน้ำหมัน ( 2000  g 4
C 10 นาที ) resuspended
2 น้ำและเก็บไว้ที่ 2
C . กล้องจุลทรรศน์
ยืนยันว่าช่วงล่างมีระยะ > 99% สดใส
สปอร์ สองพืชที่แตกต่างกันของสปอร์ได้ผ่านการทดสอบและให้ผลลัพธ์ที่เหมือนกัน

ก่อนที่จะใช้สปอร์แขวนลอยถูกระบุโดยใช้การ haemocytometer และปรับให้สุดท้ายความเข้มข้น
~ 1  108 สปอร์ / มิลลิลิตร