mode is 0.0975 min. The total data collection time
was 60 min in this measurement.
Absorbance spectra at each time point were
generated by dividing the single beam spectrum
collected at a specific time by a background spectrum
and converting to absorbance using OMNIC
5.1 Microcal.. The difference spectra were calculated
by the subtraction of an absorbance spectrum
collected at time t after addition of solvent
from the first absorbance spectrum. The data
shown in the figures are from a single experiment.
For the kinetic results presented in the table, the
results from three separate experiments were averaged
and the reported errors represent the
standard deviation of the measurements. Kinetic
fitting was carried out using ORIGIN 5.0 Micro-
cal.. No smoothing was used for the equilibrium
or kinetic difference spectra, except nine-point
smoothing was used prior to the taking of second
derivatives.
Measurements under equilibrium conditions
were also taken. In this case the B. mori silk
fibroin membrane was examined without any
treatment and the membrane was also examined
after immersing in 70% ethanolr 30% D2O solution
for 24 h. For the latter measurements the
membrane was dried after ethanol treatment and
spectra were recorded using the normal scan
mode.
3. Results and discussion
3.1. FTIR spectra of regenerated B. mori silk fibroin
membranes under equilibrium conditions
FTIR spectra of B. mori silk fibroin membranes
as prepared and after immersion in ethanol
were recorded. To characterize the structure of
the polypeptide, we examined the FTIR spectra
in the amide I region. In Fig. 1a, it can be seen
that the amide I band in the B. mori silk fibroin
membrane without any treatment is a broad,
slightly asymmetric envelope with a center at
around 1650]1660 cmy1. Overall, these data are
characteristic of random coil andror silk I conformation
w26,40x. By contrast, the spectrum of
the amide I band of the silk fibroin membrane
immersed into ethanol, Fig. 1b, is quite complex,
with significant components around 1620 and 1695
cmy1, while the fraction of absorbance around
1655]1660 cmy1 is vastly reduced. In order to
examine the multiple components in the amide I
peak, second derivative techniques are used to
examine the spectra. From the second derivative
spectra in Fig. 1a, the peak around 1655]1660
cmy1 accords with the original spectrum and the
analysis did not reveal additional resolved subcomponents
except a possible additional component
at ;1680 cmy1, which becomes prominent
upon additional smoothing of the derivative spec-
trum not shown.. In Fig. 1b, the second derivative
analysis clearly reveals the two components
at around 1620 and 1695 cmy1, which are characteristic
of the b-sheet conformation w15,16,23x. As
in the original spectra, the peak attributed to
random coil andror silk I structure 1655]1660
cmy1 . is significantly diminished. The second
derivative spectra clearly show that b-sheet structure
is formed while random coil and silk I structure
are decreased after ethanol treatment.
The first spectrum in the dynamic measure-
ment recorded at ;0.1 min after the addition of
ethanol. is shown in Fig. 1c. It indicates a significant
amount of b-sheet structure was formed
during a burst phase occurring prior to the first
measurement. The second derivative reveals the
same general components seen in Fig. 1b, however,
a much greater amount of the random coil
structure exists. Ideally, this burst phase can be
easily obtained by calculating Abs Fig1c y
AbsFig1a .rAbsFig1byAbsFig1a .. However, the silk
fibroin samples for equilibrium and dynamic mea-
surements have different thicknesses though they
were cut from same membrane., so that the absorbance
spectra do not subtract well. This shortcoming
is very difficult to overcome because B.
mori silk membrane is very thin and brittle, and it
is difficult to measure the thickness accurately.
Moreover, the backgrounds of Fig. 1a,b air. and
Fig. 1c 70% ethanolr30% D2O. are not the
same, which makes for additional difficulties in
the subtraction of spectra. Despite the difficulties,
we found a feasible way to estimate the burst
โหมด 0.0975 นาที เวลาการเก็บรวบรวมข้อมูลรวม
เป็น 60 นาทีในการวัดนี้.
สเปกตรัมการดูดกลืนแสงที่จุดในแต่ละครั้งที่ถูก
สร้างขึ้นโดยการหารสเปกตรัมแสงเดียว
ที่เก็บรวบรวมในเวลาที่กำหนดโดยพื้นหลังคลื่นความถี่
และการแปลงที่จะใช้การดูดกลืนแสง OMNIC
5.1? Microcal .. สเปกตรัมความแตกต่างได้ คำนวณ
โดยการลบของสเปกตรัมการดูดกลืนแสง
เก็บที่เวลา t หลังจากที่นอกเหนือจากตัวทำละลาย
จากสเปกตรัมการดูดกลืนแสงแรก ข้อมูลที่
แสดงในตัวเลขจากการทดสอบเดียว.
สำหรับผลการเคลื่อนไหวที่นำเสนอในตาราง
ผลการทดลองจากสามแยกเฉลี่ย
และรายงานข้อผิดพลาดที่เป็นตัวแทนของ
ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของการวัด เกี่ยวกับการเคลื่อนไหว
ที่เหมาะสมได้รับการดำเนินการโดยใช้ ORIGIN 5.0? ไมโคร
แคล .. เรียบไม่มีที่ใช้สำหรับการสมดุล
หรือสเปกตรัมที่แตกต่างกันเกี่ยวกับการเคลื่อนไหวยกเว้นเก้าจุด
ที่ราบเรียบถูกนำมาใช้ก่อนที่จะมีการที่สอง
สัญญาซื้อขายล่วงหน้า.
วัดภายใต้เงื่อนไขที่สมดุล
นอกจากนี้ยังถูกนำ ในกรณีนี้ไหมบีมอริ
ไฟโบรอินเมมเบรนที่ถูกตรวจสอบโดยไม่ต้องมี
การรักษาและเมมเบรนที่ถูกตรวจสอบยัง
หลังจากแช่ใน 70% ethanolr 30% วิธีการแก้ปัญหา D2O
เวลา 24 ชั่วโมง สำหรับการวัดหลัง
เยื่อแห้งหลังการรักษาและเอทานอล
เปคตรัมที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้การสแกนปกติ
โหมด.
3 และการอภิปรายผล
3.1 สเปกตรัมของ FTIR สร้างใหม่ไหมไฟโบรอินบีสุดตา
เยื่อภายใต้เงื่อนไขที่สมดุล
สเปกตรัม FTIR ของ B. Mori เยื่อไหมไฟโบรอิน
จัดทำและหลังการแช่ในเอทานอล
ที่ถูกบันทึกไว้ ลักษณะโครงสร้างของ
polypeptide เราตรวจสอบสเปกตรัม FTIR
ในภูมิภาคเอไมด์ผม ในรูป 1a ก็สามารถมองเห็นได้
ว่าวงดนตรีผมเอไมด์ในบีไหมไฟโบรอินอริ
เมมเบรนโดยไม่ต้องรักษาใด ๆ ที่เป็นวงกว้าง
ซองสมมาตรเล็กน้อยกับศูนย์ที่
รอบ 1650] 1660 cmy1 โดยรวมข้อมูลเหล่านี้เป็น
ลักษณะของขดลวดแบบสุ่ม andror ไหมฉันโครงสร้าง
w26,40x ในทางตรงกันข้ามสเปกตรัมของ
วงผมเอไมด์ของเยื่อหุ้มผ้าไหมไฟโบรอิน
แช่ลงไปในเอทานอลรูป 1 ขค่อนข้างซับซ้อน
ที่มีส่วนประกอบที่สำคัญรอบ 1620 และ 1695
cmy1 ในขณะที่ส่วนของการดูดกลืนแสงรอบ
1655] 1660 cmy1 จะลดลงอย่างมากมาย เพื่อที่จะ
ตรวจสอบส่วนประกอบต่างๆในเอไมด์ผม
ยอดเทคนิคการอนุพันธ์อันดับสองจะใช้ในการ
ตรวจสอบสเปกตรัม จากอนุพันธ์อันดับสอง
สเปกตรัมในรูป 1a, จุดสูงสุดรอบ 1655] 1660
สนธิสัญญา cmy1 กับคลื่นความถี่เดิมและ
การวิเคราะห์ไม่ได้เปิดเผยย่อยแก้ไขเพิ่มเติม
ยกเว้นองค์ประกอบเพิ่มเติมไปได้
ที่; 1680 cmy1 ซึ่งจะกลายเป็นที่โดดเด่น
เมื่อเรียบเพิ่มเติม spec- อนุพันธ์
? trum ไม่ได้แสดงให้เห็น .. ในรูป 1 ขอนุพันธ์อันดับสอง
การวิเคราะห์แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนทั้งสองส่วน
อยู่ที่ประมาณ 1,620 และ 1,695 cmy1 ซึ่งเป็นลักษณะ
ของโครงสร้างขแผ่น w15,16,23x ในฐานะที่เป็น
ในสเปกตรัมเดิมสูงสุดประกอบกับ
ขดลวดแบบสุ่ม andror ไหมฉันโครงสร้าง? 1655] 1660
cmy1 จะลดน้อยลงอย่างมีนัยสำคัญ สอง
สเปกตรัมอนุพันธ์แสดงให้เห็นชัดเจนว่าโครงสร้างขแผ่น
จะเกิดขึ้นในขณะที่ขดลวดแบบสุ่มและผ้าไหมโครงสร้างฉัน
จะลดลงหลังการรักษาเอทานอล.
คลื่นความถี่ครั้งแรกในการวัดแบบไดนามิก
ment บันทึกที่; 0.1 นาทีหลังจากที่นอกเหนือจาก
เอทานอล แสดงในรูป 1c มันแสดงให้เห็นอย่างมีนัยสำคัญ
จำนวนของโครงสร้างขแผ่นที่ถูกสร้างขึ้น
ในช่วงการระเบิดที่เกิดขึ้นก่อนที่จะเป็นครั้งแรกที่
วัด อนุพันธ์อันดับสองแสดงให้เห็น
ส่วนประกอบทั่วไปที่เหมือนกันที่เห็นในรูป 1b แต่
เป็นจำนวนเงินที่มากขึ้นของขดลวดแบบสุ่ม
โครงสร้างที่มีอยู่ จะเป็นการดีที่ขั้นตอนการระเบิดนี้สามารถ
รับได้อย่างง่ายดายโดยการคำนวณ? Abs Fig1c Y
AbsFig1a .r? AbsFig1byAbsFig1a .. แต่ผ้าไหม
ไฟโบรอินสำหรับตัวอย่างสมดุลแบบไดนามิกและเด็ดขาด
surements มีความหนาแตกต่างกันอย่างไรแม้ว่าพวกเขาจะ
ถูกตัดออกจากเมมเบรนเดียวกัน. เพื่อให้ การดูดกลืนแสง
สเปกตรัมไม่ลบดี ข้อบกพร่องนี้
เป็นเรื่องยากมากที่จะเอาชนะเพราะบี
เมมเบรนผ้าไหมสุดตาเป็นอย่างมากและเปราะบางและมัน
เป็นเรื่องยากที่จะวัดความหนาได้อย่างถูกต้อง.
นอกจากนี้ยังมีภูมิหลังของรูป 1a ข? อากาศ และ
รูป 1c? 70% ethanolr30% D2O ไม่ได้
เหมือนกันซึ่งจะทำให้ปัญหาเพิ่มเติมใน
การลบของสเปกตรัม แม้จะมีปัญหาที่
เราพบวิธีที่เป็นไปได้ที่จะประเมินออกมา
การแปล กรุณารอสักครู่..
